急性冠脉综合征患者血清缺血修饰清蛋白与超敏C反应蛋白的变化及临床意义

青岛大学

硕士学位论文

急性冠脉综合征患者血清缺血修饰清蛋白与超敏C反应蛋白的变

化及临床意义

姓名：菅敏

申请学位级别：硕士

专业：临床检验诊断学

指导教师：刘成玉;管洪在

20090602

急性冠脉综合征患者血清缺血修饰清蛋白与超敏C反应蛋白的变化及临床意义

急性冠脉综合征患者血清缺血修饰清蛋白与超敏Ｃ反应

蛋白的变化及临床意义

中文摘要

目的探讨缺血修饰清蛋白（ＩＭＡ）和超敏Ｃ反应蛋白（ｈｓ．ＣＲＰ）在急性冠状动脉综合征（ＡＣＳ）早期诊断中的意义。

方法选取稳定型心绞痛（ＳＡＰ）和ＡＣＳ患者共６０例，于入院后即刻采血测定其血清ＩＭＡ及ｈｓ．ＣＲＰ的水平变化，并与２０例健康查体者（对照组）进行比较。

结果ＡＣＳ患者血清ＩＭＡ与ｈｓ．ＣＲＰ水平显著高于对照组（ｔ’＝１１．２０，５．８７，Ｐ＜０．０１），ＡＭＩ、ＵＡＰ及ＳＡＰ患者ＩＭＡ和ｈｓ．ＣＲＰ水平比较，差异有显著性（Ｆ－－３２．４９，１５．５４，ｑ＝２．４４，－一１１．３８，Ｐ＜０．０１，０．０５）。ＡＣＳ患者ＩＭＡ与ｈｓ—ＣＲＰ水平之间呈正相关（ｒ＝Ｏ．６１１，Ｐ＜０．０１）。ＡＣＳ患者ＩＭＡ的ＲＯＣ曲线下面积（ＡＵＣｌ眦）为０．９８３，在最适诊断参考值为２３．０４９９／Ｌ时，灵敏度为９０％，特异度为９０％，约登指数为０．８０，阳性似然比为９．００，ＩＭＡ的阳性预测值（ＰＰＶ）及阴性预测值（ＮＰｖ）分别为９４．７４％和８１．８２％。ｈｓ．ＣＲＰＡＵＣＲｏＣ为０．８４２，在最适诊断参考值为３．３４ｍｇ／Ｌ时，灵敏度为６７．５％，特异度为８５％，约登指数为０．５２５，阳性似然比为４．５０。ｈｓ—ＣＲＰ的ＰＰＶ及ＮＰＶ为９０．００％和５６．６７％。ＩＭＡＳ｝ｌｈｓ．ＣＰＲ的ＡＵＣＲＯＣ比较差异有显著性（ｕ＝２．０，Ｐ＜０．０５）。ＡＭＩＳｆｎＵＡＰ患者ＩＭＡＡＵＣＲｏＣ均大于０．９，且其灵敏度、特异度、约登指数、阳性似然比、ＰＰＶ及ＮＰＶ均高于ｈｓ．ＣＲＰ。

结论血清中ＩＭＡ和ｈｓ．ＣＲＰ水平升高与心肌缺血程度有密切关系。ＩＭＡ可作为急性心肌缺血的早期诊断指标，对ＡＣＳ具有较高的早期诊断价值和准确度，并且明显提高了对ＡＣＳ早期诊断的敏感性。

硕士研究生：营敏（临床检验诊断学）

指导教师：刘成玉教授

关键词：冠状动脉疾病；缺血修饰清蛋白：Ｃ一反应蛋白；实验室技术与方法

急性冠脉综合征患者血清缺血修饰清蛋白与超敏C反应蛋白的变化及临床意义

ＣｌｉｎｉｃａｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｓｅｒｕｍｉｓｃｈｅｍｉａｍｏｄｉｆｉｅｄａｌｂｕｍｉｎａｎｄｈｉｇｈｓｅｎｓｔｉｖｉｔｙＣ—ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｃｕｔｅｃｏｒｏｎａｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅ

ＡＢＳＴＲＡＣＴ

ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ

（ＩＭＡ）ａｎｄ

（ＡＣＳ）．ＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅａｒｌｙｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｖａｌｕｅｓｏｆｉｓｃｈｅｍｉａｍｏｄｉｆｉｅｄａｌｂｕｍｉｎｈｉｇｈｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙＣ－－ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎ（ｈｓ ＣＲＰ）ｆｏｒａｃｕｔｅｃｏｍａｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅ

ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｌＭＡａｎｄｈｓ—ＣＲＰｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｉｎ６０ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＡＣＳ

ａｆｔｅｒａｄｍｉｓｓｉｏｎ，２０ｈｅａｌｔｈｙａｎｄｓｔａｂｌｅａｎｇｉｎａｐｅｃｔｏｒｉｓ（ＳＡＰ）ｒｉｇｈｔｓｕｂｊｅｃｔｓｓｅｒｖｅｒｅｄａｓ

ｃｏｎｔｒｏｌｓ．Ｒｅｃｅｉｖｅｒｏｐｅｒａｔｉｎｇｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ（ＲＯＣ）ｃｕｒｖｅＷａｓｕｓｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｄａｔａ．

ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｓｅｒｕｍＩＭＡａｎｄｈｓ—ＣＲＰｉｎｔｈｅＡＣＳｐａｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅ

ａｒｅｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｓ（ｔ’＝１１．２０，５．８７，Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅｒｅ

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ａ＝３２．４９，１５．５４，ｑ＝２．４４＂－－＇１１．３８，Ｐ＜０．０１，０．０５）．Ｔｈｅｒｅｗａｓ

ｂｅｔｗｅｅｎＩＭＡｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎａｒｅａａｎｄｈｓ．ＣＲＰｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＡＣＳ（ｒ＝０．６１１，Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅｕｎｄｅｒ

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ｗａｓ

ａＩＭＡＷａｓ９４．７４％ａｎｄｎｅｇａｔｉｖｅ８１．８２％．ＴｈｅＡＵＣＲＯｃｏｆｈｓ．ＣＲＰＷａｓＯ．８４２．Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｏｆｈｓ．ＣＲＰａｔｃｕｔｏｆｆｖａｌｕｅｏｆ３．３４ｍｇ／Ｌｗｅｒｅ６７．５％ａｎｄ８５％．ＹｏｕｄｅｎｉｎｄｅｘｗａｓＯ．５２５．Ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄｒａｔｉｏｗａｓ４．５０，Ｐｏｓｉｔｉｖｅｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅｖａｌｕｅ（ＰＰＶ）ｏｆｈｓ—ＣＲＰｗａｓ

ｎｅｇａｔｉｖｅｗａｓ９０．００％ａｎｄＩＭＡａｎｄ

０．９．５６．６７％．ＴｈｅｒｅａｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅＡＵＣＲｏＣｏｆｈｓ．ＣＲＰ（Ｕ＿２．０，Ｐ＜０．０５）．ＴｈｅＡＵＣＲｏｃｏｆＩＭＡａｎｄｈｓ．ＣＲＰｗａｓｇｒｅａｔｅｒｔｈａｎ

ＩＭＡｗｅｒｅｓｕｐｅｒｉｏｒｔｏｈｓ—ＣＲＰｉｎｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＡＭＩａｎｄＵＡＰｉｎｔｅｒｍｓｏｆｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ａｃｃｕｒａｃｙ，Ｙｕｅｄｅｎｇｉｎｄｅｘ，ＰＰＶａｎｄｎｅｇａｔｉｖｅｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅｖａｌｕｅ（ＮＰＶ）．

ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓＴｈｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｏｆｓｅｒｕｍＩＭＡａｎｄｈｓ—ＣＲＰｌｅｖｅｌｗｅｒｅｃｌｏｓｅｌｙ

ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈｅｍｉａ．ＥａｒｌｙｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆａｃｕｔｅｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈｅｍｉａＣａｎｂｅｍａｄｅｂｙｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｌＭＡ．ＩＭＡｉｓ

ｃａｎｏｆｏｂｖｉｏｕｓｖａｌｕｅａｎｄｈｉｇｈａｃｃｕｒａｃｙｉｎｔｈｅｅａｒｌｙｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＡＣＳ，ｗｈｉｃｈｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｅｎｈａｎｃｅｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆＡＣＳ．

ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）Ｐｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅ：ＭｉｎＪｉａｎ（Ｃｌｉｎｉｃａｌ

