酵母菌的分离及鉴定

　　西北师范大学学报(自然科学版)第33卷1997年第2期　　　　　　　56JournalofNorthwestNormalUniversity(NaturalScience)Vol133　1997　No12酵母菌的分离及鉴定3

冯克宽　王明谊　曾家豫

(西北师范大学生物系兰州730070)

第一作者简介　冯克宽,男,58岁.1959,为纤维素酶及乳酸菌.

中图法分类号　Q939

摘　要　952001、Sy942002、Sy942003的酵母菌株,:克洛克酵母属(Kloeckeasp.)、假丝酵母属(Candida)的热带假丝酵母(Tropicaeis)、类酵母属(Saccharomycodes)的中国类酵母(sinensis).

关键词　酵母菌　分离　鉴定　热带假丝酵母

　　酵母菌(yeasts)广泛分布于自然界,与人类有着密切关系.人们在日常生活中早就将酵母菌应用于制造酒类饮料,以及用来生产乙醇、甘露醇、有机酸和甘油等〔1〕,近年来由于生产和科学技术的迅速发展,酵母菌的应用愈来愈显得广泛.

随着世界人口的增加,解决人类的食物和能量问题已成为关键性问题,酵母因蛋白质含量高可以用来制造食用酵母和饲料酵母,因而其资源开发潜力很大,国外十分重视这一方面的开发和利用,如前苏联利用各类不同废物发酵生产单细胞蛋白(SCP),年产可达120万t,而我国需要量虽大,但生产量远远赶不上生产实际的需要,因此不断筛选SCP产生菌也就成为生产中的关键问题〔1〕.

笔者对吐鲁番土样中所筛选的3株酵母菌,通过形态、生理生化特征鉴定,确定到种,以进一步研究其应用价值.

1　材料与方法〔2〕

1.1　材料

新疆吐鲁番和火焰山附近土样.

1.2　培养基

(1)麦芽汁培养基;(2)葡萄糖酵母膏蛋白胨培养基;(3)Mcclary培养基;(4)玉米粉培养基;(5)糖发酵基础培养基;(6)同化碳源基础培养基;(7)同化乙醇基础培养基;(8)同化氮源基础培养基;(9)杨梅苷培养基;(10)产类淀粉培养基;(11)产酯培养基;(12)无维生素基础培养基;(13)尿素分解培养基;(14)需维生素培养基;(15)高渗培养基;(16)明胶培养基;(17)石蕊3甘肃省自然科学基金资助课题收稿日期:1996-12-16

1997年第2期冯克宽等:酵母菌的分离及鉴定　　　　　　　　1997　No12Theisolationandidentificationofyeast57牛奶培养基.

1.3　步骤

分离纯化试验,根据生态条件采集土样,富集培养.纯化采用稀释分离和平板划线,性能测定采用形态学特征和生理生化实验相结合的方法.

2　结果与讨论

2.1　形态学特征

1)细胞形态学观察.将分离菌种接种于麦芽汁液体培养基,25～28℃培养3d观察(见表1).

2)特征的培养观察.将分离菌种分别接种于麦芽汁液体培养基、固体培养基,28℃培养3d观察(见表1).

3)子囊孢子的形成.将鉴定菌株接种于Mcclary,25～283～5d,涂片在显微镜下观察(见表1).

4)假菌丝形成.3～5d观察(见表1).

5)(见表1).

2.2进行下列各项试验:

1)糖发酵试验.在Durhauistabe分装12.5%豆芽汁为糖发酵基础培养基,灭菌加10%糖液使糖浓度达2%,棉子糖4%,接种,25～28℃培养2～10d.

2)碳源同化.生长谱法测碳源同化,28℃培养1～2d,液体培养基测醇的同化,28℃培养3～7d.

3)氮源同化.基础培养基分别加入0.78%KNO3(NH4)2SO4,接种,28℃培养2～3d.

4)分解杨梅苷试验.将菌种接入杨梅苷培养基,28℃培养5～7d.

5)产类淀粉化合物测定.采用固体法,28℃培养7d.

6)产酯测定.用5%葡萄糖培养基,28℃培养3～5d.

7)牛奶冻化.脱脂牛奶培养基接种,28℃培养7～14d.

8)无维生素培养基中生长试验.将菌种接入无维生素培养基,28℃培养1～2d.

9)需维生素测定.生长谱法28℃培养1～2d.

10)耐渗透压.制50%、60%葡萄糖、1%酵母膏琼脂培养基划线接种,25～28℃培养7～14d.

11)尿素分解试验.制备尿素分解培养基,接种,25～28℃培养3～5d.

12)明胶液化试验.制备明胶培养基,穿刺接种,25℃以下培养7d.

13)37℃培养试验.最高、最适、最低温度常为某些菌种的鉴定特征之一,一般常以37℃作为测定酵母生长的温度.将菌种接种于固体培养基,37℃培养1～2d.

上述试验结果见表1和表2.

　　由表1和表2所示的各项试验结果来看,可知Sy952001菌株细胞卵圆形,为两端芽殖,无子囊孢子;它发酵葡萄糖,不发酵乳糖、半乳糖、麦芽糖、蜜二糖、蔗糖和棉子糖;碳源同化葡

西北师范大学学报(自然科学版)第33卷　　　　　　　　　　　　　　JournalofNorthwestNormalUniversity(NaturalScience)Vol13358

表1　酵母菌种的鉴定结果

生　　理　　特　　征

糖　发　酵糖　同　化

菌醭细细无假子葡乳半麦蜜蔗棉葡乳半麦蔗纤蜜海鼠DL菊棉D可山

菌株(号)　　性　　　　阿阿　胞胞囊维-溶　　繁　　　　　萄拉拉　　形大殖菌孢　乳芽二　子萄　乳芽　二二藻李　子木性梨伯伯　淀　　方　　　　糖落膜态小式丝子糖糖糖糖糖糖糖糖糖糖糖糖糖糖糖糖糖糖糖粉糖

乳具卵8 芽　　　1　殖　　　× 有无+------+--+V+------V-+-

Sy952001白环圆4两 5形态特征奶具卵7芽　环殖Sy942002油具圆× 有无+

5两色醭形　

白具1Sy942003有14　 -++-+-+-++V---++V-+--( )+-+-------------

表2　酵母菌种鉴定结果

生　　　理　　　特　　　征

氮源同化醇类同化其　　它维生素需要在乙甘山卫赤甘阿肌核无养牛油硝尿明于杨生耐生维维维维叶泛对 N　　　　　氨基奶脂酸素胶3类高KH　　生维生生7生　　　基上N4盐渗梨矛藓露东梅物酸 　　　　生生反分 …… 此处隐藏：2216字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……