葛根不同提取工艺的实验研究

金 福,易 红,冯伟红,杨 华

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(1 浙江省临海市第二人民医院,浙江临海317016;2 中国中医科学院中药研究所,北京100700)

葛根为临床常用中药,为豆科植物野葛Puerar ialobata(Wild.)Ohwi的干燥根,具有解肌退热、升阳透疹、生津止泻的功效。葛根又属于药食同源,也

广泛地被应用于保健食品和食品中。现代化学、药理研究结果认为葛根中以葛根素为代表的异黄酮类成分具有改善心、脑血液循环,扩张冠状动脉,降血压,降血糖等作用,是葛根中的主要有效成分。有关葛根提取工艺的研究已有很多

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次加醇180mL(6倍量),回流1h,120目筛网滤过,放置过夜。第2天离心2500r 10min,上清液回收乙醇,水浴浓缩至稠膏状,真空减压干燥,得干浸膏。测定干浸膏得量和葛根素含量,平行做2份。2.1.2 水提工艺 称取葛根饮片30 0g,加水回流提取3次,每次加水300mL(10倍量),回流1h,80目加4层纱巾滤过,水浴浓缩至稠膏状,真空减压干燥(65 ,8h),得干浸膏。测定干浸膏得量和葛根素含量。平行做2份。

2.1.3 提取物中葛根素的含量测定方法

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,大部分单独进行

了水提工艺或醇提工艺研究,只有一部分进行了简单的水提与醇提工艺的对比,其结果也不尽相同。

本研究以葛根素含量为指标,系统比较了水与不同浓度乙醇对于葛根中葛根素提取量的影响,并对水提工艺的条件进行筛选,为葛根的工业化提取工艺提供实验依据。1 材料

葛根饮片购于北京卫仁饮片厂,经鉴定植物来源为豆科植物野葛P lobata的干燥根。葛根素对照品(中国药品生物制品检定所,批号752 200108)。甲醇(GR,北京化工厂);水(自制高纯水);其他试剂均为分析纯。HP1100高效液相色谱仪,G1315ADAD检测器,G1311A四元泵,G1313A自动进样器,G1316A柱温箱,G1322A在线脱气机。HPCHEM色谱工作站。LXJ 84 01离心机(北京医疗仪器修理厂)。2 方法与结果

2.1 葛根不同提取溶剂的选择

由于葛根素的水溶解性不好

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色谱

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条件:色谱柱ZorbaxC18(4 6mm 250mm);流动相甲醇 水 冰醋酸(25 75 0 1);流速1mL min,柱温35 ,检测波长251nm。

供试品溶液制备:取葛根提取物研细,过60目筛,精密称取约10mg,置50mL具塞锥形瓶中,精

密加入30%乙醇25mL,密塞,称重,加热回流提取0 5h,取出,放冷,再称重,用30%乙醇补足减失的质量,摇匀,滤过。取续滤液,即得。

对照品溶液制备:取葛根素对照品约8 6mg,精密称定,置100mL量瓶中,加甲醇溶解至刻度,摇匀;精密量取葛根素溶液1mL置10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得(每1mL含葛根素对照品0 0086mg)。

标准曲线的的绘制:在上述色谱条件下,精密吸取葛根素对照品溶液(0 0086g L

-1

)0 5,1,5,

,选择生产中常

10,15,20,25 L注入高效液相色谱仪,测定峰面积。以葛根素的进样微克数为横坐标,以峰面积的

积分值为纵坐标,绘制标准曲线,回归方程Y=-26349+2323889X,r=0 9998,结果表明,葛根素在0 043~2 15 g呈线性关系。

样品测定取供试品溶液用0 45 m微孔滤膜滤过,分别吸取各供试品液10 L,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定葛根素的含量。2.1.4 葛根的出膏率和葛根素含测结果 葛根不

用的水和不同浓度乙醇为提取溶剂进行提取试验。

2.1.1 醇提工艺 称取葛根饮片30 0g,分别加入30%,50%,70%,90%浓度乙醇,回流提取3次,每

[收稿日期] 2009 01 21

[基金项目] 国家 十五 科技攻关项目(2001BA701A37 4)[通信作者]

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杨华,Te:l(010)84017310,E mai:lyanghua2796@si