液相色谱仪常用的检测器主要有紫外、荧光和电化学检测器。这些检测器的作用就是收集流经色谱分离柱的各组分在检测器中的信号，根据组分光吸收值/荧光强度/电极表面电流的变化计算出组分的浓度[4]。各检测器常见故障主要有：

4．1 基线噪音较大和对策

对于紫外检测器，氘灯光源打开后要预热30分钟以上，基线才能稳定。

氘灯用的过久，接近受命期时（氘灯的寿命约束1000小时），会使基线噪音明显增加，应及时更换氘灯。除光源外，流路中的气泡也会产生噪音。怎样判断基线噪音增大是由于光源灯的老化还是来自流路中的气泡？可将泵关上，继续走基线，如果噪音立即停止，基线呈一条直线，说明基线噪音来自流动相中的气泡，应设法排气；若停泵后仍有噪音出现，应考虑是灯的问题。

电化学检测器中的工作电极（安培型）对气泡十分敏感，仪器的平衡时间较长。流路中如果有气泡存在，不仅基线会出现尖峰，还会影响检测。因此，做电化学检测时，流动相的配制要很严格，水要超纯、除还原物，配好后一定要过滤脱气，还应现用现配。如果泵系统不是PK材料，即电化学分析专用仪器，而是普通的高效液相色谱不锈钢泵，应对系统中的不锈钢材料的输液泵、进样器和管道，在分析前用6mol/L硝酸溶液钝化（注意断开分离柱），可缩短基线平衡时间。还可在流动相中加入EDTA离子隐蔽剂，也是可以的。如果有较大的气泡进到检测器中，光靠泵冲有时太慢，可暂时将泵停止，关上电化学检测器，拆下工作电极，用超纯水冲洗电极表面，也很奏效的，但对液相色谱技术不太熟练的技术员要小心操作，不宜反复这样拆卸。

4．2 检测器污染及对策

管道污染阻塞是检测器常见故障。当流动相用了缓冲盐更换流动相又不当时，常会在检测器管路中产生沉淀，可先用5倍柱积的水冲洗，再用10倍柱积的强溶剂（如乙腈）流过，再用50倍的柱体积的异丙醇冲洗，最后换上反相流动相平衡。当检测器管路堵塞时，可表现为柱压升高，此时，应和柱头堵塞相区分。可断开柱子，直接接检测器，如泵压仍较高，可判断压力升高是由于检测器管道堵塞造成。检测器进口是常发生阻塞的地方，正向冲洗效果常不明显，我们的经验是将检测器进出口管道对调，用6mol/L硝酸溶液反冲检测器，能很快将阻塞冲开，但要注意用低流速冲洗，观察压力变化。

检测池阻塞和污染多见紫外检测器。池阻塞也可用上述方法反冲，一般都能疏通。通常，池阻塞的故障比较少见，而池污染常发生，如不干净的样品在池窗上积聚等，都会造成检测池污染。表现为基线噪音增大，仪器灵敏度下降。可用注射器依此回抽异丙醇、6mol/L硝酸，要小心操作，将池中的污物冲洗干净，最后用100ml纯水正向冲洗检测池。反向冲洗还可防止池渗漏。对于电化学检测器，要注意维护工作电极表面的清洁度，当检测器检测了大量较脏的样品（如血浆、尿液）或用的过久，应用化学法或物理抛光法对电极表面进行清洁，可提高一定的检测灵敏度，但要注意，最后一定要用纯水冲洗干净，不要带来其它污染。

我们仅就有限的篇幅谈了一点从事液相色谱分析工作的经验，还有许多问题需要我们大家共同交流和探讨。高效液相色谱仪是现代科学研究中广泛使用的分析仪器，但我们必须学会正确的使用和维护，才能更好的驾驭它，让HPLC技术在医学领域发挥更大的作用。

【专题】高效液相色谱仪使用遇到的问题

高效液相色谱仪的几个使用问题

.1. 色谱柱中的流动相会排干吗？

不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动