高效液相色谱法测定甘蔗节间果糖、葡萄糖和蔗(3)

200 2011, Vol. 32, No. 02

食品科学※分析检测

2000001

175000U

150000IR125000n100000750005000023

25000

4

2

4681012

时间/min

1.溶剂(H2O)；2.果糖；3.葡萄糖；4.蔗糖。

图1 标样色谱图

Fig.1 HPLC chromatogram of mixed sucrose, glucose and fructose

standards

2.4精密度与回收实验

对待测的提取液同一样品重复进样5次，测定峰面

积，并通过计算相对标准偏差(RSD)考察其测定的精密度，得出3种糖的RSD依次为果糖0.82%、葡萄糖0.83%、蔗糖0.87%，说明精密度良好(表2)。

表2 方法的精密度和回收率(n=5)

Table 2 Spike recoveries and relative standard deviations for sucrose,

glucose and fructose in a real sample (n = 5)

组分样品含量/mg加标量/mg测得量/mgRSD/%回收率/%果糖13.717485.018.609480.8297.84葡萄糖15.308755.020.264750.8399.12蔗糖

51.17643

5.0

56.11993

0.87

98.87

采用加标样回收法，把样品提取液等分为两份，一份精确加入果糖、葡萄糖、蔗糖的标样各100mg，一份不加，同时定容至10mL。经0.45μm微孔滤膜过滤后，按照1.3节色谱分析条件平行测定5次，计算回收率。实验表明，3种糖的平均回收率分别为97.84%、99.12%、98.87%，说明该方法具有较高的准确度(表2)。2.5

甘蔗节间样品分析

3500001

300000U

250000IR200000n1500001000004

50000

2

30

2

4

6 8

10

12

时间/min

1.溶剂；2.果糖；3.葡萄糖；4.蔗糖。

图2 甘蔗节间样品色谱图

Fig.2 HPLC chromatogram of a real sample

按照1.3节色谱分析条件对样品进行液相色谱分析，测定两个不同甘蔗品种(福农28和ROC-5)偶数节间果糖、葡糖糖、蔗糖的色谱峰峰面积，代入工作曲线

分别计算其含量。图2为福农28第6节间样品色谱图。3

结 论

实验结果表明，采用高效液相色谱法分析甘蔗节间果糖、葡萄糖、蔗糖，保留时间重现性好，三者的含量和峰面积比值之间呈良好的线性关系，相对标准偏差较好，加标回收率准确度较高，是一种检测分析甘蔗节间糖分组成和含量的简便、快速、准确的方法。

参考文献：

[1]陈如凯, 林彦铨, 张跃彬. 甘蔗技术100问[M]. 北京: 中国农业出版社, 2009.

[2]

BRUMBLEY S M, SNYMAN S J, GNANASAMBANDAM A, et al.A compendium of transgenic crop plants: sugar, tuber and fiber crops[M].Oxford, U K: Wiley-Blackwell Publishing, 2008.

[3]文赤夫, 董爱文, 李国章, 等. 蒽酮比色法测定紫花地丁中总糖及还原糖含量[J]. 现代食品科技, 2005, 21(3): 122-130.

[4]

王俊刚, 张树珍, 杨本鹏, 等. 3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定甘蔗茎节总糖和还原糖含量[J]. 甘蔗糖业, 2008(5): 45-49.

[5]李利军, 孔红星, 张家仁, 等. 间苯二酚与蔗糖反应的动力学研究[J].甘蔗糖业, 2004(1): 16; 27-31.

[6]顾大明, 鲍治宇, 冯立彬. 用旋光法测定蜂蜜主要成分含量的研究[J]. 哈尔滨建筑大学学报, 2000, 33(4): 124-126.

[7]何照范, 张迪清. 保健食品化学及其检测技术[M]. 北京: 中国轻工业出版社, 1998: 161-169.

[8]沈小婉, 李明元, 叶世柏, 等. 色谱法在食品分析中的应用[M]. 北京:北京大学出版社, 1992.

[9]

BERNARDEZ M M, MIGUELEZ J D, QUEIJEIROB J G. HPLCdetermination of sugars in varieties of chestnut fruits from galicia[J].Journal of Food Composition and Analysis, 2004, 17(1): 63-67.

[10]胡长平. 液相色谱法对糖类的测定[J]. 安徽化工, 2005, 31(2): 57-58.[11]刘玉峰, 李黎, 李东, 等. 高效液相色谱法测定食品中的单糖、双糖[J]. 食品科学, 2007, 28(3): 293-296.

[12]

薛应龙. 植物生理学实验手册[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 1985.[13]

孙兰, 黎淑端, 聂木海, 等. 一起食品中还原糖测定结果异常的原因分析[J]. 中国卫生检验杂志, 2005, 15(9): 1137.

[14]

贺永惠, 王清华, 刘长忠, 等. 乙酸酐衍生化气相色谱法测定小麦非淀粉多糖的单糖组成[J]. 光谱实验室, 2009, 26(4): 1039-1042.[15]

姜晓满, 田卫, 张海霞, 等. 糖类物质的色谱分析[J]. 药物分析杂志,2006, 26(8): 1181-1186.

[16]

张书芬, 史萍萍, 王全林, 等. 液相色谱示差折光法测定蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖[J]. 食品科学, 2008, 29(6): 280-283.

[17]刘胜辉, 魏长宾, 孙光明, 等. 高效液相色谱法测定台农6号菠萝果实中的糖分[J]. 食品科学, 2009, 30(12): 162-164.