猪繁殖与呼吸综合征病毒NX-1株ORF5,ORF7基因的克隆

为了从分子水平了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5和ORF7基因的特征,并为PRRSV的遗传进化和分子变异研究提供资料。对宁夏地区流行的PRRSV进行采样分析,运用RT-PCR技术分别扩增了PRRSV NX-1/2008毒株囊膜蛋白基因ORF5与衣壳蛋白基因ORF7,并对其进行了克隆,随后利用DNAS-TAR生物软件进行了同源性比对和进化分析。结果显示,PRRSV NX-1/2008毒株的ORF5,ORF7基因均与JXa-1/2007

浙江农业学报 At gi h re hj nes 2 4:4 4 3 2 1 e A r u ua ea gni2 ( )4 8~ 5 .0 0 a c Z i s

猪繁殖与呼吸综合征病毒 N 1株 O F O F X一 R 5, R 7基因的克隆杜平刘学荣黄银君贺延玉牟克斌，,,,’(中农威特生物科技股份有限公司，肃兰州 7 04 2肃农业大学研究测试中心，肃兰州 70 7 ) 甘 30 6;甘甘 30 0

摘

要：了从分子水平了解猪繁殖与呼吸综合征病毒 ( R S O F为 P R V) R 5和 O F R 7基因的特征，为 P R V的并 RS

遗传进化和分子变异研究提供资料。对宁夏地区流行的 P R V进行采样分析， R S运用 R—C TP R技术分别扩增了 P R V N 120 R S X一 0 8毒株囊膜蛋白基因 O F/ R 5与衣壳蛋白基因 O F, R 7并对其进行了克隆，随后利用 D A— N S T R生物软件进行了同源性比对和进化分析。结果显示，R S X 12 0 A P R V N/ 0 8毒株的 O F O F R 5, R 7基因均与 J a12 0高致病性毒株高度同源， R 7的氨基酸同源性则达到了 10 X一 07等/ OF 0%。与空间距离较远的 J a1 X一/ 20 07毒株相比， X一株的 O F N 1 R 5基因在中和抗体决定区 16位上发生突变，与相距较近的 H B 120, 9而 U一/ 0 6 C 1/0 1 H一a20等毒株相比较，则无此突变； C 1/ 0 1与 H一a2 0毒株相比， P G 5蛋白的免疫原性核心位点 B3 9位的 F —I在诱导中和抗体起重要作用的 3, 3位糖基化位点 N s同时，—,诱骗位点 A(0~3 3 8氨基酸) 3,3和 3的 23 5

位氨基酸都发生了突变。N . X 1株的 O F R 7基因与l内 C 1/ 0 1玉 l H一a20等低致病性毒株问的突变有 6%位于抗 9原决定区，其中有 5%是高致病性毒株的主动突变。研究表明，离的 P R V高致病性毒株与低致病性而 6分 R S

毒株的抗原性在基因组上有较大范围的变异，且这种变异可能还主要位于免疫决定区。 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒； R 7因； R 5基因； TP R OF基 OF R .C中图分类号： 5 . 8 Q 75 S8 82; 8文献标识码： A文章编号：04—12 (0 0

0 0 4—0 10 54 2 1 )4— 4 8 6

Cl n ng a d a a y i fPo cner pr du tv n epia o y s nd o iu o i n n l sso r i e o ci e a d r s r t r y r me vr s oRF5 a d ORF7 g n fNX- t a n’ n e e0 1 sr i

D i LU X etn HU N i- n, a—u,MU K—ig’ U Pn, I u— g, A G Y nj HeY hy g o u ebn ( C iaA r utr Vt i r i o yS i c a d Tc n l y C ro t n L nh u7 0 4 C ia Is u e tl’ hn g i l e e r a yB o g c ne n eh o g o r i, a z o 3 0 6, hn; nt m na c u en l e o p ao r

Rsac e r e h& A ayi Cne, as gi l rl n e i, a zo 3 00 h a n l s et G nu r u ua i rt L nh u70 7,C i ) s r A ct U v sy nAbsr c t a t￣I r e o u e sa d e ei ha a t r fORF n ORF7 e e o cn e o u tv n epiatr n o d rt nd r tn g n tc c rc es o 5 a d g n fPorie rpr d cie a d rs r oy

s do ev u( R S y rm i s P R V)a t oeua vl adpoieif m t nf eei m tinadvrseou o e n r th m lcl l e, n r d o ai r nt ua o n i vltnr— e re v n r o og c t u isac e r h,P S s mp e o Ni g i r ol ce n F RR V a l sf m n x awe ec l t d a d OR 5,O 7 g n fP S e e co e y rv re t n r e RF e e o RR V w r ln d b e es a— r

sr t n p lmea ec an ra t n( T—CR)meh d,te h i h mooy ain nsa de ouina ayi w r ei i oy rs h i eci po o R P to h nter o lg l me t n v lt n lss ee g oc rid o tu ig D ar

e u sn NAS AR bo o y sfw r .T e h mo o y a a y i a te n ce t e a d a n cd l v l id c— T il g ot a e h o l g n l s t h u loi n mio a i e es n ia s dtd t a e h tORF5,ORF7 e e o g n fPRRSV NX一/ 00 tan wee hg y ho lg u o t e ih y pah g n c PRRS 1 2 8 sr i r ihl moo o s t h hg l t o e i V

sri Xa 1 2 0 tan J一/ 0 7,e p cal RF e e,w o eh moo a b u 0% .Th RF e e o s eil O 7g n y h s o lg w s a o t1 0 y e O 5 g n fNX一/ 0 8 s an 1 2 0 t i r h d a d t tt n w t Xa 1 2 0 n n u r l ai n a t o y d tr n i 9 mi oa i .T es a ed sa c e a o ai i J一/ 0 7 i e t i t n i d ee mi est 1 6 a n cd h p c i n eb— mu o h az o b e t t e n N 1 2 0 tan a d J一/ 0 7 w sb g e a h t ew e w e X/ 0 8 sri n Xa 1 2 0 a ig rt n ta t e n NX一， 0 8 a d HUB 1 2 0 h b 1 2 0 n /一/ 0 6,a ela X一 sw l s N 1 0 a /2 08 nd CH./ 01 ta n.S hsm ua in d d n to c ra n he . Co 1 20 sr i a O t i tto i o c u mo g t m mpae t rd wi CH一/2 01sr i h 1 a 0 tan,t e h i mmu g ni o e B ieo no e c c r st fNX一/2 8 mu ae t3 a n cd.a he mu ain wa o I Me n ie,t 1 00 tt d a 9 mi o a i nd t t to s F t . a whl he33

收稿日期：0 9一O O 20 9一 4

作者简介：杜平( 9 8一),, 17男硕士，主要从事动物病毒病预防控制和免疫学诊断技术研究。T l19 9 39 0 E m i w s mby p

5@ e:3 102 1; - al et od5 5: esn . O 1 ia Cn.

通讯作者，克斌，, i mu b cvtem牟 Ema: k@ hs.o l