MRSA的随机扩增多态DNA分型研究

时间：2026-01-20

通货膨胀相关的系列论文,包括通货膨胀的相关经济知识,通货膨胀经济形势下的各种矛盾和解决办法,例如人民币升值问题、外汇储备问题、农产品价格和CPI的变化和人民生活相关的方方面面。

广

医

科

大

学

报

J OURNAI J OF GU ANGXIM E C DI AL UNI R SI VE I RS TY

2 0 t 2 ( ) 0 9 Oc; 6 5

MRS的随机扩增多态 DNA分型研究 A吴晓宁覃锦耀周元圆韦惠如南宁 5 0 2 ) 30 1

(广西医科大学第一附属医院临床医学实验部

摘要目的：用随机扩增多态性 DN技术 ( P )对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ( s进行基因分型研究，确定医院应 A RA D, MR A)以内是否存在 MR A流行。方法： S收集我院临床分离的 4 O株 MR A,用 R D技术进行同源性分析。结果： 0 MR A经 S采 AP 4株 S

电泳可得到 1 1条片段，为 6个基因型。结论： AP分型技术简便、速，医院感染流行病学调查中具有较大应用价~ 1分 R D快在值。

关键词

MR A; AP基因分型 S R D;文献标志码： A文章编号：0 59 0 2 0 ) 50 3— 2 1 0— 3 X( 0 9 0— 7 10

中图分类号： 7 . 1 R3 8 1

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ( S是医院感染的重要 MR A)病原菌之一，所造成的院内感染一直是临床普遍关注的问其题 _。MR A大多表现为多重耐药，仅对内酰胺类抗 1’ S不

123 D . . NA的扩增：物：’ C C AC GA 3。反应体引 5。 G T C一’ C系：总体积 5 L, 1×P R扩增缓冲液 5 5 0mmo/ O肛含 0 C I 0 ( lIKC1 0 .1 0mmo/ ih Hc H一 8 4,2 lL Tr— lp s . 0mmo/ g ) 4 lIM 、

生素耐药，常对喹诺酮类、基糖苷类和大环内酯类等抗还氨生素耐药，导致的感染治疗较困难，亡率极高。因此，其死采取有效的流行病学分型手段监测 MRS分析其来源、布， A,分对确定 MR A引起的感染暴发及其传播途径，而采取有效 S进的控制非常必要。中，机扩增多态性D其随 NA技术 ( AP R D)已广泛应用于 MR A分子流行病学研究。本实验利用此技 S术分析我院临床分离的 MR A,了解其在我院的流行情 S以况

,为进一步实验研究奠定基础。并

种 d T N P各 2 0 I、板 DN L、物 1 2 lI,增 0 模 A2引 5//扩 mo条件： 4℃ 4mi ( 4℃ 4 , 6℃ 4 , 5℃ 2mi ) 5 9 n,9 0S 3 0S6 n×3 循环， 5℃ 5mi。 7 n

1 24 D . . NA扩增产物分析：扩增产物及 MAR各 1 I取 K O 点样于 1 2琼脂糖凝胶进行电泳， 0 4 n并于计算 . 1 0 V, 0 mi,机凝胶成像系统拍照分析。 1 2 5 R P聚类分析：用 C o sC e k r 2和 N y . . A D采 r s h c e Ts s

2 1件对 RA D电泳图谱绘制成树状图进行聚类分析。 .软 P

1材料与方法1 1材料 .

2结果 2 1 MR A的来源与分布： O株 MR A, . S 4 S自分泌物分离出 1 6株， 4%;标本 1占 O痰 2株， 3;液 1占 O血 0株， 2;占 5胆

11 1菌株来源：集 2 0 . .收 0 7年 3~7月本院微生物实验室自临床标本培养分离出的金黄色葡萄球菌，头孢西丁纸片法经

汁、列腺液各 1株。主要分布在烧伤科 ( 4例，5 o,C 前 1 3Y)IU( 7例，7 5 )肝胆外科 ( l ., 5例， 2 5 )儿科、内科、吸 1.%,肾呼

筛检出 MR A 4 S 0株，载体保藏法于一 2用 O℃保存。1 1 2主要试剂：脂型基因组 D ..树 NA提取试剂盒、 C扩 P R增试剂盒 ( E s-D P R P e X,扩 Ta A聚合即 ay O C rMI包 qDN酶、O C 1×P R缓冲液、 NT S、料、定剂 )随机引物 (’ d P染稳、 5一 C G T C一’ (京赛百盛公司 ) C C AC GA 3 )北。溶菌酶 ( oa b Sl i r o公司)。头孢西丁纸片 (国 0X(I。英 )D)

内科各 3,诊 2例，例门内分泌科、染科、科各 1例。传骨2 2 MR A的 R D电泳结果： O株 MRS电泳后，扩 . S AP 4 A可增出 1 1带，子量在 1 0 10 0 b~1条分 0~ 0 p之间，图 1通见。

过聚类软件分析，分为 6个基因型，中 A型 2可其 o株 (株菌l 2、、、、、 4、 6、 7

1、 3、 4、 8 3、 5 3 )、 5 7 8 9 1 1 1、 8 2 2 2~ 3 3、 6,B型 1 2

1 1 3主要仪器、备： e m l t n C r o ai C ..设 Th r o E e r o p r t n P R co o仪， y e eG n nn全自动凝胶成像仪。 S s n e e Ge is1 2方法 .

株(菌株 3 1~2、 5 2 3 3~3 ) C型 1株 (株 6,、 9 2 2~ 7、4、 7 9,菌 ) D

型 4株 (菌株 4 1、 3 4 ) E型 2 (株 1、 5,、 O 1、0,株菌 1 1 ) F型 1株(株 l )菌 2。

1 2 1 MRS的鉴定：照 C I美国临床实验室标准化 . . A按 I ( S

协会 )20 0 7版的标准进行。头孢西丁纸片扩散法抑菌圈直径≤ 1 9mm为耐药、 2 ≥ 0mm为敏感。控菌株 A C 5 2。质 TC 2 9 3 1 2 2 MR A基因组 D . . S NA的提取：格按照说明书要求操严作。

1广西医科大学 20级医学检验本科生 03收稿日期： 0 8 1 - 1 2 0— 23

广西医科大学学报

20 t2 () 0 9Oc; 6 5

0 0b 0 p 9 0b 0 p 8 p 00 b 7 0b 0 p 6 0b 0 p 5 0b 0 p 4 0b 0 p 3 0b 0 p 2 0b 0 p 10b 0 p