Ｄｉｒｅｃｔｅｄｂｙ：ＰｒｏＬＣｈｅｎｇ－ｙｕＬｉｕ

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｏｒｏｎａｒｙｄｉｓｅａｓｅ；ｉｓｃｈｅｍｉａｍｏｄｉｆｉｅｄａｌｂｕｍｉｎ；Ｃ—ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎ；

ｌａｂｏｒａｔｏｒｙｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓａｎｄｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ

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急性冠脉综合征患者血清缺血修饰清蛋白与超敏C反应蛋白的变化及临床意义

引言

急性冠脉综合征患者血清缺血修饰清蛋白与超敏Ｃ反应蛋白的变化

及临床意义

己ｌ言

ＪＩ口

急性冠脉综合征（ＡＣＳ）临床表现为不稳定型心绞痛（ＵＡＰ）、ＳＴ抬高的心肌梗死（ＳＴＥＭ）和无ＳＴ抬高的心肌梗死（ＮＳＴＥＭ）。具有发病急、变化快、临床表现与危险性不一致等特征¨１。ＡＣＳ的诊断很大程度上要依赖于患者的临床表现、心电图和心肌损伤标记物，但仍有相当部分患者被误诊或漏诊。目前使用的心肌损伤标志物包括肌红蛋白（Ｍｂ）、肌酸激酶同工酶（ＣＫ）、肌钙蛋白Ｉ（ｃＴｎｌ）和肌钙蛋Ｔ（ｃＴｎＴ），特别是ｃＴｎＩ和ｃＴｎＴ在ＡＣＳ诊断、危险分层和治疗中起到非常重要的作用，但它们．仅在心肌细胞不可逆损害以及细胞膜的完整性被破坏之后才能被检出，在短期和可

逆的缺血发作时，其水平不升高，而评估ＡＣＳ患者的心肌缺血往往需要在细胞死亡之前或无细胞死亡的情况下做出。因此，不利于ＡＣＳ早期心肌损伤可逆阶段的诊断乜１。静态的光子散射ＣＴ对评估急性心肌缺血有效，但其灵敏度有限，且要求在胸痛发作时服用对照药品。临床上用于心肌缺血或冠脉疾病的试验如连续监测心电图，可以用于观察静态缺血的进展情况，但无法肯定诊断口１。因此，如何做到对ＡＣＳ早期快速珍断、及早治疗，以降低病残率、死亡率，是一个十分重要的课题。

最近研究发现，缺血修饰清蛋白（ｉｓｃｈｅｍｉａｍｏｄｉｆｌｅｄａｌｂｕｍｉｎ，ＩＭＡ）在心肌缺血发生后５～ｌＯｍｉｎ迅速升高Ｈ１，可于ＡＣＳ早期可逆阶段被检出，在传统检查尚未发现异常的急性心肌缺血早期即可做出诊断。与其他检测指标相比，具有敏感性高、阴性预测值高、出现时间早等优点，对急性心肌缺血的早期诊断，排除诊断ＡＣＳ及ＡＣＳ危险性分层具有重要意义，从而降低对非缺血患者的收治率和心血管病高危个体的漏诊率∞１。心肌缺血时ＩＭＡ水平升高的确切机制尚不清楚，但已定位在人血清清蛋白（ｈｕｍａｎｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ，ＨＡＳ）氨基末端Ｎ一天门冬氨酸（Ａｓｐ）～丙氨酸（Ａｌａ）一组氨酸（ＨｉＳ）一赖氨酸（Ｌｙｓ）序列的变化上。由各种原因引起缺血时，局部血液灌注和供氧减少，组织细胞进行无氧代谢，消耗ＡＴＰ。同时，代谢产物（如乳酸）堆积，局部微环境ｐＨ值下降，致使ｃｕ２＋从循环蛋白的金属结合位点释放，在还原剂（如维生素ｃ）存在时，Ｃｕ２＋转化为Ｃｕ＋，后者可与氧反应生成超氧自由基，在超氧化物歧化酶的作用下将其歧化为过氧化氢（Ｈ：０：）和氧。正常情况下，Ｈ：Ｏ。是无害的，由过氧化物酶降解成水和氧气，而当有金属离子存在时，Ｈ：０：可通过Ｆｅｎｔｏｎ反应形成羟自由基（ＯＨ ），后者具有高度活性，导致蛋白、核酸损伤和脂质过氧化。ＨＳＡ易受０Ｈ 损害ｍ１，使Ｎ末端序列的２＂－－４个氨基酸发生变化，形成ＩＭＡ。缺血情况下，ＨＳＡ氨基末端

