微生物快速检验技术探讨-蔡向荣

时间:2025-07-09

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青岛海博生物生产500多种微生物培养基微生物快速检验技术探讨蔡向荣 青岛高科园海博生物技术有限公司

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青岛海博生物生产500多种微生物培养基微生物检测关键点好的检测方法高质量的培养基或仪器

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青岛海博生物生产500多种微生物培养基微生物检测的基本思路前增菌培养(培养基中不含抑菌剂) 选择性增菌培养或增菌培养 选择性分离培养或分离培养 生化鉴定或血清学鉴定

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青岛海博生物生产500多种微生物培养基微生物快速检测技术定义: 在尽可能短的时间内,检测出目标微生物。 微生物快速检测方法特点: 1、快速:一般在几小时至24小时内; 2、灵敏度高、特异性高; 3、操作和使用尽可能简单;

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青岛海博生物生产500多种微生物培养基选择快速检测方法的依据1、GB/T 4789.32-2002食品卫生微生物学检 验--大肠菌群的快速检测 2、GB/T 5750.12-2006生活饮用水标准 检验 方法微生物指标 3、GB标准和SN标准中使用的测试片方法 以上标准中都规定使用快速检测方法,主 要是指酶底物法。 4、FDA、USDA-FSIS、ISO、AOAC等标准推荐 使用微生快速检测方法

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青岛海博生物生产500多种微生物培养基快速检测方法分类显色培养基法:技术成熟,产品很多。 免疫学方法:产品最多,特异性和敏感性都很 高,但有假阳性存在,阳性结果需要确认。通常 的原理有EIA,ELISA,GLISA,荧光酶免、免疫磁 分离等方法。市场上的产品多,如 bioMeriux,Tecra,Neogen,Biocontrol, Matrix 等。 分子生物学方法:以基因探针检测法和PCR法(包 括常规PCR方法和荧光PCR方法)为主。 基因芯片:研究热点。

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青岛海博生物生产500多种微生物培养基微生物显色培养基方法原理:主要根据微生物能产生特异性的酶,选择 适当的酶底物,使其菌落显现出不同的颜色,与 其它微生物区别开来。 如沙门氏菌具有辛酸酯酶,以4MU-辛酸酯酶为底 物,经沙门氏菌酶解,在紫外灯下观察游离4MU的 荧光,国内已有应用。我们应用β-萘酚辛酯酶为 底物,经沙门氏菌酶解,释出β- 萘酚与固兰作 用出现紫色,反应在纸片上进行,只需5分钟即可 完成沙门氏菌的鉴定。这对食品与环境卫生检验 有重要价值。卡他莫拉菌具有丁酸酯酶,可用丁 酸酯色原底物快速鉴定。大肠埃希氏菌具β-葡萄 糖醛酸酶,但以O157:H7为代表的肠出血性大肠 埃希氏菌(EHEC)却不具此酶,故β-葡萄糖醛酸 酶阴性已成为初步筛查EHEC的重要特征。

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青岛海博生物脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌 A族链球菌 肠球菌 沙门菌 大肠埃希菌 卡他莫拉菌 白色念珠菌 克柔念珠菌 热带念珠菌 新型隐球菌 难辨梭菌 产单核李斯特菌 红斑丹毒丝菌 加德纳菌 金黄色葡萄球菌 腐生,中间,斯氏葡萄球菌 霍乱毒素生产500多种微生物培养基γ谷氨酰转肽酶 羟脯氨肽酶(Hydroxyprolaminopeptidase) 吡咯芳胺酶(PYR) PYR、亮氨酸氨肽酶(LAP) 辛酸酯酶 β葡萄糖醛酸酶 丁酸酯酶 脯氨酸氨肽酶、N-乙酰β-D半乳糖苷酶 酸性磷酸酶 吡咯磷酸酶 酚氧化酶 谷氨酸脱氢酶(GDH)、脯氨酸酶 丙氨酸氨肽酶 N-乙酰葡萄糖醛酸酶 α葡萄糖苷酶 β- N-乙酰葡萄糖胺酶 β半乳糖苷酶 降解辅酶Ⅰ

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SN标准检测方法显色培养基快速检测方法大肠杆菌/大肠菌群显色培 养基 36±1℃培养18-24h LST肉汤36±1℃培养24-48小时44.5±0.5℃水浴箱内 EC肉汤培养24-48h 伊红美蓝(EMB)平板,36±1℃培养24±2h营养琼脂斜面上,36±1℃培养18~24h 色氨酸肉汤 MR-VP培养基 LST肉汤Koser氏枸椽酸盐肉汤

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大肠杆菌常规方法和显色方法比较检测方法检测时间 (包括生化鉴 定)所需培养基和试剂所需成本(人力和物力)GB标准方法 SN标准方法 显色培养基 方法需5-7天 需5-7天10种 8种大约75元左右/每个样品 大约70元左右/每个样品需2-3天5种(其中生化管4 种)大约42元左右/每个样品

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检验检疫行业标准 出口食品沙门氏菌属检验方法 SN 0170-92肉类、蛋品前增菌 直接选择性增菌显色培养基快速检测方法缓冲胨水(BPW)37 ℃ 4h or 20~24h亚硒酸盐胱氨酸(SC) 四硫磺酸盐煌绿(TTB)37 ℃ 24± 2h四硫磺酸盐煌绿(TTB) 亚硒酸盐胱氨酸(SC)42 ℃ 20 ± 2hDHL和显色培养基24~ 37 ℃ 2 8hBSTSI37 ℃&DHL37 ℃(亚利桑那菌琼脂)24~48h& 赖氨酸脱羧酶24~48hTSI37 ℃& 尿素酶24~48h生化试验 结果判定血清学试验 (“O”抗原,“Vi”抗原)

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SN新标准检测方法FB1增菌液,30 ℃ 培养24-26小时 FB2增菌液30 ℃培 养24-26小时 OXA、PALCAM 35 ℃ 培养24-48小时 TSA-YE 35 ℃ 培养24小时 TSB-YE 35 ℃ 培养24小时显色培养基检测方法李斯特氏菌显色培养基 37℃培养24-28小时生化鉴定

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青岛海博大肠杆菌O157显色培养基大肠杆菌O157:H7菌落显紫色,大肠杆菌和大肠菌群菌落 显蓝色,其它菌显蓝色、白色、黄色或无色。

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青岛海博坂崎杆菌显色培养基坂崎杆菌菌落显蓝绿色,其它菌显白色、黄色或无色。

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青岛海博大肠杆菌显色培养基大肠杆菌菌落显蓝绿色,其它菌显白色、黄色或无色。

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