酵母菌的计数方法和应用

时间：2025-02-23

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羲口邵江樵算出含菌数。

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计数原理

定，察在一定的容积中酵母菌的个体数目，后推观然

酵母菌是一种在适宜条件下进行出芽生殖的

血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微晰可见。酵母菌的生长周期短，殖速度快，实验生物的一种仪器。在血球计数板的方格网上刻有 9增在只有中间的一个大方格为计数室，微生供室条件下，液体培养基培养酵母菌，以观察酵个大方格，用可单细胞真核生物，体较大，在高倍显微镜下清个能物计数用。计数室刻度有 2种：种是 2一 5中格 x 6 1小格，另一种为 1而 6中格 x 5小格 (下图 )它们 2如，母菌逐个计数是非常网难的，以采用抽样检测法可母菌种群数量随时问变化的情况。对培养液中的酵进行估算。利用血球计数板在显微镜下直接进行测都是由 40小格组成。 0个

中间的小方格网是计数室

2 5中格 x 6小格计数板 1

l 6中格 x 5小格计数板 2

每个计数室边长为 1 m,每个计数室面积为 m则 1 mz盖上盖玻片后，玻片与盖玻片之间高度为。 m载 01 .mm。所以每个计数室的体积为 01 m。 .m 计数时，果使用 1格x 5格规格的计数如 6中 2小室，按对角线位，左 f、上、下、下 4个中要取：右左右格 ( 10小格 )酵母菌数。如果规格为 2即 0的 5中格 X

即载玻片与盖玻片之间高度=所加菌液的厚度。1 0 mL/ 0m __每个小格的面积。 B K 2 4 K—一 5中的

“ 5——计数室有 2 2” 5个中格。

2 .从试管中吸取出培养液进行计数之前，建议将试管轻轻震荡几次。这是为什么？轻轻震荡几次是为了使试管中酵母菌分布均匀，少实验误差，实验更加准确。减使 3片时为什么不直接向计数室滴加酵母液？ .制因为滴管的 1体积远大于计数室的 0 m,滴 .m直 1接滴加会使盖玻片浮起，以需要摇匀稀释的酵母所菌液，无菌滴管吸取少量菌液，盖片边缘滴一用从小滴，菌液自行渗

入计数室。注意：数室内不能使计

1格的计数板，了取其 4个对角方位外，需 6小除还再数中央的一个中格 f 8小方格 )母菌数。注即 0的酵意：数时中格的边界足双线，以内线为边界。每计要毫升培养液中酵母菌总数=小格平均菌数 x O x每 4Ol4菌液稀释的倍数。 0X二、取样、片和观察中的几个要求制

1看懂血球计数板上板面数值的含义 .O. m m 1

有气泡，若有气泡则重新制片。

4 .发现视野内酵母菌数目太多，挤成一堆，无XB— K 2 5

法进行计数，进行怎样的处理后，能进行精确应才地计数？

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l 同J

用 1 0释法处理。取一试管，入 9 L的无/稀 1另加 m菌水；分振荡培养液后，取 1充量 mL培养液；入 9加 m L无菌水的试管中，全混合后，其稀释 1。完使 0倍稀释后， 01 L进行计数。依次进行稀释到每小取 .m格 3 5个为宜 f所计数的几个中格内的酵母细胞~或

A.球计数板的正面血 01——两嵴的表面比两个平台的表面高， . mm 5 6

生物。总数小于 30个1 0。5 .对于带芽体的酵母怎样计数？吹风机吹干，用 9%的乙醇或无水乙醇、酮等或 5丙有机溶剂脱水，其干燥。使三、应用和巩固

活酵母有出芽生殖现象，芽体达到母细胞大若小的一半时，可作为 2个菌体计数，芽体小于即若母细胞一半时为 1酵母细胞。个 6于正好位于中格边框的个体怎样计数？ .对按左上原则，位于中格边框上的酵母菌一般即只计上方线及左方线上的菌体。 7 .血球计数板使用后如何清洗？血球计数板使用后，用自来水浸泡，后用先然自来水冲洗，勿用硬物洗刷，后自行晾干或用切洗

镛

利用计数板可在显微镜下对微生

物细胞进行直接计数。计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻片，样品就滴在计数室内。计数室由 2 x1= 0 5 6 4 0个小室组成，容纳液体的总体积为

01 t。将 l .mi现 t m

L酵母菌样品加 9mL无菌水稀释，用无菌吸管吸取少许使其自行渗入计数室，上盖盖玻片并用滤纸吸去多余菌液。

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盖玻片

计算板计数室di i

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现观察到图中所示 ab cd e 5个中格 8、、、、 0个小室内共有酵母菌 4 0个，上述 1 L酵母茵样品 4则 m

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