实验6：a-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测

定义：含有酶的制品

分类：液体酶制剂、固体酶制剂酶的生产： ①提取法 ②发酵法 (通过微生物发酵获得所需要的酶)

优点：催化效率高、低能耗、低污染

缺点：易失活、难回收,不能被再次利用、难分离

固定化酶：就是将水溶性的酶用物理或化学的方法 固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活

性的制剂。

定义：即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不 溶于水的载体上) 固定化酶技术的优点： (1)使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；

(2)固定在载体上的酶可以被反复利用。

吸附法、 交联法、 包埋法、 共价偶连法

实验原理：用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上， 一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉 水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红 色表明水解产物糊精生成α-淀粉酶

淀粉

糊精遇碘显红色

β淀粉酶

麦芽糖遇碘不显色

糖化淀粉酶

葡萄糖

遇碘显蓝色 枯草杆菌

淀粉 5ml注射器

a-淀粉酶的固定化可溶性淀粉溶液 KI-I2溶液

反应柱 固定化酶

筛板 气门心 夹子

收集流出液，鉴定

1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶? 可在试管中加入1ml可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流出 液，保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色，则流出液中 没有淀粉酶了。

2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途? 可以在高温下使淀粉快速水解，而且酶不会因高温上而失 活，所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应 中使用。

直接使用酶和固定化酶的优缺点类型 优点 不足

直接 使用酶

催化效率高 低耗能 低污染酶既能与反应物接 触，又能与产物分 离，同时，固定在 载体上的酶还可以 被反复利用

对环境条件非常敏感，容易 失活；溶液中的酶很难回收， 不能被再次利用，提高了生 产成本；反应后酶会混在产 物中，难分离在生产实践中，很多产物 的形成都通过一系列的酶 促反应才能得到的 难以一次性固定化多种酶

固定 化酶