重组人干扰素α2a栓微生物限度检测标准操作规程

重组人干扰素α2a栓剂微生物限度检测标准操作规程

依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。

范围：本实验适用于重组人干扰素α2a栓剂的成品微生物限度检定。

目的：检查栓剂的微生物污染程度。

原理：在适合细菌及霉菌生长的培养基上，在适宜的温度下培养，通过菌落计数，测定栓剂染菌量，利用选择培养基，通过细菌形态及鉴别试验对控制菌进行检测。

内容：

1 材料

1．1 样品：从该批栓剂中随机抽取。

1．2 培养基

1．2．1 干粉营养肉汤培养基。

1．2．2 干粉营养琼脂培养基。

1．2．3 干粉玫瑰红钠琼脂培养基。

1．2．4 干粉胆盐乳糖培养基。

1．2．5 干粉十六烷三甲基溴化氨琼脂培养基。

1．2．6 干粉甘露醇高盐琼脂培养基。

1．2．7 干粉绿脓菌素测定用培养基。

1．2．8 干粉明胶培养基。

1．2．9干粉硝酸盐胨水培养基。

以上培养基均由中国药品生物制品检定所提供。

1．3 试剂

柠檬酸钠 Na3C6H5O7. 2H2O 分析纯

氯化钠 NaCl 分析纯

碘化钾 KI 分析纯

碘 I2 化学纯

无水乙醇 CH3CH2OH 分析纯

结晶紫 C25H30ClN3.9H2O

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草酸铵 (NH4)2C2O4.H2O 化学纯

沙黄

氯仿 CHCl3 分析纯

盐酸 HCl 分析纯

来苏儿 外用

二盐酸二甲基对苯二胺

1．4 阳性对照菌

1．4．1 金黄色葡萄球菌：购自吉林省药检所。

1．4．2 铜绿假单胞菌：购自吉林省药检所。

1．5 注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版要求。

1．6 其它

接种针、接种环、硫酸纸、剪刀、镊子、刀片、牛皮纸、脱脂棉、线绳、滤纸、载玻片、煤气头、石棉网

1．7 仪器及设备

超净工作台 CBK-D20型 安徽蚌埠净化设备厂

台式离心机 TGL-16G型 上海安亭科学仪器厂

扭力托盘天平 TN-100B型 上海第二仪器厂

电子分析天平 ES-120J 型 沈阳龙腾电子称量仪器有限公司

恒温培养箱 PYX-DHS型 湖北省黄石市医疗器械厂

空气恒温震荡器 HZQ-C型 哈尔滨市东联电子技术开发有限公司

生物显微镜 XSZ-H3型 重庆光学仪器厂

恒温水浴箱 HW-1 型 北京医疗设备厂

4℃冰箱 BCD-185型 沈阳医疗器械厂

1．8 器皿

试管、杜试管、注射器（10ml）、平皿（90mm）、 青霉素瓶（10ml）、 250ml 三角瓶、烧杯（100ml、250ml、500ml）、吸管（10ml、5ml、1ml）、吸球（1ml、10ml）、离心管50ml、 250ml血浆瓶、盐水瓶（250ml、500ml）、试管栓、青瓶栓、翻帽栓、量筒（100ml、250ml、500ml）、玻璃棒

2 方法

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2．1 准备工作

2．1．1 工作环境：所有无菌操作在100级超净台内进行，其他需在K空调环境中操作，确认场地清场合格后，摘下“清场合格”标志牌，挂上“使用中”标志牌。

2．1．2 器皿清洗要求：经过洗刷组处理。

以上杜试管、青霉素瓶（10ml）、试管栓、青瓶栓、翻帽栓分别装在饭盒中。试管、注射器（10ml）、平皿、离心管50ml、硫酸纸、剪刀、镊子、刀片均用硫酸纸包好。吸管（10ml、5ml、1ml）里面用硫酸纸，外面用牛皮纸包装。250ml三角瓶、500 ml三角瓶、250ml血浆瓶、250ml盐水瓶、500ml盐水瓶、量筒（100ml、250ml、500ml）分别用一层硫酸纸，一层牛皮纸包口，用线绳扎紧，备用。

