打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

畜牧兽医专业技能大赛项目

二○○七年四月

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

一、打结、缝合技术

（一）材料准备

缝合针、缝合线、手术剪、持针器、缝合用教具。

（二）操作方法及考核标准

1．操作方法与步骤

（1）打结技术

①单手打结法。通常用左手操作，即线结在右手配合下由左手单独完成打结操作的全过程。用右手操作亦可。通常用于连续缝合的打结。

②双手打结法。此种打结法由双手操作完成，结扣较稳固，多用于间断缝合的打结。

③外科结打结法。用打平结的方法绕好第一道结，随即右手食指由结圈内挑过右手拇指与中指所持缝线并拉紧，则成为绕两圈的结扣，再打好第二道平结并且拉紧即可。用于张力较大组织缝合的打结。

④器械打结。当线头短，徒手打结不便或深部组织缝合结扎时，可用止血钳或外科镊子操作结系。

（2）缝合技术

①结节缝合。是缝合中最基本常用的缝合形式。是由多数单独缝线分别穿过两侧创缘而后打结，缝合时将所有的缝线以等距离穿过两侧创缘，针孔与创缘之间要保持适当距离，每一针缝线之间的距离也应相等。所有线结放于创缘之一侧。

②钮孔状缝合。缝合时由创缘一侧穿针由对侧创缘穿出，再于创伤平行至一定距离，穿针至对侧，为了减轻其张力可在创缘两侧放置纽扣、纱布卷或胶皮管，以免因张力过大而勒伤。

③螺旋形缝合。是用一根长线从伤口之一端开始先缝一针并打结固定，然后连续的使每一针皆与伤口垂直的刺入至对侧，以此螺旋形式把整个伤口全部缝合。穿过最后一针时，将缝线的游离线头留在入针侧，以便与带针的线端打结。

④库兴氏内翻缝合。即水平内翻缝合。进针深度、方法与前法相同。但进针方向是沿着创缘两侧水平方向进行。本法在抽紧每一针线与打结时，不易将组织撕裂，并且埋没组织少，缝合速度也较快，但不如伦贝特氏缝合法致密。

（三）相关问题（10分）

方结、外科结及结节缝合、钮孔缝合、螺旋缝合、库兴氏内翻缝合的适用范围？

方结：用于张力不大组织的缝合。

外科结：用于张力较大组织的缝合。

结节缝合：结节缝合常用于皮肤、肌肉、腱膜及筋膜等组织。

- 1 -

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

钮孔缝合：用于张力大的组织及某些内脏组织。

螺旋缝合：用于胃肠、腹膜、肌肉、筋膜等组织的缝合。

库兴氏内翻缝合(水平褥状缝合)：用于胃肠、子宫壁等组织的浆膜肌层内翻缝合。

二、肌旋毛虫的压片镜检

（一）材料准备

低倍显微镜（双目体视显微镜或生物显微镜）、旋毛虫压片器、弯刃剪子、小镊子、被检肉样（膈肌脚）。

（二）操作方法及考核标准

1．操作方法与步骤

（1）压片标本制作

①放置夹压玻片。将旋毛虫夹压玻片或普通载片横放在检验台边沿，靠近检验者。

②固定检验肉块。将撕去肌膜的膈肌脚缠在检验者左手食指第二指节上，使肌纤维顺着指头方向伸展地放置，再将左手握成半拳握式，这样就可以借助于拇指的第一节和中指的第二节将肉块固定在食指上面。随即使左手掌心转向检验者，以便剪取肉粒。

③剪取小肉样。用剪刀顺肌纤维方向，按随机采样的要求，自每侧膈肌脚上各剪取燕麦粒大小的肉粒12粒，两侧共24粒，并使肉粒均匀地在玻片上排成两排，每排12粒。

④压片。将另一夹压玻片重迭在放有肉粒的夹压玻片上，并旋动螺丝，使肉粒压成薄片，压至能透过肉片看清书报上的字体为度。

（2）镜检

将制好的压片放在低倍显微镜下，从压片一端第一块肉片的边沿开始，顺肌纤维依次观察，直到另一端最后一块肉片为止，不得漏检任何一块肉片，检查有无包囊。

（三）相关知识（10分）

1．检样如何采取？（5分）

答：开膛取出内脏后，取两侧膈肌脚各15克，编上与胴体同一的号码，送旋毛虫检验室检验。

2．肌旋毛虫的检验还可采用什么方法？（5分）

答：消化法。

- 2 -

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

三、离心机沉淀法检查粪便中的虫卵

（一）材料准备

生物显微镜、电动离心机、托盘天平、粪盒、镊子、污物桶、粪筛、塑料杯、玻璃棒、离心管、移液管、载片、盖片、纱布、自来水、被检粪便等。

（二）操作方法及考核标准

1．操作方法与步骤

（1）称样。取粪便3g置于小杯中。

（2）加水混匀、过滤。向杯中加10～15倍水搅拌混匀，将粪液用金属筛滤入离心管中。

（3）离心沉淀。在电动离心机以2000～2500r/min的速度离心沉淀1～2min；取出，倾去上层液，再加水搅匀，离心沉淀。如此离心操作，直到上层液透明无色为止。

