核因子_B活化在脓毒血症急性肝损伤发病中的作用机制

核因子_B活化在脓毒血症急性肝损伤发病中的作用机制

江苏医药2008年1月第34卷第1期　JiangsuMedJ,January2008,Vol34,No.

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论著 核因子κB活化在脓毒血症急性肝损伤发病中的作用机制詹志林　江滨　周<　雷海鸣　张蕴春　卞建民

κ【摘要】　目的　探讨核因子κB(NF2B)活化在脓毒血症所致大鼠急性肝损伤发病中的作用机

制。方法　采用盲肠结扎穿孔(CLP)制作脓毒血症急性肝损伤模型,将大鼠随机分为3组:CLP组、二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)+CLP组、假手术组,观察术后24h标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(STB)、(UCB逆转录聚合酶链反应(RT2PCR)法和酶联免疫吸附法(ELISA)NBp65α)的含量变化。结果瘤坏死因子α(TNF2AL、

UCB,N2F2a,TC干预组肝组织

κNF2Bp65T、、UCB相应降低。结论　CLP所致脓毒

NF2TNF2a等炎症因子表达增加而参与大鼠急性肝损伤

κ发生;用PDTCNF2B活性能够降低肝组织中TNF2a表达,且能改善脓毒血症所致大鼠急性肝

损伤。

【关键词】　　核因子κB;脓毒血症;肝损伤;肿瘤坏死因子α

【中图分类号】　R394　　【文献标识码】　A　　【文章编号】　025323685(2008)0120069204

κBactivationinacuteliverinjuryinducedbysepsis　ZHANZhilin,JIANGTheroleofnuclearfactor2

Bin,ZHOUJin,etal.DepartmentofSurgery,AffiliatedNanjingFirstHospital,NanjingMedicalUniversity,Nanjing210006,CHINA

κκ【Abstract】　Objective　Toinvestigatethepotentialmechanismsofnuclearfactor2B(NF2B)

activationinacuteliverinjuryinducedbysepsis1Methods　Sepsis2associatedacuteliverinjurywasproducedbycecalligationandpuncture(CLP)inrats.TheratsweredividedrandomlyintoCLPgroup,pyrrolidinedithiocarbamate(PDTC)treatedgroup,andshamoperatedgroup.Twenty2fourhoursaftertheoperation,pathologicchangeswereexaminedunderopticalmicroscope,andtheindexes

κofliverfunctionsuchasALT,AST,STBandUCBweredetermined,andchangesinNF2Bactivity

α(TNF2α)levelsinlivertissuesweredetectedbyRT2PCRandELISA,andtumornecrosisfactor2

respectively.Results　http://www.77cn.com.cnpared

καlevelinlivertissuesweresignificantlytoshamoperatedgroup,bothNF2BactivityandTNF2

increasedinratswithsepsisinducedbyCLP,andtheindexesofliverfunctionincreasedaccordingly.

καlevelinlivertissues,andtheindexesofliverfunctiondegradedinAndtheNF2BactivityandTNF2

PDTCtreatedgroup.Conclusions　Thesepsiscanleadtoacuteliverinjury.SepsiscouldresultinNF2κκαexpressioninratswithacuteliverBactivationandNF2BassociatedupregulationofliverTNF2

καplayanimportantroleininjury.TheinappropriateactivationofNF2BandoverexpressionofTNF2

κthepathogenesisofsepsis2inducedacuteliverinjury,andPDTC,theinhibitorofNF2Bcanimprove

thisinjury.

κα【Keywords】　　Nuclearfactor2B;Sepsis;Acuteliverinjury;Tumornecrosisfactor2

[JiangsuMedJ,January2008,34(1):69272.]

　　脓毒血症是严重创伤、感染及大手术后常见的

病理综合征,可引起脓毒症休克及多脏器功能障碍

　　基金项目:南京市科技发展(20028057)

作者单位:210006　南京医科大学附属南京第一医院普通外科

肝胆研究室

责任作者:卞建民　E2mail:Jmbian0324@http://www.77cn.com.cn综合征(MODS),其死亡率高达40%。肝脏是脓毒症过程中最易受损的器官之一,脓毒血症患者出现κ肝功能异常预示病情加重。核因子κB(NF2B)是一种广泛存在于体细胞的核转录因子,在脓毒血症中参与炎性介质的转录和调控,发挥了重要的枢纽α)是引起多种促炎细作用。肿瘤坏死因子α(TNF2

核因子_B活化在脓毒血症急性肝损伤发病中的作用机制

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1胞因子和炎症介质失控性释放,导致脓毒血症的关键细胞因子。本研究拟通过盲肠结扎穿孔(CLP)复

制脓毒血症的急性肝损伤大鼠模型,研究CLP致

κα水平变化,了伤早期肝组织NF2B表达和TNF2

κ解NF2B的表达在脓毒症所致急性肝损伤发病中

的作用,为脓毒血症急性肝损伤的临床防治探讨理

论依据。

材料与方法

一、材料

健康清洁级雄性Wistar大鼠,体重250～280g

(购自中科院上海实验动物中心),二硫代氨基甲酸

吡咯烷(PDTC)、Trizol(Sigma公司,美国),大鼠

αELISA检测试剂盒(,)TNF2

((;(B奥地

利),(日本,AutomaticAnalyzer

76002020HITACHI),分光光度计(上海美普达

UV21800),PCR仪(MJRESEARCHPTL2200),电

泳仪(BIO2RADPowerPAC1000),凝胶成像系统

(上海复日科技FR2200)。

二、方法

11实验动物模型与分组　实验大鼠随机分为

假手术组、CLP组和PDTC+CLP组,每组8只。

实验前禁食16h,模型制作:CLP参照William等[1]

方法,CLP组(脓毒血症组)大鼠经2%戊巴比妥钠

(80mg/kg)麻醉,沿腹正中做5cm左右切口,在回

盲瓣下用320无菌手术丝线结扎(不造成肠梗阻),

将盲肠用18号针头穿孔两次,挤出少量粪便,将盲

肠放回腹腔,逐层关腹,术后即刻皮下注射3ml/kg

生理盐水复苏,置笼中每4小时观察动物一次。

PDTC+CLP组除术前30min腹腔注射PDTC100

mg/kg外,其他处理同CLP组;假手术组除不进行

盲肠结扎穿孔外,其余操作同CLP组。24h后,采

腹主动脉血2ml,3000r/min离心10min取上清,

-20℃保存备用;取中叶肝黄豆大小3份,2份置-

80℃冰箱备用,1份置装有10%甲醛的安培瓶中备

用。

21一般指标观察与方法　观察术后大鼠病态

表现,采用HE染色观察肝组织的病理变化。

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