2．1．3 以上所有器皿除接种针、接种环外，均需121℃60分钟高压灭菌。灭菌使用期限不超过48小时。

2．1．4调试仪器设备

2．1．4．1 确认扭力天平、电子分析天平运行状态完好，已挂有“备用”标志牌。

2．1．4．2 确认超净工作台、台式离心机运行状态完好，已挂有“备用”标志牌。

2．1．4．3 确认恒温培养箱、恒温水浴箱、空气恒温震荡器、生物显微镜运行状态完好，已挂有“备用”标志牌。

2．1．4．4 确认4℃冰箱运行状态完好，已挂有“运行”标志牌。

上述设备操作详见设备标准操作规程。

2．1．5 配液

2．1．5．1 抗凝剂100ml：摘下扭力天平“备用”状态牌，挂上“运行”状态牌。准确称取柠檬酸钠5g，氯化钠0.9g，加注射用水溶解，定容至100ml，放入250ml盐水瓶中，用二层硫酸纸、一层牛皮纸封口，用线绳系紧，121℃60分钟高压灭菌。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。灭菌使用期限不超过72小时。

2．1．5．2 0.9%氯化钠溶液200ml：准确称氯化钠1.8g，加注射用水溶解，定容至200ml，放入250ml血浆瓶中，用二层硫酸纸、一层牛皮纸封口，用线绳系紧。

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共配两瓶，注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者，121℃60分钟高压灭菌。灭菌使用期限不超过72小时。

2．1．5．3 1N盐酸120ml：取10ml浓盐酸，加注射用水至120ml，放入250ml盐水瓶中。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。

2．1．5．4 结晶紫溶液100ml：A：结晶紫 2g 95%乙醇 20ml B：草酸铵[(NH4)2C2O4.H2O] 0.8g 注射用水 80ml 准确称取结晶紫2g，加入95%乙醇20ml，混合均匀，即为A液，精确称取草酸铵溶液0.8g，加入注射用水，定容80ml。混合溶液A和溶液B,使用前贮存24小时,用滤纸滤过至棕色瓶中。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。

2．1．5．5 碘液200ml：用扭力天平准确碘化钾2g，溶于10ml注射用水中，再称碘1g，加入，碘化钾溶液中，待碘完全溶解后，加注射用水定容200ml，放入250ml棕色瓶中。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。

2．1．5．6 95%乙醇溶液100ml：用量筒准确量取无水乙醇95ml，加注射用水定容至100ml，放入250ml棕色瓶中。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。

2．1．5．7 沙黄溶液100ml：用扭力天平准确称取沙黄1g溶于95%乙醇40ml中即为25g/L沙黄乙醇溶液。取25g/L沙黄乙醇溶液10ml，加注射用水90ml，混匀。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。

2．1．5．8 1%二盐酸二甲基对苯二胺溶液10ml：取电子分析天平0.1g二甲基对苯二氨盐酸盐，加注射用水至10ml于10ml青瓶中。需新鲜配制，于冷处避光保存，如试液变成红褐色，不可使用。

2．1．5．9 75%乙醇溶液1000ml：用量筒量取750ml无水乙醇，加注射用水定容1000ml。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。

2．1．6家兔血浆：摘下台式离心机“备用”状态牌，挂上“运行”状态牌。以无菌注射器吸取灭菌的抗凝剂1ml，用无菌操作取家兔血9ml，轻轻混匀数分钟，

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待血液不凝固时，徐徐放入无菌离心管中以1000rpm，离心20分钟，分离血浆，用无菌吸管吸血浆移至无菌试管中，置4℃冰箱备用。

临用前，血浆需用已知血浆凝固酶试验阳性的金黄色葡萄球菌测试，证明血浆合格后，方可使用。

2．1．7 供试液： 摘下超净工作台“备用”状态牌，挂上“运行”状态牌。打开超净工作台30分钟后使用。摘下电子分析天平“备用”状态牌，挂上“运行”状态牌。摘下 恒温水浴箱“备用”状态牌，挂上“运行”状态牌，将水浴温度设定为37℃。打开电子分析天平，称取栓剂3枚重量。在超净工作台内，无菌剪开栓剂，放入250ml血浆瓶中，称取剪下的包装带重量，计算出栓剂的实际重量。按10倍稀释加入0.9%无菌氯化钠溶液，盖好胶栓。在37℃恒温水浴箱内，混匀。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。