（4）制片。倾去上层液，用吸管吸取沉淀物滴于载片上，加盖片。

（5）镜检及虫卵识别。用生物显微镜检查，并识别虫卵。

（三）相关知识（10分）

粪便采集的原则、方法及如何保存？

原则：被检粪便应该是新鲜而未被污染的。

方法：新鲜粪样，最好从直肠直接采取。大家畜按直肠检查的方法采集，猪、羊可将食指或中指伸入直肠，钩取粪便。采取自然排出的粪便，需采取粪堆或粪球上部未被污染的部分。

保存：应放在冷暗处或冰箱中保存。当地不能检查而需转送寄出时，或者需长期保存时，可将粪便浸入加温至50～60℃的5%～10%的福尔马林溶液中，使粪便中的虫卵失去生活能力，起固定作用，又不改变形态，还防止微生物的繁殖。

- 3 -

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

四、血涂片的制作、染色与镜检

（一）材料准备

抗凝血液、瑞氏染色液、磷酸盐缓冲液、蒸馏水、香柏油、二甲苯、载玻片、玻璃铅笔、污物缸、水平支架、洗耳球、吸水纸、显微镜。

（二）操作方法及考核标准

1．操作方法与步骤

（1）血片的制作

①左手拇指和中指夹持一洁净载玻片，取被检血液一滴，置于其右端。

②右手持推片置于血滴前方，轻轻向后移动推片，使与血滴接触，待血液扩散后，再以30°～40°角向前匀速同力推进涂抹。

（2）血片的染色（瑞氏染色法）

①先用玻璃铅笔在血膜两端各划一线，以防染液外溢，将血片平放于水平支架上。

②滴加瑞氏染液于血片上，直至将血膜盖满为止，染色1～2min。

③加等量磷酸盐缓冲液并轻轻摇动或吹气，使染色液与缓冲液混匀，再染色3～5min。

④用蒸馏水冲洗血片，待自然干燥或用吸水纸吸干后镜检（染色良好血片呈樱红色）。

（3）镜检

辨认出嗜酸性白细胞、嗜中性白细胞、淋巴细胞。

（三）相关问题（10分）

1．标准的血涂片应具备哪些特征？（3分）

所涂血片，血液分布均匀，厚度适当，对光观察呈霓红色，血膜位于玻片中央，两端留有适当空隙。

2．核左移的意义。（3分）

白细胞总数增多的同时核左移，表示骨髓造血机能加强，机体处于积极防御阶段；而白细胞总数减少时见有核左移，则表示骨髓造血机能减退，机体的抗病力降低。

3．嗜酸性白细胞、淋巴细胞、单核细胞增多的意义。（说出任两种以上者得4分，只说一种得2分）

- 4 -

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

嗜酸性白细胞增多，见于某些蠕虫病、过敏性疾病或湿疹等；淋巴细胞增多，见于结核、鼻疽、布鲁氏菌病、猪瘟或牛梨形虫病；单核细胞增多，见于败血性疾病、梨形虫病或李氏杆菌病等。

