胶回收试剂盒说明书(生工)(5)

e. 提高Buffer B2的相对浓度，增加 DNA与吸附膜的作用时间（静置时间），在一定程度上可以提高回收率。

f. 如果纯化的片段长度大于4 kb或者目的片段含量较少，可以将洗脱液再次加入至吸附柱中进行洗脱，以提高回收效率。 g. 洗脱液加入位置不正确。洗脱液应加在硅胶膜的中心部位，以完全覆盖硅胶膜的表面，达到最大的洗脱效率。

h. 洗脱液不合适。洗脱缓冲液的pH值对洗脱效率有影响，如果使用水进行洗脱，请确保其pH值 > 7.0，pH值过低可能

导致低洗脱效率。

i.

2. 回收DNA进行后续酶切反应效率低

a. 洗脱产物中含有残留的乙醇。可将离心后的吸附柱开盖室温干燥2-5分钟，有助于残留的酒精挥发完全。

b. 盐份的残留。请确保使用Wash Solution洗涤两次，每次500 µl沿管壁加入，有助于彻底去除管壁上的盐份。 c.

3. 琼脂糖凝胶胶块不溶

a. 琼脂糖质量差。请选用高质量的琼脂糖。

b. 含目的片段的胶块在空气中放置时间过长，使胶块失水、干燥。建议切胶后立即进行胶回收，或将胶块保存在4°C或-20°C

备用。

c.

4. 洗脱液的选择

洗脱液可以根据后续实验的需要来确定。一般情况下，若需要进行测序反应，请用双蒸水洗。

配制琼脂糖凝胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。应重新配制缓冲液。 琼脂糖质量差。请选用高质量的琼脂糖。 洗脱时间过短。洗脱时放置1分钟可达到较好的洗脱效果。洗脱时将洗脱液预热至60°C后使用，有利于提高洗脱效率。