2．1．8培养基的配制

2．1．8．1 营养肉汤培养基350ml：用扭力天平准确称取干粉营养肉汤培养基7g，加注射用水约300ml于500ml烧杯中，加热溶解后，用量筒定容到350ml，分装于 250ml三角瓶，每瓶100ml，共3瓶，用二层硫酸纸、一层牛皮纸封口，用线绳系紧。其余分装中试管，每支5ml，盖透气栓，115℃30分高压灭菌，。贴上标明液体名称、日期的标签。冷却后置4℃冰箱备用

2．1．8．2营养琼脂培养基250ml： 用扭力天平准确称取干粉营养琼脂培养基8.5g，加注射用水约200ml，于500ml烧杯中加热溶解，用量筒定容到250ml，用滤纸过滤后，装于500ml盐水瓶中，用二层硫酸纸、一层牛皮纸封口，用线绳系紧。115℃30分高压灭菌。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。

2．1．8．3玫瑰红钠琼脂培养基250ml：用扭力天平准确称取干粉玫瑰红钠琼脂培养基7.5g，加注射用水约200ml，于500ml烧杯中加热溶解，用量筒定容到250ml，用滤纸过滤后，装于500ml盐水瓶中，用二层硫酸纸、一层牛皮纸封口，用线绳系紧。115℃30分高压灭菌。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。

2．1．8．4胆盐乳糖培养基300ml：用扭力天平准确称取干粉胆盐乳糖培养基10.8g，加注射用水约250ml，于500ml烧杯中，加热溶解后，用量筒定容到300ml，

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分装250ml三角瓶，每瓶100ml，用二层硫酸纸、一层牛皮纸封口，用线绳系紧。115℃30分高压灭菌。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。冷却后置4℃冰箱备用。

2．1．8．5十六烷三甲基溴化氨琼脂100ml：用扭力天平准确称取干粉十六烷三甲基溴化氨琼脂3.2g，加注射用水约80ml，于250ml烧杯中加热溶解，用量筒定容到100ml，用滤纸过滤后，装于250ml盐水瓶中，用二层硫酸纸、一层牛皮纸封口，用线绳系紧。115℃30分高压灭菌，温度降为50-60℃倒平板，注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。冷却后置4℃冰箱备用。

2．1．8．6甘露醇高盐琼脂培养基100ml： 用扭力天平准确称取干粉甘露醇高盐琼脂培养基10.6g，，加注射用水约80ml，于250ml烧杯中加热溶解，用量筒定容到100ml，用滤纸过滤后，装于250ml盐水瓶中，用二层硫酸纸、一层牛皮纸封口，用线绳系紧。115℃30分高压灭菌，温度降为50-60℃倒平板，注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。冷却后置4℃冰箱备用。

2．1．8．7绿脓菌素测定用培养基50ml： 用扭力天平准确称取绿脓菌素测定用培养基干粉2.27g，加注射用水约40ml，加甘油0.5ml加入到100ml烧杯中，加热溶解，定容到50ml，放入250ml盐水瓶中，用二层硫酸纸、一层牛皮纸封口，用线绳系紧，115℃30分高压灭菌，温度降为50-60℃，倒斜面，注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者，冷却后置4℃冰箱备用。

2．1．8．8明胶培养基100ml：用扭力天平精确称取干粉明胶培养基12.8g，加注射用水80ml于250ml烧杯中加热溶解，用量筒定容到100ml，用中试管分装，每管5ml ，盖透气试管栓。115℃30分高压灭菌。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。冷却后置4℃冰箱备用。

2．1．8．9硝酸盐胨水培养基100ml：称干粉硝酸盐胨水培养基1.5g，加注射用水80ml，于250ml烧杯中加热溶解，用量筒定容到100ml，分装中试管，每管5ml，盖透气试管栓。115℃30分高压灭菌。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。冷却后置4℃冰箱备用。

