无菌室人员更衣的确认和无菌验证

无菌室人员更衣的确认

我国《规范》(1998 年修订)在“卫生”一章中要求“工作服的选材、式样及穿戴方式应与生产操作和空气洁净度级别要求相适应，并不得混用。无菌工作必须包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻挡人体脱落物。”欧洲GMP 对无菌产品生产的着装要求有严格的规定，参见表2—18。

表2—18 欧洲GMP 对无菌生产的着装要求

洁净度级别着装要求

A、B 级

①面罩应能完全遮住头发、胡须，面罩下沿应藏到领口中去

②灭毒口罩、无尘手套、灭毒或消毒的鞋套

③裤脚塞人鞋套，袖口塞人手套中

④无菌衣不能脱落纤维和颗粒性物质，并能阻挡人体散发的尘粒

C 级

①头发、胡须应全部遮住

②单层或双层裤装，腰部扎紧

③合适的鞋子或鞋套

④工作服不能脱落纤维和颗粒性物质

D 级

①头发、胡须应全部遮住

②一般的防护工作服

③合适的鞋子或鞋套

④有适当措施防止来自洁净室外的污染

注：1．外界衣物不能带到A、B 级的更衣室(应换上工作服后进入)。

2．上述洁净室不得带人手表、化妆品和首饰。因此所有需进入无菌实验室和无菌制造区(包括100 级及10 000 级区域)工作的操作工、机修工、QC／QA 取样人员必须接受更衣程序的确认，并公布合格者的名单，同时规定时效，超过时效必须进行再次确认，以确保进入无菌室的所有人员是“会穿无菌衣”的。有条件的话，QA 部门应摄下每个人的更衣程序并加以保存，作为染菌的研究资料，定期进行检查。

一、建立更衣的标准操作程序

人员进入无菌区先得通过气闸室，但人既不能灭菌、除菌，也不能消毒，以致成为污染无菌环境的主要威胁。无菌的衣服、鞋套、手套、帽子、口罩以及眼镜对所有要进入无菌区的人来说是绝对必需的。由于无菌服饰可能是控制微生物污染的最好办法，所以必须教会人们穿戴服饰的正确办法。更衣的标准操作程序(SOP)必须完备并在任何时候都应坚持。更衣程序可因各单位的具体情况而定。例如，用长凳将更衣室一分为二的穿衣程序一般为：

①把需穿着的无菌服置于长凳上。

②一只脚先套上鞋套，把腿横过长凳，在此之前必须确保鞋套未触及第一间(洁净级别较低的)地面。另一只脚重复此动作。

③先戴头罩然后穿衣，必须注意不能将衣服的任何部分触及地面。拉紧拉链，齐整衣服，

裤脚应覆盖鞋套，袖套须覆盖整个手臂直至手腕，头罩要小心地塞进颈部。

④用口罩遮蔽鼻、口，并缚紧。

⑤在全身镜前检查着装，检查在无菌衣上是否有开口处，按要求作最后整理。

⑥最后戴上无菌手套，手套上部紧缚住袖口。

二、人员的发菌量

分析国外实验资料，可以认为人员的发菌量有以下数据可供参考。

①洁净室内当工作人员穿无菌服时，静止时的发菌量一般为10～300 个／(min ·人)，躯体一般活动时的发

无菌室人员更衣的确认和无菌验证

菌量为150～1000 个／(min ·人)，快步行走时的发菌量为900—2500 个／(min ·人)。

②咳嗽一次的发菌量一般为70～700 个／(min ·人)，喷嚏一次的发菌量一般为4000～60 000 个／(min ·人)。

③穿平常衣服时发菌量为3300～62000 个／(min ·人)。

④无口罩发菌量：有口罩发菌量为(1：7)～(1：14)。

⑤发菌量：发尘量为(1 ： 500)～(1：1000)。

可知洁净室内穿无菌衣人员的静态发菌量一般不超过300 个／(min ·人)，动态发菌量一般不超过1000 个／(min ·人)。

三、更衣的确认程序

1．确认的程序

①每个受训者事先必须先经过无菌操作的培训，如无菌衣穿着的SOP，接触法取样的方法，污染控制和无菌操作技术等。

②进入无菌室前，受训者先要进行更衣的实践。

③管理人员必须向每个受训者解释更衣微生物挑战试验的程序。

④将微生物挑战试验用在3 次更衣程序上。受训者经过3 次更衣练习，直到达到“会穿衣进入无菌室”的程度。

⑤每次挑战性试验用Rodac 直接接触法取样，取样点如下：

——每个手套(5 只手指)；

——胸口处(在拉链中心至少有1 点)；

——口罩；

——帽兜额头处；

——防护眼镜(2 块镜片)；

——靴子与工作裤接口处(左右各1 点)；

——前臂。

2．频率

①每个受训者必须经过3 次更衣试验达标后才能进入无菌室。

②更衣已合格的操作工每年需重复一次更衣试验，尚未进入无菌室的人员每4 个月重复一次。

③当发现合格人员中有违反更衣程序趋向时，须重复l～3 次更衣试验。

3．更衣合格标准

①已证明受训人掌握了更衣程序、污染控制和无菌技术。

②资料和录像显示出受训人3 次更衣试验的程序都是正确的。

③3 次试验的微生物检测结果在合格标准内。参考合格标准如下表所示。采样点参考标准(Rodac 法)／CFU·皿”采样点参考标准(Rodac 法)／CFU·皿”

采样点 CFU·皿 采样点 CFU·皿

手套 ≤3 前额 ≤5

胸口 ≤5 眼镜 ≤10

前臂 ≤5 靴子—裤子接合处 ≤5