五、白细胞计数

（一）材料准备

生物显微镜、小试管、血红蛋白吸管、1ml吸管、毛细管、血细胞计数板、计数器、脱脂棉或纱布、白细胞稀释液、供检血液等。

（二）操作方法及考核标准

1．操作方法与步骤

（1）血液稀释（试管稀释法）

①吸取白细胞稀释液取清洁、干燥小试管一支，用1ml吸管吸取0.38（或0.4）ml，置于小试管中。

②稀释血液用沙利氏吸血管吸取血液至“20”刻度处，用干脱脂棉或纱布擦去管壁外血液，加入试管内，混匀，即可得20倍稀释的血液。

（2）充液

①找计数室取清洁、干燥的计数板和专用于计数的盖玻片，将盖玻片紧密覆盖于血细胞计数板上；将计数板置于显微镜载物台上，用低倍镜找到计数室；

②充液用小吸管吸取已摇匀的稀释血液，使吸管尖端接触盖玻片边缘和计数室交界处，稀释血液即可自然流入并充满计数室。

（3）计数

计数室充液后，静置1～2分钟，待红细胞分布均匀并下沉后开始计数。将计数室四角上的四个大方格内的白细胞依次全部计数完。

（4）计算并说出公式中数字、字母的意义

白细胞个数（个∕mm3）=W∕4×10×20=W×50

其中W为四角四个大方格内的白细胞总数，故W/4为一个大方格内的白细胞数；20为稀释倍数；血盖片与计数板的实际高度是1/10mm，乘10后则为1mm。

（三）相关问题（10分）

1．说出马、牛、羊白细胞正常值（千∕㎜3）？（5分）

马7.0～9.0；牛7.0～8.0；羊7.0～13.0。

2．有什么诊断意义？（5分）

白细胞总数增多：可见于多种细菌感染性疾病、各种重剧炎症及败血性疾病、白血病等。

- 5 -

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

白细胞总数减少：可见于某些病毒性疾病（如猪瘟、流行性感冒、马传贫等），牛梨形虫病、牛泰勒虫病、马梨形虫病，长期使用磺胺类药及氯霉素，X线照射，恶病质及各种疾病的濒死期等。

- 6 -

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

六、猪囊尾蚴病检疫

（一）材料与工具

检验刀、检验钩、磨刀棒、工作服、胶靴、乳胶手套、线手套，被检猪。

（二）操作方法及考核标准

1．操作方法与步骤

（1）咬肌剖检。如果头部连在肉尸上，可用检验钩钩住颈部断面上之咽喉头部，提起猪头，在两侧外咬肌处各切开两刀，观察咬肌有无囊虫；如头已自肉尸上切下，则可放在案上剖检。

（2）腰肌剖检。以检验钩固定肉尸，用刀自荐椎与腰椎结合部起做一深的切口，使刀刃擦着脊柱向下滑行，将腰肌尽可能地与脊柱分离。然后将检验钩移至肾脏附近，将已游离之腰肌展开，并顺腰肌的肌纤维方向做2～3条平行的切口，检查有无囊尾蚴。

（3）膈肌剖检。以检验钩钩住腱质的中部，向下牵引以张开膈肌，并在肌质部做浅的切口。

（4）肩胛外侧肌剖检。用检验钩钩住肘关节稍上方的皮肤以固定肉尸，用检验刀切开肩胛外侧肌肉。

（5）股部内侧肌剖检。以检验钩固定肉尸，用检验刀切开股部内侧肌肉。

2

（三）相关问题（10分）

1．简述猪囊尾蚴的形态特征？（4分）

为圆形白色半透明的囊泡，大小6～8mm×5mm，囊内充满透明液体，囊壁上有一个乳白色小结，小结内有一米粒大头节。

2．猪囊尾蚴病畜肉对人有什么危害？（3分）

人食用后可导致感染链状带绦虫病，甚至囊虫病。

3．猪囊尾蚴病肉应如何处理？（3分）

按国标GB16548－1996规定，囊虫病猪肉应进行化制处理。

- 7 -

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

七、猪宰后淋巴结的剖检

（一）材料准备

检验刀、检验钩、磨刀棒、工作服、胶手套、线手套，被检猪。

（二）操作方法及考核标准

1．操作方法与步骤

（1）颌下淋巴结剖检。一般由二人操作，助手以右手握住猪的右前肢腕部，左手持检验钩钩住颈部放血刀口右侧壁中间部分向右侧牵拉。检疫者左手持检验钩钩住放血刀口左侧壁的中间部分向左侧牵拉，右手持检验刀将放血刀口向深、向下纵切到下颌前端，深达喉软骨。然后在两下颌角内侧，咽喉头的两侧各做一平行切口，在切口深面即可找到目的淋巴结。

（2）腹股沟浅淋巴结剖检。检疫者一手用检验钩钩住最后乳头稍上方的皮下组织，并向外侧牵拉，另一手持刀从脂肪组织层正中切开，即可发现被切开的目的淋巴结。

（3）髂内淋巴结剖检。先于近腰椎处设一平行线AB，再以腰荐结合处为起点斜向上方引一直线CD，并与AB线相交成45°～60°夹角，然后沿CD线切开脂肪层，见到髂外动脉，在腹主动脉与髂外动脉的夹角中，旋髂深动脉起始部的前方，即可找到目的淋巴结。

（4）腹股沟深淋巴结剖检。在髂内淋巴结剖检的基础上，在髂外动脉的径路上或附近，即可找到目的淋巴结。

（5）颈浅背侧淋巴结剖检。检疫者在被检胴体的颈基都设一条水平线，于该水平线中点向背脊方向旁开3～4cm处作为刺入点，以刀尖垂直点刺颈部肌肉组织，并向下垂直切开约2～3cm长的肌肉组织，在此切口上端深处可找到目的淋巴结。