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2．1．9 对照用菌液的制备：将恒温培养箱、空气恒温震荡器“备用”状态牌摘下，挂上“运行”状态牌。在超净工作台内，用金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌菌种接种营养琼脂斜面培养基，在恒温培养箱内在30-35℃下培养18-20小时。，分别用接种环取营养琼脂斜面培养基扩增的金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌新鲜培养菌1白金耳，接种于营养肉汤培养基内，每菌接种2管，标明菌液名称、日期。在空气恒温震荡器内30-35℃震荡培养18-20小时。试验时以1:106比例稀释，接种菌数为50-100个。

2．2 操作步骤

操作过程简述如下：接种→培养→细菌计数(鉴别试验)

以下操作均为无菌操作。

2．2．1 细菌、霉菌与酵母菌计数

2．2．1．1 平皿菌落计数法

2．2．1．1．1稀释供试液：取三个青瓶，每个加入9ml灭菌0.9%氯化钠溶液，取1ml均匀供试液，在青瓶中做1∶10、1∶102、1∶103倍稀释级。

2．2．1．1．2 将营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基预热，并冷却到45℃左右。

2．2．1．1．3用吸管吸取供试液，每个稀释度(1∶10、1∶102、1∶103)连续吸取4次，每次1ml，置直径约90mm的平皿中共12个，每个稀释度的前2个平皿倒入营养琼脂培养基约15ml/皿，每个稀释度的后2个平皿倒入玫瑰红钠琼脂培养基约15ml/皿，混匀，待凝固后倒置培养。

2．2．1．1．4菌数测定空白对照试验

用吸管吸取0.9%无菌氯化钠溶液1ml/皿，共4个平皿，其中两皿倒营养琼脂培养基约15ml/皿，两皿倒玫瑰红钠琼脂培养基约15ml/皿，待凝固后，倒置培养。

细菌的培养温度为30-35℃，霉菌的培养温度为25-28℃。

用营养琼脂培养基检查细菌，用玫瑰红钠琼脂培养基检查霉菌。空白对照不得长菌。

细菌培养时间为48小时，分别在24小时及48小时点计菌落数，一般以48小时菌落数为准，霉菌培养时间为72小时，分别在48小时及72小时点计菌落数，一般以72小时菌落数为准。

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点计后，计算各稀释级的平均菌落数，按菌落报告规则报告菌数。

2．2．1．1．5 菌数报告规则

细菌宜选取平均菌落数在30~300之间的稀释级，霉菌宜选取平均菌落数在30~100之间的稀释级作为报告菌落数计算的依据。如有1个稀释级在30~300（30~100）之间时，将该稀释级的菌落数乘以稀释倍数报告；同时有2个稀释级在30~300（30~100）之间时，按以下计算两级比值。

比值= 高稀释级的平均菌落数×稀释倍数

低稀释级的平均菌落数×稀释倍数

当比值≤2时，以两稀释级的均值报告，当比值＞2时，以低稀释级的平均菌落数乘以稀释倍数报告；如同时有3个稀释级的平均菌落数均在30~300之间时，以后2个稀释级计算级间比值报告；如各稀释级间的平均菌落数均不在30~300，以最接近30或300的稀释级平均菌落乘以稀释倍数报告；如各稀释级平均菌落数均在300（100）以上，按最高稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告；如各稀释级平均菌落数均小于30时，一般按最低稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告。如当1∶10（或1∶100）稀释级平均菌落数等于或大于原液（或1∶10）稀释级时，应以培养基稀释法测定，按测定结果报告菌数。/

2．2．1．2 培养基稀释法取供试液（原液或1∶10、1∶100供试液）3份，每份各1ml，分别注入5个平皿内（每皿个0.2ml）。每1个平皿倾注营养琼脂培养基约15ml，混匀，凝固后，倒置培养，计数。每1ml注入的5个平板的菌落数之和，为每1ml的菌落数，共得3组数据。以3份供试液菌落数的平均值乘以稀释倍数报告。

