<医学生物学实验>整理

1. 常用的吸量管有：

奥氏吸量管、移液管、刻度吸量管

4. 如何正确使用吸量管？

答：(1) 选用原则：就近原则

(2) 吸量管的使用：吸-擦-调-放

5. 如何正确使用微量加样器？

答：转-按-吸-擦-按

6. 如何正确使用离心机？

放置-装管-平衡-启动-取出

二、主要实验方法原理

1.分光光度法基本原理是什么？

答：不同物质由于其分子结构不同，对不同波长光线的吸收能力也不同，因此每种物质都具有其特异的吸收光谱，在一定条件下，其吸收程度与该物质浓度成正比，故可利用各种物质的不同的吸收光谱特征及其强度, 对不同物质进行定性和定量的分析。分光光度法常被用来测定溶液中存在的光吸收物质的浓度，其基本原理是根据Lambert和Beer定律。该定律阐明了溶液对单色光吸收的多少与溶液浓度及溶液厚度之间的关系。

2. 利用分光光度法对物质进行定量测定的方法主要有哪两种？

答：直接比较法（公式法）、标准曲线法

3. 层析法基本原理是什么？

答：层析法就是利用混合物在经过固定相和流动相两相的过程中，其中的待分离物质在不同的两相中不断地进行交换、分配、吸附及解吸附等过程，由于混合物中各组分间在理化性质如吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等方面存在着差异，因此当它们经过上述相同重复过程时，各自的情况就会有所不同从而使各物质得以分离。

4. 常用的层析法有哪几种？

答：薄层层析、离子交换层析、凝胶层析、亲和层析。

5. 离子交换剂的作用原理是什么？

答：①阳离子交换剂吸附阳离子；②阴离子交换剂吸附阴离子；

当离子结合到固定相交换基团上以后，用提高流动相中离子强度或改变pH的办法，把它们从离子交换剂上依次洗脱下来，达到分离纯化的目的。

6. 凝胶层析的作用原理是什么？

答：分子筛

7．亲和层析的作用原理是什么？

答：亲和层析是以能与生物分子进行特异结合的配基作为固定相，对混合物中某一生物分子进行高效分离纯化的层析技术。

9. 影响电泳的主要因素是什么？

答：

(1) 电泳溶液的pH值|: 当溶液的pH值等于某种两性电解质的等电点时，不带电荷。当溶液pH小于其等电点时，则呈正离子状态，移向负极；反之，溶液pH值大于其等电点时，则呈负离子状态，移向正极。

(2) 缓冲液的离子强度: 离子强度低，电泳速度快，分离区带不易清晰；离子强度高，电泳速度慢，但区带分离清晰。常用离子强度为0.02~0.2。

(3) 电场强度: 电泳速度和电场强度成正比关系。电场强度愈高，则带电粒子的移动愈快，但电压增加，相应电流也增大，电流过大时易产生热效应, 可使介质中溶液蒸发及生物样品