水体微生物的检测

水体微生物的检测指标

菌落总数(aerobic bacterial count)

是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37℃经24h培养后，所生长的细菌菌落的总数。 检测意义：作为一般性污染的指标，即评价被检样品的微生物污染程度和安全性。水样菌落总数越多，说明水被微生物污染程度越严重，病原微生物存在的可能性越大，但不能说明污染的来源

总大肠菌群(coliform bacteria)

是指一群需氧及兼性厌氧的，37℃生长时能使乳糖发酵，在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。

检测意义：作为粪便污染的指标。水样总大肠菌群数的含量，表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。 水样采集

菌落总数的测定； 总大肠菌群的测定。 采样原则

所采集的样品具有代表性。

采样容器：选择硼硅玻璃瓶和聚乙烯塑料瓶。

不能是新的污染源；不吸收或吸附某些待测组分；不与待测组分发生反应。保证从采样到分析期间，样品各组分的浓度不发生改变。

必须按一般无菌操作的基本要求采集，并保证在运送、贮存过程中不受污染。 自来水水样：先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌，再开放水龙头使水流5 min（经

常用水的水龙头放水1～3min）后，采集水样于无菌锥形瓶，约占瓶容量80%，以便摇匀水样。

水源水水样：选有代表性的地点及可疑地方，一般距水面下10～15cm采样。采样

后，将瓶塞盖好，再从水中取出。 注意事项

严格无菌操作。

做好标记：采得水样后应立即记录水样名称、地点、时间等项目。

从速送检。水样从采集到检验不应超过2h，在0～4℃下保存不应超过24h。

— 平板菌落计数法

（一）生活饮用水 [器材与试剂]

无菌1ml吸管1支/组，无菌平皿3个/组，营养琼脂。

[方法]

水样摇匀20~25次，使细菌分散。

倾注培养：无菌吸取1ml水样分别置于2个空平皿，另一个作空白

对照。再倾注15ml琼脂（约45℃）于平皿中旋转，混匀待琼脂凝固后倒置37℃24h。

菌落计数：用肉眼或放大镜检查，计数平皿内菌落数目。

[结果分析与报告]

计算平均菌落数：

报告方式：菌落总数(cfu/ml)。 cfu：colony forming units

当检样的菌落数为l~100时，按实有数报告；大于100时，采用二

位有效数字报告。

国家标准（GB5749-2006）规定生活饮用水菌落总数每毫升不得超过100个。 （二）水源水

[器材与试剂]

无菌1ml吸管6支/组，无菌10ml吸管1支/组。 无菌平皿9个/组，营养琼脂。

90ml灭菌盐水1瓶（内置适量玻璃珠），9ml灭菌盐水管3支。

[方法]

稀释水样：

无菌吸10ml混匀水样注入90ml灭菌水瓶中,混匀成1:10水样。 取1:10水样1ml注入9ml灭菌试管中混匀成1:100水样。同法稀释

成1:1000, 1:10000水样。

倾注培养：

用1ml无菌吸管吸取2~3个适当浓度的稀释液1ml,分别注入无菌平

皿中，每个稀释度应同时做2个平皿，另取一平皿作空白对照。再做倾注培养(方法同饮用水)。

菌落计数：方法同饮用水。

[结果分析与报告]

计算不同稀释度的平均菌落数： 稀释度的选择和菌落总数报告方式：

首先选择平均菌落在30～300之间者进行计算。 计算方法和报告方式如表1所示。

表1 稀释度选择及菌落总数报告方式

表2 一般水源水中菌落总数与水清洁程度的关系 [注意事项]

菌落总数测定中，应选择合适的稀释度进行。（生活饮用水，国家标准规定

每毫升不得超过100个，因此可以直接吸取1毫升到平板进行培养） 各稀释管、相应平皿做好标记。包括：水样名称、稀释度、时间、小组。 严格无菌操作。进行水样稀释时，每一稀释度均需更换吸管。 倾注时，要注意营养琼脂的温度。

倾入琼脂后要混匀，待琼脂凝固后倒置培养。

实验目的与要求：

（1）学习并掌握水体中细菌总数的检验方法、检验的原理、检验的依据、数据处理和报告方法。

（2） 强化水体细菌总数检验的卫生意义知识。

二、基本原理

本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。 三、器材

牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，灭菌水；

灭菌三角烧瓶，灭菌的带玻璃塞瓶，灭菌培养皿，灭菌吸管，灭菌试管，培养箱等。 四、操作步骤

1．水样的采取

（1）自来水先将自来水龙头用火焰烧灼3分钟灭菌，再开放水龙头使水流5分钟后，以灭菌三角烧瓶接取水样，以待分析。

（2）池水、河水或湖水应取距水面10—15cm的深层水样，先将灭菌的带玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流入瓶中，盛满后，将瓶塞盖好，再从水中取出，最好立即检查，否则需放入冰箱中保存。

2．细菌总数测定 （1）自来水

（a）用灭菌吸管吸取1ml水样，注入灭菌培养皿 …… 此处隐藏：1067字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……