（6）肠系膜淋巴结剖检。提起肠管使小肠系膜展开，顺着隆起的肠系膜淋巴结长轴进行剖检，即可剖开目的淋巴结。

（7）左右支气管淋巴结剖检。剖检左支气管淋巴结时，检疫者一手用检验钩钩住主动脉弓向左牵引，另一手持检验刀切开主动脉弓与气管之间的脂肪，直至气管分叉处（左方背面），即可见到目的淋巴结。剖检右支气管淋巴结时，检疫者一手用检验钩钩住右肺尖叶向左下方牵引，使脏器的腹面转向检疫者，另一手握刀于气管和右肺基部之间切开，深达气管分叉处（右方腹面），即可见到目的淋巴结。

（三）相关问题（10分）

1．宰后剖检淋巴结的目的？（3分）

根据所观察到的淋巴结的特征性病理变化，为疫病诊断提供依据。

2．颌下淋巴结的剖检意义？（3分）

主要是检查有无炭疽病，其次是有无结核病。

3．剖检以上淋巴结不能确定病性时可进一步剖检哪些淋巴结。（4分）

颈后淋巴结，腘淋巴结。

- 8 -

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

八、肠断端吻合术

（一）材料准备

带肠系膜肠管、手术剪、缝合针、缝合线、肠钳子4把、纱布、生理盐水、青霉素、碘酊棉、酒精棉、脸盆、肥皂、温水。

（二）操作方法及考核标准

1．操作方法与步骤

(1)将病变肠管下垫浸有生理盐水的纱布，用四把肠钳子于病变肠管两端固定。

(2)结扎肠系膜上的血管。

(3)切除坏死的肠管及三角形切除与之对应肠系膜。

(4)用生理盐水青霉素冲洗。

(5)全层螺旋缝合，针距0.2～0.5cm。

(6)再冲洗。

(7)更换器械。

(8) 术者重新消毒。

(9)再作浆膜肌层内翻缝合。

(10)结节缝合肠系膜。

(11)冲洗。

3．相关问题（10分）

此手术可用于处理哪些病变？

本手术适用于肠阻塞、肠变位等疾病引起的肠壁变性或坏死。

- 9 -

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

- 10 -

九、猪丹毒杆菌的革兰氏染色

（一）材料准备

显微镜、酒精灯、无菌镊子及剪刀、载玻片、接种环、擦镜纸、吸水纸、火柴、香柏油、二甲苯、草酸铵结晶紫染色液、碘液、95%乙醇、稀释石炭酸复红染色液、病料、细菌的液体及固体培养物等。

（二）操作方法及考核标准 A ．操作方法

1．细菌涂片的制备 （1）涂片。 （2）干燥。 （3）固定。 2．革兰氏染色

（1）染色 在干燥、固定好的涂片上滴加草酸铵结晶紫染色液，染色2～3min 。 （2）水洗。（5分）

（3）媒染 滴加碘液染色1～2min 。 （4）水洗。

（5）脱色 在95%乙醇脱色缸内脱色0.5～1min 。 （6）水洗。

（7）复染 滴加稀释石炭酸复红染色液，染色1～2min 或沙黄染色液染色30s 。 （8）水洗、干燥。

（9）镜检 结果正确，菌膜薄厚均匀，细菌颜色正确。

3．相关问题：（10分）

1．猪丹毒杆菌的致病性？

引起猪丹毒，主要发生于猪，特别是架子猪，人也可感染（称类丹毒）。（4分）

2．图片识别病理变化：提供变化明显的脾脏、肾脏、淋巴结、心脏等彩色病理图片，选手选择答案。（3分）

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

- 11 -

以上为猪丹毒病理变化的是：D 、E

3．图片识别典型临床症状：提供猪丹毒、猪瘟、猪肺疫等相相关传染病的典型临床症状，选手选择答案。（3分）

以上为猪丹毒特征临床症状的是：B

C D

打结缝合术、沉淀法检验虫卵、肌肉压片镜检、血液涂片镜检、白细胞计数

十、布鲁氏菌平板凝集试验

（一）材料准备

玻璃板、酒精灯、火柴或牙签、0.5%石炭酸生理盐水、布氏杆菌平板凝集抗原、琥红抗原、布氏杆菌标准阳性血清及标准阴性血清等。

（二）操作方法及考核标准

1．操作方法

（1）取洁净的玻璃板一块，用玻璃铅笔画成4cm2的小格。

（2）分别吸取被检血清和布氏杆菌虎红凝集抗原各0.03ml，加到玻璃板方格内。

（3）混匀，4 min内观察结果。

（4）判定：出现凝集即判为阳性。

3．相关问题（10）

1．牛被检血清的采取方法？（5分）

对被检牛、羊颈静脉采血7～10ml于灭菌的试管内，摆成斜面使之凝固，直立试管架上经10～12h析出血清，吸入小试管或青霉素瓶内待检。

2．试验中设立哪些对照试验？（5分）

设立标准阳性血清、标准阴性血清、生理盐水对照。

- 12 -