细胞生物学实验报告

时间：2025-07-07

实验一：细胞的形态观察及其大小测量

一、实验目的：

1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察，了解细胞的形态及其显微结构； 2、学习显微测量的方法，对细胞的大小有一直观认识。

二、实验材料和仪器：

小白鼠肝细胞切片；鸡血红细胞；蚕豆叶片横切片；

普通光学显微镜；目镜测微尺；镜台测微尺；载玻片；盖玻片。

三、实验步骤：

(一)细胞形态观察

l、动物细胞的观察

（1）人肝细胞切片：在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。

（2）鸡血细胞涂片的观察：观察血细胞的组成；红细胞、白细胞、血小板的形态特点。

2、植物细胞的观察

（1）取蚕豆叶片横切片的观察：注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。（二）细胞的大小和测量

1、卸下目镜的上透镜，将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上，再旋上目镜

的上透镜。

2、将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好，使测微尺分度位于视野中央。调焦至能看清镜台测微尺的分度。

3、小心移动镜台测微尺和转动目镜测微尺(如目镜测微尺分度模糊，可转动目镜上透镜进行调焦)，使两尺左边的一直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重合的直线。

4、记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。按下式计算目镜测微尺每格等于多少μm：

镜台测微尺的格数

目镜测微尺每格的微米数=————————— × 10

目镜测微尺的格数

四、实验结果：

1、目镜校正：40倍显微镜目镜测微尺每格的微米数=17/70=0.24

2、细胞大小的测量：

五、作业与思考：

1、血细胞按含量高低，主要含有：红细胞，白细胞，血小板。

白细胞最大，红细胞次之，血小板最小。红细胞：主要的功能是运送氧。白细胞：主要扮演了免疫的角色，当病菌侵入人体时，白细胞能穿过毛细血管壁，集中到病菌入侵部位，将病菌包围，吞噬。血小板：止血过程中起着重要作用。细胞形态见下图。 2、植物细胞一般比动物细胞大一些。形态图见下。

3、在不同放大倍数下，测定的细胞大小基本一致，但有一些偏差。放大倍数越大，在视野中同等实际距离下的两点视野距离更大，而更容易测量准确。

实验二：PAS（Periodic Acid Schiff）反

应显示糖原和其它多糖物质

一、实验目的

1、熟悉PAS法原理及操作步骤；

2、观察PAS反应的染色结果，并观察多糖在组织细胞中的分布。

二、实验原理

多糖是由多个单糖分子缩合脱水而生成的化合物。一些不溶性的多糖构成植物和动物的骨架，如植物的纤维素和动物的甲壳素，一般称为结构多糖。另一些多糖在生物体内作为能量贮存，如淀粉（植物）和糖元（动物），在需要时可以通过生物体内酶系统的作用分解，释放出单糖。

三、实验用品：

过碘酸酒精溶液、Schiff试剂、亚硫酸水溶液、苏木精溶液、二甲苯、100%乙醇+二甲苯（1：1）。

梯度乙醇溶液：100％，95％，90％，80％，70％，50％各两份，一份用于脱腊复水，一份用于脱水。

载玻片、盖玻片、染色缸、显微镜、小烧杯、胶头滴管、镊子、刀片、土豆；小鼠肝细胞石蜡切片。

四、实验步骤:

（一）土豆切片的观察

制作土豆徒手切片→过碘酸处理15～30min→70%乙醇1min→ schiff 试剂15min → 亚硫酸水漂洗2～3次 → 蒸馏水漂洗 → 镜检（二）小鼠肝细胞切片的观察

取鼠肝石蜡切片 → 二甲苯脱蜡约 10min → 二甲苯+100%乙醇（3 min）→梯度乙醇脱二甲苯，在各浓度乙醇（100％，95％，90％，80％，70％，50％）中约 2～3 min → 过碘酸氧化 15～30 min →蒸馏水漂洗 → Schiff 试剂 15～30 min →亚硫酸水漂洗 2～3 次 →蒸馏水漂洗 → 苏木精染色 10 min → 流水冲洗→梯度乙醇脱水（50％，70％，80％，90％，95％，100％），在各乙醇浓度中约 2～3 min →100%乙醇+二甲苯 2～3 min→二甲苯适度透明 → 指甲油封片 → 镜检

五、实验结果：

六、作业与思考:

1、描述土豆切片和鼠肝切片中糖原分布特点。

土豆切片中，多糖多在细胞质液泡中。鼠肝切片中，多糖多在靠近核的区域。 2、影响 PAS 反应染色效果的关键步骤是什么？

Camey固定液固定；Schiff 染色液染色；对分色的控制。 3、如何制作徒手切片？应注意什么才能得到薄而均匀的切片？

应注意需要连续快速地切下多片薄片，并从中选出较好的切片。

土豆切片观察鼠肝切片观察

实验三：叶绿体的分离与荧光观察

一、实验目的：

1、通过植物细胞叶绿体的分离,了解细胞器分离的一般原理和方法。 2、观察叶绿体的自发荧光和次生荧光,并熟悉荧光显微镜的使用方法。

二、实验原理：

将组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是分离细胞器的常用方法。将匀浆液1000r/min的条件下离心2min, 以去除其中的组织残渣和未被破碎的完整细胞。然后，在3000r/min的条件下离心5min，即可获得沉淀的叶绿体(混有部分细胞核)。