人神经生长因子β基因转染对神经病理性痛大鼠脊(3)

麻醉

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１３ｌ

冻切片，按试剂盒说明书进行ｓＰ法免疫组织化学染色（ＳＰ抗体浓度ｌ：２００；ＣＧＲＰ抗体浓度ｌ：３００），ＤＡＢ显色，苏木素复染，棕黄色颗粒为阳性反应物。应用

Ｌｅｉｃａ

表２三组脊髓背角ＳＰ和ＣＧＲＰ含量的比较（ｎ＝４，ｉ±ｓ）

ＱＷＩＮ彩色病理图文分析系统进行计算机图像

分析，选用免疫阳性反应物的累积光密度值表示ＳＰ及ＣＧＲＰ的含量。

统计学处理应用ＳＰＳＳ１３．０统计学软件进行分析，计量资料以均数４－标准差（贾±ｓ）表示，组间及组内比较采用单因素方差分析，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。

结

果

与基础值比较，Ⅱ组和Ⅲ组转染后行为学评分升高（Ｐ＜０．０１）；与Ｉ组比较，Ⅱ组和Ⅲ组转染后行为学评分升高（Ｐ＜０．０１），但Ⅱ组与Ⅲ组间比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。Ⅱ组和Ⅲ组转染后机械痛阈与热痛阈均低于基础值，且低于Ｉ组（Ｐ＜０．０５或０．０１）；与Ⅱ组比较，Ⅲ组机械痛阈差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），转染后８—２４ｄ热痛阈升高（Ｐ＜０．０５），见表１。

术后Ⅱ组和Ⅲ组术侧脊髓背角ＳＰ及ＣＧＲＰ含量明显高于Ｉ组，Ⅲ组术侧脊髓背角ＳＰ及ＣＧＲＰ含量术后７—２８ｄ明显低于Ⅱ组（Ｐ＜０．０５）；与健侧比较，术后４ｄ时Ｉ组术侧脊髓背角ＳＰ及ＣＧＲＰ含量升高（Ｐ＜０．０５），术后Ⅱ组和Ⅲ组术侧脊髓背角ＳＰ及ＣＧＲＰ含量明显升高（Ｐ＜０．０５），见表２。

讨

论

与Ｉ组术侧比较．‘Ｐ（０．０５与Ⅱ组术侧比较，’Ｐ＜０．０５与健侧比较，６Ｐ＜Ｏ．０５

舔后足等表现）及热痛觉过敏，表明大鼠神经病理性痛模型制备成功。

研究表明，感觉神经元可释放与脊髓痛觉信息传递有关的ＳＰ和ＣＧＲＰ［Ｉ引。ＳＰ作用于突触后膜ＮＫＩ受体，促进伤害性信号传递，参与脊髓背角神经元的敏化，促进神经病理性痛的发生¨“。ＣＧＲＰ与ｓＰ共存于感觉神经元中，且ＣＧＲＰ可促进ＳＰ的释放，抑制ｓＰ降解酶（ＳＰ内切酶）的活性，延长Ｐ物质的作用时间，在神经病理性痛大鼠脊髓背角及背根神经节内ＣＧＲＰ及ＳＰ含量均升高¨引。

本研究结果表明，Ａｄ—ｈＮＧＦｐ基因脊髓转染后，神经病理性痛大鼠的热痛觉过敏，脊髓背角ＳＰ及ＣＧＲＰ含量降低。ＮＧＦ参与调节ＣＧＲＰ的合成，可降低神经损伤后脊髓背角升高的ＣＧＲＰ【１３Ｊ“，其机制可能为：（１）ＮＧＦ可诱导投射到脊髓背角的初级感觉神

本研究参照文献［５］中介绍的方法制备大鼠神经病理性痛模型，ＣＣＩ术后３～４ｄ大鼠出现明显的神经病理性痛症状：自发性痛（自噬现象、警觉、频繁

表１三组转染前后不同时点行为学评分、机械痛阙及热痛阈的比较（ｉ±ｓ）

与Ｉ组比较，。Ｐ＜０．０５‘Ｐ＜Ｏ．０１与Ⅱ组比较．６Ｐ＜Ｏ．０５与基础值比较．☆Ｐ．（０．０１