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青岛人学硕十学位论文

被乙酰化或缺失１～２个氨基酸转变成ＩＭＡ盯邝１。在这一过程中，游离Ｃｕ２＋具有很高的毒性作用，游离Ｃｕ２＋释放后，ＨＳＡ的Ｎ末端序列与其结合，迅速将其清除。当清蛋白在ＯＨ 的作用下被修饰后，结合Ｃｕ２＋的能力减弱，Ｃｕ２＋从结合位点释放，再次进入０Ｈ 形成过程或与正常的清蛋白结合，这就形成了一个链式反应∞１。

ＩＳＡ测定为临床提供了一种客观检出心肌缺血的方法，并符合理想心肌缺血标志物应具备的特征：①心肌特异性。②心肌缺血后迅速增高。③循环中稳定性好。④２４ｈ内血中浓度恢复基础水平。⑤检测方法简便，可很快得到结果。⑥具有较好的分析特性（变异系数低）ｎ仉Ⅲ。ＩＭＡ作为灵敏的心肌缺血指标在国外已受到广泛关注，但在国内的研究才刚刚起步。

Ｃ反应蛋白（ＣＲＰ）是一种由肝脏合成的蛋白质，因其能与肺炎链球菌细胞壁Ｃ一多糖结合而得名，是第一个被描述的急性时相反应蛋白。人ＣＲＰ（分子量约为１１．５ＫＤ）由５个相同的非糖基化多肽亚单位（分子量约为２．３ＫＤ）组成，每个亚单位含有２０６个氨基酸残基，其中２个半胱氨酸残基在３６和７８位点以二硫键结合，每个亚单位有２个Ｃａ２＋结合位点¨２—３ｌ。最近研究表明，五聚体ＣＲＰ解离为单体形式可能是其促进动脉粥样硬化效应的重要环节ｎ¨５‘。磷酸胆碱（ｐｈｏｓｐｈｏｃｈｏｌｉｎｅ）是ＣＲＰＣａ２＋依赖的最佳亲和力的配体，广泛分布于真核生物的细胞膜、血浆脂蛋白和病原菌细胞壁多糖中。

ＣＲＰ半寿期为１９ｈ。生理条件下，血清ＣＲＰ水平呈偏态分布，平均含量为８００ｍｇ／Ｌ，９０％人群水平在３ｍｇ／Ｌ以下。一旦发生炎症或组织损伤，血清ＣＲＰ浓度在６＂～８ｈ内迅速上升，可达到正常浓度的１０００倍甚至更高；当刺激减退后，其浓度能迅速下降到正常水平ｎ６’１７３。ＣＲＰ的吸收和降解主要由肝细胞完成，另有小部分与其配体结合，在中性粒细胞和巨噬细胞中降解。ＣＲＰ主要具有活化补体、刺激内皮细胞表达黏附分子、招募单核细胞等作用¨利。最近研究表明，ＣＲＰ还具有诱导血管平滑肌鲴胞凋亡、抑制血管生成及促进凝血的效应ｎ吼１９’２们。

ＣＲＰ作为一种经典的急性期反应蛋白，因其较长的半衰期、优越的稳定性、无昼夜变异，不受进食、年龄和性别的影响，以及检测方便、检测价格低廉等优点，已经广泛应用于临床瞳１￣踟。对于细菌感染、各种炎症过程、组织坏死与损伤及其恢复期鲢筛检、监测、病情评估与疗效判断都有重要的价值。

越来越多的研究认为，粥样斑块的局部炎症反应和全身炎症可以增加冠心病（油）的发生，而ＣＲＰ是参与炎症或急性时相反应的主要蛋白［２５］ｏ炎症反应可以通过多种途径促进冠脉粥样硬化的发展，硬化斑块破裂，血栓形成和引起冠脉阻塞。ＣＲＰ水平反映了动脉粥样硬化栓塞损伤的脆弱性和斑块破裂的可能性。研究发现∞１，ＣＲＰ是ＣＩｌＤ患者远期心血管事件发生及死亡的预测指标，对ＣＨＤ发生、发展及预后判断曩有重要的临床意义。ＣＲＰ是ＡＣＳ发生的一种危险因子，并且与病情的严重程

