生物分离工程

§8 液相色谱

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2021--35色谱原理在色谱程中，过配分系大的溶质在固数定相上在的存率大概随，流相动动移速小度由。此，溶质间由之于动移速度不的而同到分离。得81..2谱分色-类动流相类 分

液相谱色气相色谱超临色界谱

洗脱曲线7

8色谱类分-相分固 类操作式形

纸 谱：色用纸滤液体做载的体，点样，后流动相用展开以达到，分鉴离的定的目。薄色层谱将适当粒度的：附剂吸铺成层，以纸薄色类谱的方法似进行质的物分离和鉴。定柱色谱将：定固相于柱装内，样品使一沿个向移动而达到方离。分纸谱色

薄色谱

层9

纸色谱

薄色谱层10

色柱谱分法离ColunmChr omaotgaphyr11

212

20215-3-

色分类-谱操作压分力 类

低压 液色谱相<(0.5 MPa中)压液相色(0.谱-450 M.P) a高液相色压谱(4>.0M P)a

大模规制分备常用离压低或中液相色谱压

柱。谱分离法色1 134

谱分色-流类相流动方式动分类向流轴色径谱向流色谱色谱类分-离操分方式作分类

洗色谱：脱液中的溶质料根其据在固定相和流动相间配分为行的同，不在出被展开形口相互分成离的谱峰。色迎色头谱：似类定床吸固附操，作量料大液续输入连色到柱谱中直，到在口出发处生质穿溶透。换展开：置置换将料剂的溶液质按与其固的亲和力的相不而同次序换置。

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色谱类分-机理类

分分类-理物化学性间的差异质分子极性子大小分分子状形离亲子力和分子亲力吸和附力能反相色谱胶过滤色谱凝：利用些凝某对胶于同不子分大的组分小阻滞作用不同的。离子换交谱色利用：同组分对离不子交换亲和力剂的不同。附吸谱色：利用吸剂附表对不面同组吸分附能性差异的。配分色：利谱不用同分组流在动和相固定之相的间分系数的不配。反同色相:利用溶谱极质的差别;性疏性水互相用色谱作：白质蛋与疏水吸附剂之间的性疏弱水性互作相的用差;别亲和色：生物谱亲和作用;71 凝胶滤过谱色子交离换谱色亲和色谱吸色附谱81

3

01225-3-色谱法是一相组分关方离的法总，称它的理机多种多样是的，不但哪管种法都方必须括包两个相。相是固一相定，通为常面表很积的大多或性固体孔；一相另流动相是是液体或，气。体当动流相过固流定相时，于由物质两相间的在分配况情同，不经多次差别分过配达到分离，或者而，易说配分固定相于的物移质动速度，易慢配于分动相中流的质物动移速度，快因而得逐步到分。离19“色法的本质谱是使一种液体均匀地过渗个相当细碎的一质物柱的，这些体物质过通某过种有程择地选留阻液体了内某的组分些。”—马丁—A.(J. P . Martni)(英)

028..1 4色分离法特点谱常用色的技术有：凝谱排胶阻谱、色离交换子色谱、亲色和等谱特点：1()纯倍化数高(2 )操规作模小，大放难困( )3成本高较适用，于价昂贵的产品

格.1.5 8谱设备色色谱的柱设备色谱:、柱动泵(蠕流泵)、恒外紫检仪、部分收集器测。21

22

谱色设色备装谱置：

度混梯和器蠕动泵谱色柱监测仪收集器录记仪23记录仪低温色谱柜42

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12-0-35

8.色谱过2理程模论—型语术Vt—整个床的柱体 V积0—外水积，体胶凝床中柱胶凝颗粒间之液的相体积 V i—内体积，柱床中水凝胶颗粒部所含内液相体的积 Vg—凝胶之体网格固分所占的体成 积

8.2色谱过程论模理—型概阻滞念因子Rf滞阻子是因在色系统中溶谱质移的动度和标速准物与(固定没有亲和相力流的动,相Kd 0)=的迁移率之比R f溶质迁移的距离流相动色谱系统在的迁移距离中tV= 0 V+ Vi V+25g

意义其在体于现某种溶一质与定相固间之亲和的力大小。62

色柱谱，中使溶从质柱中出所需流动相流体，为积脱洗体积,使当用品样体的很少时积(与洗脱，体比积可以较忽略不计，)在洗脱中图从，样加峰到位置顶用洗所液体积为V脱e;谱柱中，使溶质从柱色中流所需出时的，间为

洗脱间时；不的溶同质，于和固由定相亲和的不同力，洗脱积也有体所差异。

质溶洗的时脱(保留时间间t,)和R洗体积(脱保留体，积V)是反R应样在柱子中的品保或留滞能力阻，是谱色程过的基本热力学数参之一.8

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谱过程色理论模型平-衡型模型模设整个色谱假柱不中在存传阻力质分，配衡瞬平完间;成 流相的流动为动平流 推色过程理谱论模型平模衡型

质在溶谱色中移柱动度：洗速脱间时:脱洗体:tR积

vz ud d t1 F ' f c m

LL 1 Ff ' cm Ff 1 'c m v u

模 描型述据根设假1分配等：式温V R V0 F1f cm'F 1

c

VR V0 m V(t V0 )

sc f c m m cc c 1 s u 0m t t z29

c

V 0柱的空体积，隙 V t柱的充体填积，ε色c柱谱空隙

率根据假2设微：分料衡物算程方

型特模：点式形简单信息量少，粗，描述，略能不正表达实确际程过不同浓度溶中质的脱洗间时体或。积可于解用一些释本色基现象。 30谱5

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理-板模论型 理论模板tR

模型型假设质的溶分平配衡能不间完瞬，需成一要定柱高，的在此柱即高内溶在质两相间到达次一衡平。溶将达到质一分配平衡的次谱柱段称为色个理一板论t(ehrotecal plitea),色谱 …… 此处隐藏：10164字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……