如各稀释级平板菌落数均无菌落生长，或仅最低稀释级平均菌落数小于1时，则报告菌落数小于10个。

2．2．2 控制菌检查

2．2．2．1 铜绿假单胞菌

2．2．2．1．1 取胆盐乳糖培养基3瓶，每瓶100ml，两瓶加入10ml供试液，其中一瓶加入铜绿假单胞菌对照液1ml作为阳性对照，第三瓶加入10ml 0.9%无菌氯化钠溶液作为阴性对照。在37℃培养18-24小时后，阴性对照应无菌生长，其余2瓶培养液划线接种于十六烷三甲基溴化氨琼脂平板上，培养18-24小时。当阳性对

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照的平板呈现阳性菌落，既扁平，无定形，周边扩散，表面湿润，灰白色，周围时有蓝绿色素扩散；供试品的平板无菌落或无疑似菌落生长时，可判为未检出铜绿假单胞菌。

如生长菌落具有铜绿假单胞菌特征或疑似者，挑选2-3个菌落，分别接种于营养琼脂培养基斜面上，在30-35℃培养18-24小时，取培养物做革兰氏染色，并做氧化酶试验。

2．2．2．1．2 革兰氏染色

摘下生物显微镜“备用”状态牌，挂上“运行”状态牌。用接种针取营养琼脂培养基斜面培养物于载玻片上，加1滴生理盐水稀释后，涂匀，将玻片通过火焰，加热固定，用结晶紫染色约1分钟，细水流冲洗，加碘液覆盖1分钟，细水流冲洗，滴加95%酒精，并摇动玻片使之脱色，细水流冲洗，加沙黄染色，约染30秒钟，细水流冲洗，最后用吸水纸吸干，滴加松柏油，在油镜下检查，紫色细菌为革兰氏阳性菌，黄色细菌为革兰氏阴性菌。

2．2．2．1．3 氧化酶试验

取洁净滤纸置于平皿内，用无菌玻璃棒取营养琼脂培养基斜面培养物，涂于滤纸上，再滴加新配制的1%二盐酸二甲基对苯二胺试液，在30秒内呈粉红色，逐渐变成紫红色为氧化酶试验阳性，否则为阴性。

如证实为非革兰氏阴性无芽孢杆菌或氧化酶试验阴性，均可判为未检出铜绿假单胞菌。否则，应进行绿脓菌素试验。

2．2．2．1．4 绿脓菌素试验

取上述琼脂斜面培养物，接种于绿脓菌素测定用培养基斜面上，同时做阴性对照，在30-35℃培养24小时，在试管内加氯仿3-5ml，搅拌培养基并充分振摇，静止片刻，用吸管将氯仿移至另一试管中，加入1mol/L盐酸约1ml，振摇后，静置片刻，如盐酸溶液层内出现粉红色，即为绿脓菌素阳性。

当阴性对照试验成阴性时，供试品检查为革兰氏阴性杆菌，氧化酶试验阳性及绿脓菌素试验阳性，可判为检出铜绿假单胞菌。绿脓菌素阴性的培养物应进行以下试验。

2．2．2．1．5 硝酸盐还原产气试验

取营养琼脂培养基斜面培养物，接种于硝酸盐胨水培养基中，加入杜氏管，

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在空气恒温震荡器中，35℃培养24小时，如培养基中的杜氏管有气体产生，即为阳性。

2．2．2．1．6 42 ℃生长试验

将营养琼脂培养基斜面培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成菌悬液，再将菌悬液接种于营养琼脂培养基斜面上，立即置41±1℃恒温水浴箱中培养24-48小时，有菌苔生长者为阳性，否则为阴性。