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引言

度呈正相关，对病情转归的预测有一定价值。同等条件下，ＣＲＰ水平高者的病情转归及预后较差，反之良好乜７１。．’

因此，ＩＭＡ和ｈｓ－ＣＲＰ在ＡＣＳ的发病机制中都发挥了重要的作用。通过检测ＡＣＳ患者血清ＩＭＡ和ｈｓ－ＣＲＰ水平变化，对于及早发现并控制ＡＣＳ的病情发展具有重要临床意义和广阔的应用前景。但ＡＣＳ患者血清ＩＭＡ及ｈｓ－ＣＲＰ浓度的变化及其诊断价值尚少见报道。为此，我们检测了４０例ＡＣＳ患者和２０例ＳＡＰ患者胸痛发作后６ｈ内血清ＩＭＡ及ｈｓ—ＣＲＰ浓度的变化，并对血清ＩＭＡ及ｈｓ－ＣＲＰ浓度进行受试者工作特征曲线（ｒｅｃｅｉｖｅｒｏｐｅｒａｔｉｎｇｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ，ＲＯＣ）分析，以进一步探讨其诊断ＡＣＳ的灵敏度、特异性以及临床应用价值。

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第一章材料与方法

第一章材料与方法

１．１仪器

仪器名称

离心机

全自动酶标分析仪

日立７６００全自动生化分析仪

Ｇｉｌｓｏｎ加样器

３７℃水浴箱

３７℃孵箱

ＳＡＮＹＯ低温冰箱产地上海美国日本荷兰北京北京日本

１．２材料

血清ＩＭＡ浓度测定采用ＥＬＩＳＡ法，试剂盒由美国ＡＤＬ公司提供；ｈｓ．ＣＲＰ测定采用散射速率比浊法，试剂盒购自北京利德曼生化技术有限公司。具体操作严格按照试剂盒说明书进行。

１．３研究对象与标本采集

１．３．１研究对象

（１）急性心肌梗死（ＡＭＩ）患者：选择２００８年２月－－－－，５月来我院附属医院心内科和急诊内科就诊的ＡＭＩ患者２０例，男１１例，女９例，年龄４５－－－７３岁，平均（６８．１３士９．２１）岁。胸痛发作后２～６ｈ入院，入院后经ＷＨＯ诊断标准确诊为ＡＭＩ。所有患者均排除心肌病、肿瘤、感染、肝肾功能不全、糖尿病和自身免疫性疾病。

（２）不稳定性心绞痛（ＵＡＰ）患者：选择２００８年２月～５月来我院附属医院心内科和急诊内科就诊并确诊的ＵＡＰ患者２０例，男１１例，女９例，年龄４３～７２岁，平均（５９．５０ａ：８．３９）岁。所有患者均排除心肌病、肿瘤、感染、肝肾功能不全、糖尿病和自身免疫性疾病。

（３）稳定性心绞痛（ＳＡＰ）患者：选择２００８年２月＂－－－－５月来我院附属医院心内科和急诊内科就诊并确诊的ＳＡＰ患者２０例，男１０例，女１０例，年龄４５＂－－－－７２岁，平均（６３．３０－２：６．１７）岁。所有患者均排除心肌病、肿瘤、感染、肝肾功能不全、糖尿病和自身免疫性疾病。

（４）对照组：选择与ＣＨＤ患者同期的无心肌病、肿瘤、感染、肝肾功能不全、糖尿病和自身免疫性疾病的健康查体者２０例作为对照组，男１ｌ例，女９例，年龄

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４３－－＇６９岁，平均（６０．１５士７．５８）岁。

所有研究对象的年龄、性别比较，差异均无统计学意义。

１．３．２标本采集

所有入选患者均于胸痛发作６ｈ内采静脉血４ｍＬ，注入一次性真空管内，３７。Ｃ水浴２０ｍｉｎ后，３０００ｒ／ｒａｉｎ离心１０ｒａｉｎ分离血清，分装部分血清于ＥＰ管中，封口后，保存在－－２０℃冰箱中，统一编号，用于检测血清ＩＭＡ的浓度。其余血清于采血当日在同立７６００全自动生化分析仪上测定ｈｓ—ＣＲＰ的浓度。

