银杏酮酯联合芹菜素预处理对大鼠心肌缺血再灌(4)

thatofischemiagroup．PathologicaldamageofmyocardialcellsinGinkgobilobaextract50jointApigeningroup100mg/kgwassignificantlylighterthanthoseofGinkgobilobaextract50group100mg/kgandApigeningroup100mg/kg．Conclusion：OurresultsindicatethatGinkgobilobaextract50jointApigenin100mg/kghaveasignificantlyprotectiveeffectonheartischemia/reperfusioninjuryinratsthanGinkgobilobaextract50group100mg/kgandApigeningroup100mg/kgbecauseitcanincreaseSODinhearttissue，decreaseIL-6inhearttissue．Keywords

Ginkgobilobaextract50（银杏酮酯）；apigenin（芹菜素）；heartinjury；ischemia/reperfusioninjury

灵芝多糖对D-氨基半乳糖所致小鼠急性肝损伤的保护作用

*

112

周婕，周宏星，陈玉胜＊＊

2

（1丹阳市人民医院，丹阳212300；南京晓庄学院生物化工与环境工程学院，南京211171）

目的：研究灵芝多糖对D-氨基半乳糖（GalN）所致小鼠急性肝损伤的保护作用以及对肝脏抗氧化活力的影响。方

模型组、灵芝多糖50mg/kg剂量组、灵芝多糖100mg/kg剂量组、灵芝多糖200mg/kg剂量组及联法：将60只小鼠随机分为正常组、

苯双脂100mg/kg剂量（阳性对照）组。每日灌胃给药1次，连续7d。试验末期，腹腔注射GalN（800mg/kg）建立小鼠急性肝损伤模

6h后摘眼球取血及肝脏，型，比色法检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL），以及肝脏丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）含量和超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化过氧化脂质（LPO）、

Px）活性。结果：100、200mg/kg灵芝多糖及100mg/kg联苯双脂显著降低GalN诱导的急性肝损伤小鼠血清ALT和物酶（GSH-AST活性及TBIL含量，CAT，GSH-Px活性。结论：灵提高血清ALB水平，显著降低肝组织LPO和MDA含量，升高GSH水平和SOD，芝多糖对GalN所致小鼠急性肝损伤具有保护作用，其机制可能与抗氧化作用有关。

关键词灵芝多糖；联苯双脂；肝损伤；抗氧化

摘要

DOI:10.13412/ki.zyyl.2014.05.027现代研究结果表明，灵芝（Ganodermalucidum）含有多种活性成分，灵芝多糖可提高机体免疫力及耐缺氧能力，能消除自

抑制肿瘤生长，抗辐射，抗衰老，提高肝脏、骨髓和血液合由基，

［1，2］

ＲNA及蛋白的能力等。本试验利用D-氨基半乳成DNA，

糖（GalN）所致小鼠化学性肝损伤模型，观察灵芝多糖的抗肝脏氧化应激作用，旨在为灵芝在肝病防治中的应用提供科学依据。

加热15分钟，取出，放入冰浴中冷却15分钟，以相应的试剂为空白，按紫外可见分光光度法，在625nm波长处测定吸光度，以对照品溶液质量为横坐标，绘制标准曲线。吸光度为纵坐标，

灵芝多糖纯度测定取制备的灵芝多糖滤饼0．1g于烧杯中，分次加入少量双蒸水，超声使溶解，转移至100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。取上述溶液1ml置10ml具塞试管3个平行，中，按标准曲线制备方法测定625nm吸光值，根据标准曲线算得灵芝多糖纯度为96．01%。联苯双酯购于南京市鼓楼医院，由北京协和制药厂生产，批号为H11020980。1．2动物60只清洁级、雄性昆明小鼠（20±2）g，购自南京市青龙山动物中心。生产许可证号：SCXK（苏）2014-0005。

12h光照/12h黑暗，饲养条件为：温度（24±2）℃，常规饲料，

自由饮水进食。适应5d后用于试验。1．3

试剂GalN购自Sigma公司，谷丙转氨酶（alaninetrans-aminase，ALT）、谷草转氨酶（aspertateaminotransferase，AST）、白蛋白（albumin，ALB）、总胆红素（totalbilirubin，TBIL）、丙二

过氧化脂质（lipidperoxidase，醛（malondialdehyde，MDA）、

LPO）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）、过氧化氢

酶（catalase，CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathionperoxi-Px）、SH，GSH）、dase，GSH-还原型谷胱甘肽（glutathione-及蛋白质测试盒，均购自南京建成生物工程研究所。1．4

UV-759）；旋转蒸紫外可见分光光度计（上海精科，

ＲE-2000B）。发器（上海亚荣，

1．5方法60只供试小鼠随机分为6组，分别为正常组、模型

仪器

100，200mg/kg剂量）组和联苯双酯（100mg/组、灵芝多糖（50，

1

1．1

材料与方法

试验药物

灵芝多糖由南京晓庄学院生化环院微生物学

实验室提取和制备。灵芝（Ganodermalucidum）由江苏省农业

科学院提供，江苏食用菌协会张李阳教授鉴定。取供试品约100g，90～95℃加热粉碎，置1000ml圆底烧瓶中，加水500ml，回流1小时。过滤，滤液备用。残渣加水400ml，加热回流1小时。过滤，弃去滤渣，合并两次滤液，浓缩至200ml，加等量无水静置过夜，抽滤，滤饼干燥至无醇味，得9．45g（得率9．乙醇，45%），备用。《中华人民共和国药典》参照2010年第一部"灵芝"项下"含量测定"方法，测定灵芝多糖的纯度。标准曲线的制备精密称取葡萄糖对照品适量，加双蒸水制成0．1mg/ml对照品标准溶液。分别精密吸取对照品溶液0，0．2，0．4，0．6，0．8，1．0，1．2ml，置10ml具塞试管中，加双蒸水至2．0ml，精密加入硫酸蒽酮溶液（精密称取蒽酮0．1g，加80%的硫酸溶液100ml使溶解，摇匀）6ml，摇匀，置沸水浴中

*基金项目：南京晓庄学院校级重点学科基金项目（XZZDXK201203）

＊＊

通讯作者