气相色谱法的主要思路是将大肠杆菌经过一系列衍生化处理后，为气相色谱仪的分析研究提供尽可能多的化学组分。顶空气相色谱法主要是用来分析大肠杆菌的污染程度，其主要原理就是利用食品密封系统顶部的微生物来发挥代谢产物CO2，进而对微生物进行分析和鉴定。该方法对食品质量及食品安全评价有重大意义。与上述所提到的传统技术相比，此种方法具有灵敏度高、检测速度快的优点。

高效液相色谱法主要是根据离子配对反相层析的原理来分析核酸。该技术主要是针对DNA片段的分离。DNA链的长度越长，所携带的磷酸基团就越多，就会有更多的TEAA 与之相融合，增加其在柱内停留的时间。因乙睛具有亲水特性，可以通过增加其浓度而达到将DNA分离的目的，在具备一定的变性温度条件下，可通过图谱显示明显的吸收峰。这一技术具有灵敏度高、准确度高、成本低等优点，可以大大提高工作效率。

3.2聚合酶链式反应(PCR)技术

聚合酶联反应(PCR)是通过基因扩增技术来检测菌落的方法，其基本原理是通过放射性同位素如：磷、硫或碳的同位素或其他标记物来标记特异核苷酸片段来制备探测针，用于检测那些难于培养或不能通过人工培养的菌落。就目前的食品检验试验来看，一般将其与氧化酶法相结合，这样更有利于保证检测结果的准确性和可靠性。但就该方法来讲，样品的提纯化处理需要较长的时间，并且对操作人员的专业知识也有较高的要求。

3.3酶联免疫分析法(ELISA)

该方法的基本原理是在不损坏抗原或抗体的免疫活性的条件下提前将其结合到某

种固相载体的表面，进行测定时，将要检验的样品按照一定的程序与结合在固相载体表面的抗原或抗体进行化学反应进而生成抗原或抗体复合物。反应结束后将反应液以外的其他物质经洗剂后去除，然后加入酶反应底物，底物在固相载体上的酶的催化作用下发生变色反应，形成变色产物，最后通过有色物的量来确定单位样品中被检物的含量。由于酶具有较高的催化效率，大大提高了测定的灵敏度。

3.4免疫磁珠技术(IMS)

免疫磁珠技术也是目前比较常见的一种大肠杆菌的分离技术，其主要思路是将抗体偶联在磁性颗粒表面，以磁作为抗体的载体，与样品中的被检物相结合，在磁场的作用下，载有致病微生物的磁性微球向磁极方向移动，进而将大肠杆菌进行分离。与常规检验方法相比，免疫磁珠技术的优点更为突出，它适用于在各种各样的菌种的样本中快速分离出目的微生物。该方法如果与上述的PCR、酶联免疫技术等技术相结合，则会在很大程度上提高检测效率。

3.5基因芯片技术

基因芯片技术起源于20世纪90年代，也称之为DNA微阵列或寡核苷酸阵列。该技术用于检测各种环境或媒介中的微生物。其基本原理是将微生物样品DNA通过PCR 扩增后制备荧光标记探针，固化于支持物表面上，,产生二维DNA探针阵列，然后与芯片上的寡核苷酸点进行杂交，最后通过检测杂交信号来确定检测样品中特定微生物的存在。由于该技术中常采用硅芯片作固相支持物,并且还运用了计算机芯片的制备技术,所以称之为基因芯片技术。

与传统的检测方法相比，基因芯片技术化，具有显著的优点，主要体现在自动化、操作简便快速、特异性强、敏感性高等方面，可以说该技术是食品安全方面的一个重大突破。但是基因芯片技术也存在不足之处：其一，该方法检测中所用到的仪器、设备其费用极其昂贵；其二，检测过程中，基因扩增时容易被污染，进而影响到检测的结果；其三，样品的制备及标记技术较为复杂；其四，该技术的操作对工作人员的专业素质有较高要求。

4、结语