１．４检测方法

１．４．１血清ＩＭＡ浓度的检测

（１）检测前准备

１）提前３０ｍｉｎ从冰箱取出试剂盒及待测标本，以平衡至室温。

２）浓缩洗涤液与医用蒸馏水１：２０倍稀释并轻轻混匀后使用。

３）标准品稀释：稀释比例按表１．１进行

表１．１标准品稀释比例

（２）洗涤方法：手工洗板，甩尽反应孔内液体，每孔加洗涤液３５０Ｉ．ｔＬ，振荡３０ｓ后甩尽液体，吸水纸上拍干，洗４次。

（３）操作步骤

１）取出酶标板，分别标记标准品及样品编号。预留２孔做空白孔。

２）每孔加入稀释好的标准品５０１ｘＬ（１～６号标准品均做复孔）。加入待测样品５０１ｘＬ于反应孔内。立即加入５０１－ｔＬ的生物素标记的抗体。盖上模扳，轻轻振荡混匀，３７。Ｃ温育１ｈ。

３）按以上洗涤方法洗板。

４）每孔加入８０９Ｌ的亲和链霉素．ＨＲＰ，轻轻振荡混匀，３７℃温育３０ｍｉｎ。

５）按以上洗涤方法洗板。

６）每孔加入底物Ａ、Ｂ液各５０｝ｔＬ，轻轻振荡混匀，３７。Ｃ温育１５ｍｉｎ。避免光照。

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第一章材料与方法

７）取出酶标板，迅速加入５０１ｘＬ终止液，加入终止液应立即测定结果。

８）３７℃下孵育反应１５ｍｉｎ。

９）在４５０ｎｍ波长处测定各孔的值Ａ值

（４）结果判断：以吸光度Ａ值为纵坐标（Ｙ），相应的ＩＭＡ标准品浓度为横坐标（Ｘ），做得相应的标准曲线，见表１．２。样品的ＩＭＡ含量可根据其Ａ值由标准曲线换算出相应的浓度。

表１．２ＩＭＡ标准曲线吸光度及浓度（１Ｉｇ／Ｌ）

１．４．２血清ｈｓ－ＣＲＰ浓度的检测

（１）工作曲线．

１）用生理盐水将高效标准液按倍比稀释，用水作零点。

２）多点定标：按表１．３加蒸馏水或生理盐水稀释高值校准液，形成系列校准液。

表１．３校准液稀释比例

（２）测试：按表１．４设置仪器检测条件

表１．４

标本量（Ｓ）测试条件设置５ｒｔｌ

１２５１ｘｌ

１２５９ｌ试剂Ｉ（ＲＩ）试剂ＩＩ（Ｒ２）

Ｓ＋Ｒ１＋Ｉ也在３７℃保温ｌｍｉｎ，测定吸光度Ａｌ，４ｍｉｎ后读取吸光度Ａ２

主波长

副波长

反应类型

反应方向６００ｎｍ７００ｎｍ两点法升反应

１．５统计学处理

ＩＭＡ和ｈｓ．ＣＲＰ检测结果均以；均表示，进行ｔ检验、方差分析和ＲＯＣ统计分析。所有数据均用ＳＰＳＳｌｌ．５统计软件处理。Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义，ｐ＜０．０１为差异有显著统计学意义。对照组和各病例组血清ＩＭＡ及ｈｓ．ＣＲＰ的浓度见表１．５．

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表１．５各组血清ＩＭＡ、ＣＲＰ浓度的测定结果（ｐｇ几、ｒａｇ／Ｌ＞

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第一章材料与方法

急性冠脉综合征患者血清缺血修饰清蛋白与超敏C反应蛋白的变化及临床意义

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急性冠脉综合征患者血清缺血修饰清蛋白与超敏C反应蛋白的变化及临床意义

第二章结果

第二章结果

２．１＾ｃｓ患者血清Ｉ卧和ｈｓ－ＣＲＰ水平的变化

８７，Ｐ＜０．０１）。ＡＭＩ组、ＵＡＰ缎和ＳＡＰ组吣和ｈｓ－ＣＲＰ水平依次递减，且ＡＭＩ、ＵＡＰ及ＳＡＰ患者眦和ｈｓ－ＣＲＰ水平比较，差异有显著性（Ｆ＝３２．４９，１５．５４，ｑ＝２．４４～５ＡＣＳ患者血清ＩＭＡ与ｈｓ－ＣＲＰ水平均显著高于对照组，差异有显著性（ｔ’＝１１．２０，

