地中海贫血的相关研究进展(2)

发布时间：2021-06-08

基因诊断又称分子诊断是通过对受检者某一特定基因（DNA）或某转录物（mＲNA）进行分析来诊断遗传病的技术。1983年Mullis建立PCＲ技术，多年来，这种技术在实际运用中发挥了重要的作用，为遗传病的诊断提供了更加可靠的依据

［15］

等

［22］

通过比较妊娠期各阶段、产后妇女血浆中胎儿

细胞内DNA和胎儿游离DNA证实，孕妇外周血中胎儿游离DNA的代谢动力学相对于有核红细胞DNA具有浓度高、清除快、高敏感性、易于分析等特经过较漫长的摸索阶段，孕妇血浆征。在此基础上，

中游离的胎儿DNA检测终于在β－珠蛋白突变检

［23］

测中获得突破。2008年Galbiati等采用PNA钳

。地中

海贫血的发病和珠蛋白合成受阻有关，大多数患者均是由于珠蛋白合成缺失而导致。地中海贫血的发还被认为与基生目前除被认为与DNA构造相关外，因转录翻译过程密切关联

［16］

以微电子芯片技术对32例孕妇通过检测7个夹术，

常见的β珠蛋白突变，得到100%的准确度和98.3%的特异性；2008年龙兴江等［24］利用二次PCＲ反应及反向斑点杂交检测胎儿的β－珠蛋白基因型，结果在37例妇女血浆中胎儿游离DNA标本检测中，检出重型β－地中海贫血19例，轻型β－地中海贫血11例，正常7例，与创伤性产前诊断结果相比较出现3例误诊，准确率为91．9%（34/37）。2011年李广华等［25］利用二次PCＲ反应及反向斑点杂交检测胎儿的β－珠蛋白基因型，结果在9例孕妇中有5例经羊水检测证实胎儿有父系的β－地中有2例孕妇外周血中检测到胎儿（父海贫血基因，

与羊水检测相符；另外3系）的β地中海贫血基因，

例出现了检测偏差。实践证实，利用孕妇外周血浆中胎儿游离DNA进行地中海贫血基因的无创性产前诊断，可大大减轻孕妇的思想负担，维护孕妇和胎儿健康。但是由于母源性DNA背景的污染，以及胎儿DNA含量低等可能导致检出率存在一定偏差，因此该技术尚处于探索研究阶段，未正式在临床应用。2．4超声波技术在重型α－地中海贫血检测中的应用

超声技术应用于产科观察胎儿并诊断胎儿产前诊断已有30余年的历史，随着超声医学工程技术的飞速发展，其诊断的敏感性和准确性得到了很大的提高。重型α－地中海贫血胎儿由于贫血导致了血浆胶体渗透压降低、心衰和胎儿水肿，在超声声像图上常表现为胎儿全身皮肤水肿、胸腹水、肝脾肿大、心脏增大以及胎盘增厚等；此外，由于贫血胎儿红细胞压积降低导致血液黏稠度降低，全身血液处于高循环动力状态，血流动力学指标异常。这些临床表现，在孕中期产前超声均能探测到。因此，超声检测胎儿水肿已经成为重型α－地中海贫血产前筛查和

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诊断的常用方法。1999年Lam等研究发现，重

，所以以DNA为水平

的基因检测可以更好地预防和诊断地中海贫血，基因诊断中的探测物为患者某一特定基因，探测内容

［17，18］

。我国对地中海贫至少应包括DNA与mＲNA

血的基因诊断始于20世纪80年代初，先后经历了DNA点杂交、限制性内切酶酶谱分析、限制性内切片段长度多态性（ＲFLP）链锁分析、寡核苷酸（ASO）探针杂交、聚合链酶反应（PCＲ）体外基因扩增和芯片技术等6个发展阶段。PCＲ及其相关发展技术，已成为最为普遍的地中海贫血诊断方法。基因检测减少地中能够大大提高地中海贫血检测的准确性，因此基因检测又被称之为是诊断海贫血的漏检率，

地中海贫血的金标准。地中海贫血是世界上最早应用DNA诊断技术进行产前诊断的人类遗传病。

地中海贫血诊断基因芯片（ThalachipTM）是一种基于DNA芯片技术识别中国地区已知地中海贫血基因型的新技术，专为快速检测α和β珠蛋白基因中的DNA缺失和突变而设计，能够同时检测中国

3．74．2

地区最常见的β－地中海贫血和－α、－α和－

SEA3种α－地中海贫血［10］。与传统方法比较，基因芯片诊断技术在核酸扩增的基础上，采用荧光标记及引物延伸的方法，可提高检测结果的敏感性和特异性。地中海贫血诊断基因芯片具有简便、省时等特点

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。由于基因芯片高通量特点，可将α、β。

地中海贫血基因诊断在一张芯片上完成，适用于大人群普查

［20］

2．3胎儿产前无创性基因检测

随着对地中海贫血分子基础认识的深入，及特异基因突变检测技术能力的提高，尤其是20世纪50年代研究人员从孕妇外周血中发现胎儿细胞后，如何利用游离在孕妇外周血中的胎儿细胞进行无创性产前诊断的应用研究便如火如荼地开始了。1997年Lo等

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