重组人干扰素α2a栓微生物限度检测标准操作规程

重组人干扰素α2a栓剂微生物限度检测标准操作规程

依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。

范围：本实验适用于重组人干扰素α2a栓剂的成品微生物限度检定。

目的：检查栓剂的微生物污染程度。

原理：在适合细菌及霉菌生长的培养基上，在适宜的温度下培养，通过菌落计数，测定栓剂染菌量，利用选择培养基，通过细菌形态及鉴别试验对控制菌进行检测。

内容：

1 材料

1．1 样品：从该批栓剂中随机抽取。

1．2 培养基

1．2．1 干粉营养肉汤培养基。

1．2．2 干粉营养琼脂培养基。

1．2．3 干粉玫瑰红钠琼脂培养基。

1．2．4 干粉胆盐乳糖培养基。

1．2．5 干粉十六烷三甲基溴化氨琼脂培养基。

1．2．6 干粉甘露醇高盐琼脂培养基。

1．2．7 干粉绿脓菌素测定用培养基。

1．2．8 干粉明胶培养基。

1．2．9干粉硝酸盐胨水培养基。

以上培养基均由中国药品生物制品检定所提供。

1．3 试剂

柠檬酸钠 Na3C6H5O7. 2H2O 分析纯

氯化钠 NaCl 分析纯

碘化钾 KI 分析纯

碘 I2 化学纯

无水乙醇 CH3CH2OH 分析纯

结晶紫 C25H30ClN3.9H2O

重组人干扰素α2a栓微生物限度检测标准操作规程

草酸铵 (NH4)2C2O4.H2O 化学纯

沙黄

氯仿 CHCl3 分析纯

盐酸 HCl 分析纯

来苏儿 外用

二盐酸二甲基对苯二胺

1．4 阳性对照菌

1．4．1 金黄色葡萄球菌：购自吉林省药检所。

1．4．2 铜绿假单胞菌：购自吉林省药检所。

1．5 注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版要求。

1．6 其它

接种针、接种环、硫酸纸、剪刀、镊子、刀片、牛皮纸、脱脂棉、线绳、滤纸、载玻片、煤气头、石棉网

1．7 仪器及设备

超净工作台 CBK-D20型 安徽蚌埠净化设备厂

台式离心机 TGL-16G型 上海安亭科学仪器厂

扭力托盘天平 TN-100B型 上海第二仪器厂

电子分析天平 ES-120J 型 沈阳龙腾电子称量仪器有限公司

恒温培养箱 PYX-DHS型 湖北省黄石市医疗器械厂

空气恒温震荡器 HZQ-C型 哈尔滨市东联电子技术开发有限公司

生物显微镜 XSZ-H3型 重庆光学仪器厂

恒温水浴箱 HW-1 型 北京医疗设备厂

4℃冰箱 BCD-185型 沈阳医疗器械厂

1．8 器皿

试管、杜试管、注射器（10ml）、平皿（90mm）、 青霉素瓶（10ml）、 250ml 三角瓶、烧杯（100ml、250ml、500ml）、吸管（10ml、5ml、1ml）、吸球（1ml、10ml）、离心管50ml、 250ml血浆瓶、盐水瓶（250ml、500ml）、试管栓、青瓶栓、翻帽栓、量筒（100ml、250ml、500ml）、玻璃棒

2 方法

重组人干扰素α2a栓微生物限度检测标准操作规程

2．1 准备工作

2．1．1 工作环境：所有无菌操作在100级超净台内进行，其他需在K空调环境中操作，确认场地清场合格后，摘下“清场合格”标志牌，挂上“使用中”标志牌。

2．1．2 器皿清洗要求：经过洗刷组处理。

以上杜试管、青霉素瓶（10ml）、试管栓、青瓶栓、翻帽栓分别装在饭盒中。试管、注射器（10ml）、平皿、离心管50ml、硫酸纸、剪刀、镊子、刀片均用硫酸纸包好。吸管（10ml、5ml、1ml）里面用硫酸纸，外面用牛皮纸包装。250ml三角瓶、500 ml三角瓶、250ml血浆瓶、250ml盐水瓶、500ml盐水瓶、量筒（100ml、250ml、500ml）分别用一层硫酸纸，一层牛皮纸包口，用线绳扎紧，备用。

2．1．3 以上所有器皿除接种针、接种环外，均需121℃60分钟高压灭菌。灭菌使用期限不超过48小时。

2．1．4调试仪器设备

2．1．4．1 确认扭力天平、电子分析天平运行状态完好，已挂有“备用”标志牌。

2．1．4．2 确认超净工作台、台式离心机运行状态完好，已挂有“备用”标志牌。

2．1．4．3 确认恒温培养箱、恒温水浴箱、空气恒温震荡器、生物显微镜运行状态完好，已挂有“备用”标志牌。

2．1．4．4 确认4℃冰箱运行状态完好，已挂有“运行”标志牌。

上述设备操作详见设备标准操作规程。

2．1．5 配液

2．1．5．1 抗凝剂100ml：摘下扭力天平“备用”状态牌，挂上“运行”状态牌。准确称取柠檬酸钠5g，氯化钠0.9g，加注射用水溶解，定容至100ml，放入250ml盐水瓶中，用二层硫酸纸、一层牛皮纸封口，用线绳系紧，121℃60分钟高压灭菌。注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者。灭菌使用期限不超过72小时。

2．1．5．2 0.9%氯化钠溶液200ml：准确称氯化钠1.8g，加注射用水溶解，定容至200ml，放入250ml血浆瓶中，用二层硫酸纸、一层牛皮纸封口，用线绳系紧。

重组人干扰素α2a栓微生物限度检测标准操作规程

共配两瓶，注明溶液名称、浓度、体积、批号及配制日期，二人复核，并标明工作者、复核者，121℃60分钟高压灭菌。灭菌使用期限不超过72小时。

2．1．5．3 1N盐酸120ml：取10ml浓盐酸，加 …… 此处隐藏：7553字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……