第9节 高效毛细管电泳仪
时间:2025-07-05
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高效液相
第三章 高效液相色谱分析high performance liquid chromatography,HPLC
第九节 高效毛细管电泳仪high performance capillary electrophoresis apparatus
一、高效毛细管电泳仪high performance capillary electrophoresis apparatus 二、仪器流程与主要部件
process and main assembly
电压:0~30kV;
分离柱不涂敷任何固定液;
紫外或激光诱导荧光检测器;
(可检测到:10-19~10-21 mol/L)
1.高压电源
(1)0~30 kV 稳定、连续可调的直流电源;
(2)具有恒压、恒流、恒功率输出;
(3)电场强度程序控制系统;
(4)电压稳定性:0.1%;
(5)电源极性易转换;
2. 毛细管柱
(1)材料:石英:各项性能好;玻璃:光学、机械性能差;
(2)规格:内径20~75μm,外径350~400μm;长度<=1m
3.缓冲液池
化学惰性,机械稳定性好;
4. 检测器
要求:具有极高灵敏度,可柱端检测;
检测器、数据采集与计算机数据处理一体化;
类型 检测限/mol 特点
紫外-可见 10-13~10-15 加二极管阵列,光谱信息
荧光 10-15~10-17 灵敏度高,样品需衍生
激光诱导荧光 10-18~10-20 灵敏度极高,样品需衍生
电导 10-18~10-19 离子灵敏,需专用的装置;
三、毛细管电泳的进样方式 injection method of HPCE
进样量:毛细管长度的1%-2%;纳升级、非常小;
1. 流体力学进样方式
(1)进样端加压
(2)出口端抽真空
(3)虹吸进样
进样体积 Pdπ
128 L4t
2. 电动进样方式
毛细管一端插入样品瓶,加电压;
( eo ef)Vπrct进样量 tL2
高效液相
进样不均:电歧视现象,淌度大的离子比淌度大的进样量大; 离子丢失:淌度大且与电渗流方向相反的离子可能进不去; 特别适合黏度大的试样;
3. 扩散进样 试样通过扩散作用进入分离柱端口处。
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