现代生化技术习题(4)

大分子提取分离 层析技术 电泳技术

在两相之间不断地进行分配，由于各物质有不同的 分配系数 、 移动的速率 也就不同，从而达到分离的目的。

5. 溶质在滤纸上移动的速度可用Rf值表示，Rf = 溶质斑点中心移动的距离／溶剂前沿移动的距离 ，Rf值决定于 分配 系数，不同的物质在两相间的 分配系数 不同，Rf值也不同，由此可根据Rf值的大小对物质进行定性分析。

6. 薄层层析中用的薄层板有 硬板(湿板) 与 软板(干板) 之分，常用的薄层板制作方法有浸涂 法、 喷涂 法、 倾斜涂布法 法和推铺法 法。

7. 气相层析根据其固定相的不同可分为 气固 层析和 气液 层析两种。

8. 气相层析具有 分辨率高 、 分析速度快 、 灵敏度高 和 应用范围广 等特点。

9. 气固层析的固定相为 固体 ，其分离的主要依据是 吸附剂 对 被吸附物 的 吸附力 不同，所以又称为 气相吸附 层析；气液层析的固定相为 液体 ，其分离的主要依据是 分配系数 的不同，又称为 气相分配 层析。

10. 气相层析的流动相是 气体 ，称为 载气 ，常用的有 氢气 、 氮气 、 氦气 、 氩气 等。载气的选择主要根据所使用的 检测器 和 载体气流 决定。

11. 红色担体用于分离 非极性 和 弱极性 物质；白色担体用于分离 极性 物质

12. 气相层析时，样品在进柱前必须变为气体，有些物质难于气化必须先将其转变为 易挥发 的衍生物再进行气相层析。

13. 进行气相层析时，应注意控制好 气体流量 、 进样温度 、 进样时间 和进样量。

14. 热导池检测器属于 浓度型检测器 。氢焰检测器属于 质量型检测器 ，其灵敏度比热导池检测器高 １０００ 倍左右，是目前应用最广泛的检测器之一。

15. 离子交换层析的操作过程包括上柱(加样) 、 洗脱 和 收集 、树脂再生三大步骤。

16. 凝胶装柱时必须注意柱中不能有 气泡 或 裂纹 存在

三、问答题：

1. 选择吸附剂时应注意的问题：①吸附剂应有适当的吸附力和尽量大的表面积；②对被分离物有足够的分辨率，对不同物质的吸附力不同；③对被吸附物的吸附应是可逆的，一定条件下可解吸、洗脱；④不溶于所用的溶剂中，不引起被吸附物化学变化；⑤颗粒均匀，操作时稳定，不会破裂。

2. 选择洗脱剂时应注意的问题：①不与吸附剂起化学反应，且不使吸附剂溶解；②对样品的各组分溶解度大、粘度小、流动性好；③不与各组分起化学反应，且易与被洗脱组分分开；④纯度高，无杂质影响。

3. 纸层析时对滤纸的选择有何要求：滤纸的厚薄程度、纤维的松紧度不同，使与滤纸纤维结合的水量不一样，两相的体积比也不同。得到的Rf 值也不相同。滤纸中的杂质也会影响Rf 值。因此，层析时对滤