分子生物学检验技术教学大纲

时间：2025-04-27

分子生物学检验技术教学大纲

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分子生物学检验技术教学大纲

第一章原核生物基因组和病毒基因组
[目的要求]
掌握基因的分子生物学定义;限制性片段长度多态性的概念；质粒的定义和用途；操纵子的结构
熟悉病毒基因组和细菌基因组的特点
原核细胞内核酸含量、种类、功能和组织结构的差异;
了解转座因子大肠杆菌、HIV和HBV基因组特点
[教学时数]
3学时
[讲授内容]
基因的概念基因的生物学定义、基因的分子生物学定义、细胞基因组

原核生物和真核生物生物种类、原核细胞和真核细胞内核酸含量、种
类、功能的差异
操纵子结构

病毒基因组：重叠基因 HBV和HIV等病毒的结构特点
细菌基因纽细菌染色体基因组的结构特点;大肠杆菌、质粒

[复习思考题]
名词解释
　　基因、质粒、断裂基因、假基因、限制性片段长度多态性、操纵子
　　问答题
　　　1·简述原核细胞基因组特点

第二章真核生物基因组
[目的要求]
掌握真核生物基因组的特点;单拷贝序列、中度重复序列和高度重复序列的概念

　　熟悉：染色质的结构和主要成分、核小体是染色质的基本结构单位

了解染色体形态、功能研究中所用术语与新技术简介、朊病毒

[教学时数]
3学时
[讲授内容] 真核生物学特点一般特点、C值矛盾、真核生物 DNA序列的类型(单拷贝序列、中度重复序列、高度重复序列、人多基因家族、DNA指纹技术(限制性片段长度多态性)
染色体的主要成分、染色体的分型、染色体疾病
[复习思考题]
　　名词解释
单顺反子、外显子、内含子、C值矛盾、单拷贝序列、中度重复序列、高度重复序列
　　问答题
　　真核生物基因组的特点

　　
　　第三章癌基因和抑瘤基因
　　[目的要求]
　　掌握癌基因和抑癌基因的概念；癌基因激活的机制
　　　　熟悉 sis家族、src家族、myc和myb家族、P53、RB家族及其表达产物；癌基因和抑癌基因的检测
　　　　了解肿瘤发生的步骤；结肠癌的发病步骤
　　[教学时数]
　　 3学时
　　[讲授内容]
　　肿瘤细胞的特征
　　肿瘤病毒和癌基因 DNA肿瘤病毒和癌基因;反转录病毒和癌基因

　
　肿瘤抑制基因肿瘤抑制基因存在的证据;RB基因
p53基因

　　肿瘤形成的多步骤学说多步骤学说的实验证据;人类直肠癌和多步骤致癌论

　　[复习思考题]
　　名词解释
　　癌基因、肿瘤抑制基因、反转录病毒
　　问

分子生物学检验技术教学大纲

答题
　　 l 简述RB基因和p53的功能

　　 2.原癌基因的激活的机制
　　
　　第四章蛋白质组和蛋白质组学
[目的要求]
掌握蛋白质组概念；二维电泳
熟悉蛋白质组的研究范畴；研究蛋白质组的基本方法（如酵母双杂交、凝胶滞后电泳等）
了解蛋白质的数据库；蛋白质的医学应用
[教学时数]
3学时
[讲授内容]
　　蛋白质组的概念和特点
　　蛋白质组的研究范畴
　　蛋白质和蛋白质的相互作用的研究方法（酵母双杂交、噬菌体展示、生物传感芯片质谱、蛋白质定点诱变）
　　蛋白质和核酸相互作用的研究方法（凝胶滞后试验、滤膜结合法、甲基化干扰实验、DnaseI足纹分析等）
　　蛋白质质点的分离和鉴定（二维电泳、质谱技术等）
　　蛋白质的结构分析
　　蛋白质的数据库
[复习思考题]
概念
蛋白质组、凝胶滞后实验
简答题
1. 蛋白质和核酸相互作用的研究方法有哪些？
2. 二维电泳的基本原理是什么？
3. 酵母双杂交系统的原理

第五章核酸的分离和纯化
[目的要求]
掌握基因组DNA的分离方法和原理；质粒DNA分离方法和原理；核酸的浓度和纯度鉴定
熟悉核酸分离的基本原则；RNA抽提；mRNA的分离和纯化
了解 CsCl-EB法的原理核酸的回收和保存
[教学时数]
3学时
[讲授内容]
　　核酸抽提的原则
　　核酸的分离、纯化、浓缩、洗涤
　　核酸的保存、浓度和纯度鉴定（紫外分光光度法、荧光光度法）
　　基因组DNA分离的原理
各试剂的主要用途
　　DNA的回收（DEAE纤维素膜插片电泳法；电泳洗脱法；低熔点琼脂糖凝胶回收法）
　　质粒DNA的提取和纯化（碱裂解法、煮沸法）
　　质粒DNA的纯化和回收
　　RNA的抽提和mRNA的分离
[复习思考题]
　　问答题
1. 酚-氯仿法抽提基因组DNA的原理
2. 质粒制备的主要方法是什么？并阐明其基本原理
3. 如何鉴定核酸的浓度和纯度

第六章 DNA重组概述
[目的要求]
掌握基因重组的主要工具酶和它们的作用；DNA重组的主要载体和它们各自的优点
熟悉克隆和DNA重组的概念、基因重组的基本步骤
了解基因重组的发展历史；重组DNA技术意义
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