１１．３８，Ｐ＜００ｌ，Ｏ．０５）。霓表２．１和圈２．１－２３．

表２．１＾器患者和ｓ＾Ｐ毫者血清ｒ眦与ｈｓ—ｃ妒水平的变化（；士ｓ）

组捌

对照组

ＡＣＳ组ｎ吣ＯＷＬ）ｈ’ＣＰ．Ｐ１５Ａ２ａ：４３７Ｃｍｅ／Ｌ）２０Ｌ啦Ｌ０８柏４＂７ｌ盐ＩＥ舯ｏ

２０

２０

２０ｔ∞±“，ｏ１２ｌｌ±ｓｍｌ。５ＡⅦ组５６．０６２１ｔ７铲３８１７ｚＩｌ３驴ｕＡ嘲ＳＡＰ组２７ｉ４．０２。１７．２２＋４胖２．２２±Ｉ．１７０

与对烈组比较，‘ｔ’＿１ｌ

１１３８，Ｐ＜Ｏ．０１．００５２０．５８７，Ｐ＜０．ｏＩ：三组之问比较，６Ｆ＝３２４９，１５．５４。ｑ＝２．４４～

圈２ｌ，ｔ．ＣＳ患者和ＳＡＰ患者的血清眦、ｈｓ＇Ｃｌ即浓度变化柱形圈

急性冠脉综合征患者血清缺血修饰清蛋白与超敏C反应蛋白的变化及临床意义

要曼盔兰堡主芏堡丝塞

圈２２＾嚼患者和ＳＡＰ息者的血精ｈｓ－ＣＲＰ浓度变化柱形朋

圈２．３＾璐患者和ＳＡＰ患者的血清Ｉｌｉａ浓度变化柱形圈

２．２ＡＯＳ患者Ｉ№与ｈｓ—ｃｌｌＰ之间的相关关系

对４０例ＡＣＳ患者血清Ｉ＾ＩＡ与ｈｓ－ｃＲＰ水平进行线性相关分析，ＩＭＡ与ｈｓ—ＣＲＰ水

０１）。平呈正相关（ｒ＝仉６１ｌ，Ｐ＜ｎ

２．３血清Ｉ眦、ｈｓ－ＣＲＰ浓度变化对ＡＣＳ患者的诊断价值

ＡＣＳ患者ＩＭＡ曲线下面积（Ａｕｃ旺ｏ）为０．９８３，选１ＭＡ２３０４ｌ＝ｇ，Ｌ为诊断界点，其灵敏度为９０＝／＝，特异度为９（Ｐ／ｏ，此时灵敏度与特异度之和最大，约登指数为０．８０．阳性似然比为９．００。ＩＭＡ的阳性预测值（ＰＰＶ）及阴性预测值（ＮＰＶ）分别

急性冠脉综合征患者血清缺血修饰清蛋白与超敏C反应蛋白的变化及临床意义

青岛大学硕士学位论文

登指数、阳性似然比、ＰＰＶ及ＮＰｖ均低于ＩＭＡ。两指标Ａｌ俨比较．有显著性差异（ｕ＝２ｍ，Ｐ＜００５）。ＡＭＩ和ＵＡＰ患者ＩＭＡＡｕｃ“）ｃ均大于０．９，且其灵敏度、特异度、约登指数、阳性似然比、ＰＰＶ及ＮＰＶ均高于ｈｓ－ｃＲＰ。见表２．２～２．４及图２．４，－－２．７．

表２．２船孽者Ｉｌｉａ与ｈｓ－Ｃ静中诊断赞值的比较

指标谚断参考值灵敏度特异度阳性｛｜曼约登

（％）ＡｕＰｐＰＶＮＰＶ（％）（％）然比指数（％）

ＲｏＣｃｕｉ－ｖｅ

≥｛２ｉ

１－ｓ［ｘ、ｃｉｆｌｃｉｔｙ

Ｄｔ褂ｏｎａｌ搠“ｔｎＢａ哺ｐ州ｕｃ一¨Ｈ苣

圈２．４ＡＥＳ患者血清ＩＭＡ厦ｈｌｔ－ＣＲＰ变化的ＲＯＣ曲蛀

裹２．３眦患者ｒ¨与ｈｓ馏中谤断价值的比较

（％）（％）然比指数（％）（％）