如何构建一个大肠杆菌高校表达的分子克隆(3)

发布时间:2021-06-07

生物工程

构建载体时的另一个因素必须考虑的是该启动子能否被调控。大肠杆菌中基因调控有二种主要类型:诱导和阻遏。可诱导基因是将一种化合物加入培养基后其转录部分

即被启动的

基因;常常

该化合物是

可诱导基因

所编码酶的

底物之一。

相反,可阻

遏基因在加

入调控化合

物时被关

闭,停止转

录。基因调

控是一个复杂的过程,仅间接地包括启动子本身。许多位于基因紧上游的,对诱导和阻遏很重要的顺序也应和启动子一起置于表达载体DNA中。因此有可能使调控扩展到表达载体本身,使得可诱导或阻遏通常由启动子控制的基因的化合物,也能够调节克隆基因的表达。

总之启动子的强弱直接关系到克隆基因的表达效率,选择启动子时,强弱是一个重要的选择条件。强启动子是保证克隆基因高效表达的必须条件。出了强弱的选择之外,尽可能选择可调控的启动子,这样可以通过添加化合物促进或阻遏克隆基因的表达,这样可以保护细胞不会被毒性的外来基因表达产物伤害过重,对保护大肠杆菌用重要的作用。

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