DNA分子标记技术

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安徽农业科学。 u aoAhi g. c2O, ( ) 42 72 J r lf nuA, Si 073 2: 2— 44 on i . 547

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孙红忠

责任校对

李洪

D NA分子标记技术及其应用白玉 (都范学命科学院北 o3首师大生学，京l0) 07摘要对R L、A D A L、S、 S FP R P、FP SR I R等常用的D A分子标记技术以及其他几种新兴的标记技术( N、S等) S N S PE F的原理、特点进行了综

述，认为利用 D A分子标记技术来鉴定品种具有客观、 N准确、快速的特点，可鉴定形态上很难或者根本无法鉴别的品种。分子标记技且术已成为品种鉴定技术领域的主流和发展趋势。

关键词 D A分子标记；n R P; PSR I R品种鉴定 N R;A D;; S; 6 L S S中图分类号 Q 0文献标识码 A 5 3 文章编号 01— 6120)4 042 0 57 61(072— 72— 3

遗传标记 ( eec a e是指可追踪染色体、 G n im r r t k )染色体某一

的遗传信息。⑥D A分子标记技术简单、 N快速、易于自动化。⑦提取的 D A样品， N在适宜条件下可长期保存，这对于进行追溯性或仲裁性鉴定非常有利。

节段或者某一个基因座在家系中传递的任何一种遗传特

性。它具有 2个基本特征，即可遗传性和可识别性。因此， 生物中任何有差异表型的基因突变型均可作为遗传标记。 随着遗传学的不断发展，遗传标记的种类和数量也不断增加。目前，应用较为广泛的遗传标记有形态标记 ( o hl i M r o g p o.cl ae)细胞标记 ( y l i l ae)生化标记 ( i hmcl a m kr、 C to c kr、 o g am Bo e i c a

因此，N D A分子标记可以弥补和克服在形态学鉴定及同 工酶、白电泳鉴定中的许多缺陷和难题，蛋因而在品种鉴定方面展示了广阔的应用前景。 11第 1 .代分子标记

mkr和分子标记 ( l cl ae _。 ae ) M lu r kr l 0 am )_ e形态标记指植物的外部形态特征 (矮秆、紫鞘、叶等)卷； 细胞标记主要是染色体的核型 (色体数目、染结构、随体有无、着丝粒位置等 )带型 (带、、等 )生化标记主和 C N带 G带；要包

括同工酶和等位酶标记。这 3标记都是基因表达的种 结果，是对基因的间接反映，记数目有限，标多态性较差，易受环境条件的影响。而分子标记是直接在 D A分子上检测 N生物间的差异，在 D A水平上遗传变异的直接反映。分是 N子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一

1I1 FP .. R L标记技术。18年 Bti提出的限制性片段 90 os en长度多态性 (e rtn r ete【pl o h m,F P可 Rsii a nl g y r i sR L ) tco f￣ n h om p s

以作为遗传标记，开创了直接应用 D A多态性的新阶段， N是最早应用的分子标记技术【。R L是检测 D A在限制性内 4 FP j N切酶酶切后形成的特定 D A片段的大小，映 D A分子上 N反 N

不同酶切位点的分布情况，因此 D A序列上的微小变化， N甚至1个核苷酸的变化，能引起限制性内切酶切点的丢失或也产生，导致酶切片段长度的变化。R L标记的等位基因具 FP有共显性的特点，结果稳定可靠，重复性好，别适应于构建特遗传连锁图。但是，在进行 R L分析时， FP需要该位点的 D A N片段做探针，放射性同位素及核酸杂交技术，用既不安全又不易自动化。另外，FP D A多态性检出的灵敏度不高， RL对 N RL F P连锁图上还有很多大的空间区E。 2 j 112 R P .. A D标记技术。为了克服 m 1【术上的缺点， P技 W l m等于 19年建立了随机扩增多态 D A(adm i as l i 90 N Rno apfd o m r i D A,A D技术， m le l o h N R P ) i py pe i由于其独特的检测 D A多态性的方式使得 R P N A D技术很快渗透于基因研究的各个领域。R P A D是建立于 PR基础之上的分子标记技术， E基本原理是利用一个随机引物 (~1个碱基 )过 P R反应 8 0通 E非定点地扩增 D A片段，后用凝胶电泳分离扩增片段来 N然进行 D A多态性研究 j N 6。对任一特定引物而言，在基因它

种较为理想的遗传标记形式，以蛋白质、酸分子的突它核

变为基础，检测生物遗传结构与其变异。分子标记技术从 2本质上讲，是以检测生物个体在基因或

基因型上所产生的都 变异来反映生物个体之间的差异。D A分子标记能对不同 N

发育时期的个体、任何组织器官甚至细胞作检测，数量极多，遍及整个基因组，多态性高，遗传稳定，不受环境及基因表达与否的限制。1分子标记及其特点

分子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展

起来的一种较为理想的遗传标记形式，以蛋白质、它核酸分子的突变为基础，检测生物遗传结构与其变异。分子标记技术从本质上讲，以检测生物个体在基因或基因型上所产都是生的变异来反映生物个体之间的差异。每一种分子标记都有其自身的特点和特定的应用范围，就一般意义而言，但 D A分子标记与形态标记和生化标记等相比，有许多独特 N具的优点：受组织类别、育阶段等影响。植株的任何 3①不 j发

组 D A序列上有其特定的结合位点，旦基因组在这些区 N一域发生 D A片段插入、 N缺失或碱基突变，可能导致这些特就

定结合位点的分布发生变化，从而导致扩增产物的数量和大小发生改变，出多态性。与 R L相比， AD技术简单，表现 FP RP 检测速度快，N D A用量少，实验设备简单，不需 D A探针， N设

组织在任何发育时期均可用于分析。②不受环境影响。因 为环境只影响基因表达 (转录与翻译),而不改变基因结构即 D A的核苷酸序列。③标 …… 此处隐藏：9192字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……