2．2．2．1．7 明胶液化试验

用接种针沾取营养琼脂培养基斜面培养物，用穿刺法接种于明胶培养基，在恒温培养箱中35℃培养24小时，取出置冰箱内10-30分钟，如培养基仍呈溶液状，为阳性。

当革兰氏阴性杆菌氧化酶试验、硝酸盐还原产气试验、42 ℃生长试验及明胶液化试验均为阳性时，而绿脓菌素试验阴性，应判为检出铜绿假单胞菌。

2．2．2．2 金黄色葡萄球菌

2．2．2．2．1 取营养肉汤培养基3瓶，每瓶100ml，两瓶加入10ml供试液，其中一瓶加入1ml金黄色葡萄球菌对照菌液作为阳性对照，第3瓶加入10ml0.9%无菌氯化钠作为阴性对照，培养18-24小时（必要时延至48小时），阴性对照应无菌生长，取其余两瓶培养液分别划线接种甘露醇高盐琼脂培养基平板，培养24-72小时。当阳性对照的平板呈现金黄色圆形凸起，边缘整齐，外围有金黄色环，菌落直径为0.7-1mm的阳性特征，而供试品的平板无菌落生长，或有菌落，但不同于金黄色葡萄球菌菌落特征时，可判为未检出金黄色葡萄球菌。

如有菌落生长，并与金黄色葡萄球菌特征相符或疑似者，可挑选2-3个菌落，分别接种于营养琼脂培养基斜面上，培养24-48小时，取其培养物做革兰氏染色，并做血浆凝固酶试验。

2．2．2．2．2 革兰氏染色：同2.2.2.1.2

2．2．2．2．3 血浆凝固酶试验

取灭菌小试管3支，各加入血浆-灭菌注射用水（1:1）0.5ml，1支加入被检菌株的营养肉汤培养液（或脓菌悬液）0.5ml，1支加入金黄色葡萄球菌的营养肉汤培养物或菌悬物0.5ml为阳性对照，另1支加入营养肉汤或0.9%无菌氯化钠溶液0.5ml作阴性对照。将3管同时培养。3小时后开始检查，以后间隔适当时间逐次观察直

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至24小时。阴性对照管的血浆流动自如，阳性对照管血浆凝固，试验管血浆凝固者为阳性；阳性对照管和阴性对照管任何一管不符和要求时，应另制血浆，重新试验。

当阴性对照和阳性对照符合要求，供试品的菌株为革兰氏阳性球菌，血浆凝固酶试验阳性时，判定为检出金黄色葡萄球菌。

2．3 设备关闭后，场地上摘下“使用中”标志牌，挂上“待处理”标志牌。 3 结果判定

3．1 判定标准：

细菌菌落数、霉菌（酵母菌）菌落数、控制菌三项均符合栓剂微生物限度检定规定，应判供试品合格；其中一项不符合栓剂检定规定，应判供试品不合格。

细菌菌落数为每g栓剂不得超过100个，霉菌菌落数为每g栓剂不得超过10个。

细菌菌落数、霉菌（酵母菌）菌落数第一次测定超过微生物限度规定时，应从同一批号样品中随机抽样，复试两次，以三次结果平均值报告。

如发现营养琼脂培养基平板生长霉菌（酵母菌）菌落数或玫瑰红钠琼脂培养基平板上生长细菌菌落数超过栓剂微生物限度规定时，应判为不合格。

栓剂检出控制菌或致病菌时，按一次检出结果为准，不再抽样复试，即应判该供试品不合格。

3．2 判定结果及填写记录

工作结束后，填写实验记录，内容包括样品名称、批号、判定结果、工作者及复核者等项目。

4 清场

4．1配液后清场

4．1．1称药之后将药品瓶盖盖紧，放回药品柜中。

4．1．2将扭力天平、电子分析天平清洁干净，摘下“运行”标志牌，挂“备用”标志牌。

4．1．3用专用抹布擦拭仪器表面，用专用拖布拖地。

4．1．4使用后的玻璃器皿用纯化水冲洗干净后，返回洗刷组处理。

4．2操作后清场

4．2．1将带菌的器皿送高压灭菌后，送洗刷。

重组人干扰素α2a栓微生物限度检测标准操作规程

4．2．2用专用抹布擦拭仪器表面，用专用拖布拖地。

4．2．3 将所用设备清洁干净，摘下“运行”标志牌，挂“备用”标志牌。

4．3 清场后由车间工序负责人/质量监督员、检查后，摘下“待处理”标志牌，挂上“清场合格”标志牌。

5 注意事项

5．1 严格按无菌操作进行，避免人为的因素对结果产生影响。

5．2 工作中注意二人复核。

5．3 带菌物品一定要处理后，再送洗刷。