微生物学实验

实验三. 放线菌、酵母菌、 实验三 放线菌、酵母菌、霉菌的观察

及微生物大小的测量一、实验目的： 实验目的：掌握三类微生物的基本形态 掌握酵母菌的染色法及霉菌的一般染色法 学会用测微尺测量微生物的大小

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二、实验原理1)放线菌的形态观察： )放线菌的形态观察：

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放线菌的观察方法： 插片法 将放线菌接种在琼脂平板上，插上灭菌盖玻 片后进行培养，使放线菌菌丝沿着培养基表 面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上 玻璃纸法 。 将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后 将放线菌接种于玻璃纸上，经培养，放线菌 在玻璃纸上生长形成菌苔。 印片法 将要观察的放线菌的菌落或菌苔先印在载玻 片上，经染色后观察。

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直型孢子丝

螺旋型孢子丝

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螺旋状 单轮生 放线菌孢子丝的光学显微镜图片

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2)酵母菌死、活细胞的鉴定及形态观察： )酵母菌死、活细胞的鉴定及形态观察：氧化型 蓝色 无色

用美兰制水浸片， 用美兰制水浸片，美兰为一种无毒性材料还原型

活细胞有较强还原力 死细胞无还原力

将美兰还原为无色 不能还原美兰 蓝色

染色结束时活细胞无色，死细胞蓝色。 染色结束时活细胞无色，死细胞蓝色。

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3)霉菌的形态观察 )

曲霉的分生孢子梗和顶囊上 的分生孢子

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曲霉的足细胞

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青霉的扫帚状分生孢子

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孢 孢子囊 囊 子 轴 囊 囊 孢

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霉菌的静孢子 毛霉的孢子囊； 孢子囊壁破裂， 左：毛霉的孢子囊；中：孢子囊壁破裂，露出静 孢子； 孢子；右：囊轴

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霉菌形态观察的方法： 霉菌形态观察的方法：乳酚油具有固定、染色、保持水分、 乳酚油具有固定、染色、保持水分、杀菌防 腐作用，因此制成的片子细胞不变形， 腐作用，因此制成的片子细胞不变形，孢子 不宜飞散，保存时间较长。 不宜飞散，保存时间较长。 采用乳酸、石碳酸、棉兰染液(乳酚油) 采用乳酸、石碳酸、棉兰染液(乳酚油)染 色。

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4)微生物大小测量： )微生物大小测量：采用镜台、 采用镜台、目镜两种测微尺进行测量 镜台测微尺：是一块特殊的载玻片， 镜台测微尺：是一块特殊的载玻片，中央刻有精确 刻度(1mm分成 刻度( 分成100个小格),用于校正目镜测微 个小格),用于校正目镜测微 分成 个小格), 尺。

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目镜测微尺：是一圆形玻片， 目镜测微尺：是一圆形玻片，其上有精确刻度 ),经校正后用来测量 (50-200),经校正后用来测量。 ),经校正后用来测量。

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三、实验材料酵母菌(培养36h左右)、根霉、目镜测微 尺、镜台测微尺、显微镜、接种环、接种 针、盖玻片等

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四、实验步骤1.观察

放线菌、青霉和曲霉的预装片(示范) 观察放线菌、青霉和曲霉的预装片(示范) 观察放线菌 2.酵母菌片子制作 酵母菌片子制作取一干净载玻片， 取一干净载玻片，滴一滴美兰染液 无菌操作，取少量菌种与染液混匀 无菌操作， 小心盖上盖玻片，吸去多余染液，静置 小心盖上盖玻片，吸去多余染液，静置3min,备 ， 用观察

3.根霉水压片的制作 根霉水压片的制作取一干净载玻片， 取一干净载玻片，滴一滴乳酚油 用接种针挑取少量带孢子的菌种置于染液中 盖上盖玻片， 盖上盖玻片，备用观察