DNA的粗提取与鉴定

时间：2025-07-10

专题5 DNA和蛋白质技术

课题1 DNA的粗提取与鉴定

【学习目标】

1．知道DNA的物理化学性质，尤其是DNA的溶解性；

2．简述二苯胺法鉴定DNA的方法和原理。

3．知道DNA提取与鉴定实验操作过程

4．关注实验过程的注意事项，学会实验结果的分析与评价，培养学生的综合分析问题的能力

【重点与难点】

重点：DNA提取与鉴定的原理

难点：实验过程的注意事项、结果的分析与评价

【知识链接】

1. DNA存在于细胞的哪些部位？

2．提取生物大分子的一般思路是什么？

【自主学习内容一】DNA的粗提取与鉴定的原理

1．DNA粗提取的原理（结合右下方图形分析）

②DNA粗提取的原理有些哪些？

ⅰ、

ⅱ、

2、DNA鉴定的原理：

【自主学习内容二】DNA粗提取的主要步骤

1、材料选择：

（1）适于作实验的材料：DNA含量；动物材料比植物材料好；由于哺乳动物红细

胞中，因此不能作为提取DNA的材料；

（2）鸡（红）血适宜作为实验材料的原因：①鸡血（红）细胞核；

② ；③ 。

▲若用动物肝脏等组织为材料，则需要研磨、匀浆和离心或过滤，对设备要求较高，操

作烦琐；若以植物组织（如菜花，又称花椰菜）为材料，则需要研磨并加入、离心

或过滤，以破坏细胞膜。

▲实验材料——鸡血细胞液的提取：向新鲜鸡血液中加入抗凝固剂—— ，并

搅匀，使血液与柠檬酸钠混合，置于低温下静置1d或离心；结果：血液分层：上层为淡黄色

液体，是，下层为红色深沉物，是。

2、主要实验步骤（以鸡血红细胞为例）：将5～10mL鸡血细胞液加入20mL 中；用玻棒搅拌5min；

用3～4纱布过滤，以除去颗粒较大的杂质过滤；收集 ①破碎细胞，释放目的：破坏细胞，释放核物质 DNA（核物质）注意：搅拌不能用力过大，以防止打碎DNA分子；存在：多数与蛋白质结合，存在于滤液中向滤液中加入物质的量浓度为 NaCl溶液，搅拌1min；过滤获取 ②溶解细胞核

目的：使与DNA结合的核蛋白解聚，释放出DNA；DNA溶解于高溶液NaCl内DNA

溶液中注意：按同一方向搅拌沿烧杯壁向滤液中缓慢加入，并轻轻按同一方向搅拌，使DNA 析出，直到丝状物不再增加；可以在玻棒上收集到黏稠物 ③DNA目的：降低NaCl溶液浓度达到0.14mol/L左右，使DNA析出析出注意：加入的蒸馏水不能过多，使NaCl溶液浓度过低，DNA又会重新溶解丝状、略带黄色（DNA分子上附着有少量蛋白质）向 2mol/LNaCl溶液20mL中加入黏稠物，并按同一方向搅拌3min，使DNA

充分溶解；过滤，收集滤液；向滤液中贴壁缓慢加入④DNA的，并用玻棒按同一方向缓慢、均初步纯化匀地搅拌，在玻棒上收集白色丝状物（DNA）

【合作探究】

1．本实验中几次过滤？过滤的目的是什么？

2. 本实验中几次加入蒸馏水？目的各是什么？

4. 分析教材中方案一、二、三的原理

方案一：

方案二：

方案三：；

【自主学习内容三】DNA的鉴定

1、方法：①取甲、乙两支试管，并向其中加入5mL（等量）的2mol/LNaCl溶液；②向甲试管

中加入粗提取的DNA，并搅拌使DNA溶解；③向两支试管中各加入4mL（等量）二苯胺试剂，

混匀，沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管的颜色（蓝色）变化。