现代生化技术习题(5)

大分子提取分离 层析技术 电泳技术

纸的要求较高：由高纯度的棉花制成，质地均一、厚薄一致、纤维松紧度适中、有一定的机械强度。

4. 在纸层析前，滤纸和层析装置为什么要先用层析溶剂平衡：层析前滤纸与层析装置用溶剂系统的蒸气饱和。不平衡时滤纸会从溶剂中吸收水分，溶剂也会从滤纸表面挥发，使溶剂系统的组成发生改变，导致溶剂前沿不齐，影响层析效果和Rｆ值。

5. 担体应具备哪些条件：①表面积大；②孔径分布较均匀；③表面无催化或吸附性能；④与固定液或被分析的物质不起化学反应；⑤热稳定性好；⑥有较好的机械强度。

6. 离子交换剂选择时应考虑哪些因素：①样品离子带何种电荷 阴离子只能被阴离子交换剂吸附，阳离子只能被阳离子交换剂吸附；②离子的浓度 浓度大时，选择交换容量大的交换剂型号③被分离物质相对分子量的大小 分子量大时要求交联度低，分子量小时选择较高交联度更好；④离子与交换剂亲和力的大小 选择不同型号的交换剂，既要考虑吸附，还要考虑便于洗脱；⑤样品物质及交换树脂的物理化学特性 根据其对酸、碱、温度的敏感情况，控制好环境条件。

7. 试述凝胶层析的基本原理： ⑴凝胶是一种多微孔的多孔径网状支持物组成进行分子过滤的分子筛；⑵物质分子在层析柱中的运动有重力的垂直方向运动和无定向扩散的布郎运动；⑶大分子物质不能进入微孔在凝胶空隙间快速流出层析柱；⑷小分子能够进入微孔，因而在凝胶中许多孔中穿行，因通过的距离长，后流出层析柱；⑸分子直径越小能够进入的孔越多，流出层析柱越慢；⑹根据分子筛这一原理可依据物质分子直径的大小按照由大到小的顺序流出层析柱而得到分离。⑹因此，它是一个反筛。

第三章 电泳技术

一、名词解释：

1. 电泳：是带电粒子在电场中向着与本身所带电荷相反的电极移动的现象。 2. 泳动度：泳动度(μ)——带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度

3. 薄层电泳：是将支持物与缓冲液调制成适当厚度的薄层而进行电泳的技术 4. 凝胶电泳：是以各种具有网状结构的多孔凝胶作为支持物的电泳技术。

5. 等电聚集电泳：是在电泳系统中，加进两性电解质载体。当通以直流电时，两性电解质载体即形成一个由阳极到阴极连续增高的pH梯度。当不同等电点的分子进入这个体系时，各自聚集到与其等电点相当的pH位置上，从而使不同等电点的分子得以分离的电泳技术。

二、填空

1. 按所使用的支持体的不同分为 纸 电泳、 薄层 电泳、 薄膜 电泳、 凝胶 电泳和 等电聚焦 电泳。按支持介质的形状分为 平板 电泳和 柱状 电泳。

2. 分子在电场中移动的方向决定于所带 电荷 的种类，带正电荷的向的 负极 移动；带负电荷的向 正