工程量快速计算方法

正相高效液相色谱法测定人血浆中的氢氯噻嗪及药动学研究
赵飞浪 罗楠 袁倚盛 王平1(南京210002南京军区南京总医院中心仪器分析科;1济南250022解放军济南医学高等
专科学校实验中心)
摘要 目的:建立正相高效液相色谱法测定人血浆中的氢氯噻嗪(HCTZ)浓度,研究正常人po后的药动学。方法:
色谱柱采用YWG-SiO2柱,以氯仿-甲醇-冰乙酸(500∶50∶6)为流动相,紫外λ/nm 272检测。血浆样品在酸性条件
下用乙酸乙酯提取吹干浓缩后进样。对10名健康志愿者po复方卡托普利片(含HCTZ 18 mg)后不同时间的血药
浓度进行测定。结果:方法的平均回收率为94.7%。血浆最低检测限5 ng/ml。正常人体内HCTZ消除相平均T1/2
为2.8 h;TPK为2.5 h;cmax为97 ng/ml。结论:方法能满足HCTZ血药浓度监测和药动学研究的需要。
关键词 氢氯噻嗪;正相高效液相色谱法;药动学
Determination of hydrochlorothiazide in human plasma by NP-HPLC and its pharmacokinetics
Zhao Feilang(Zhao FL),Luo Nan(Lao N),Yuan Yisheng(Yuan YH),et al(Department of Instrumen-
tal Analysis,Nanjing General Hospital,Nanjing Military Command,Nanjing210002)
ABSTRACT OBJECTIVE:To determine concentration of hydrochlorothiazide(HCTZ) in human plasma with NP-
HPLC,and study pharmacokinetics of the drug following a single oral dose in normal subjects.METHOD:The ana-
lytical column was packed with YWG-SiO2.The mobile phase consisted of chloroform-methanol-acetic acid(500∶
50∶6),and detected atλ/nm 272.Hydrochlorothiazide in plasma sample was extracted by ethyl acetate.RESULTS:
The mean recovery was 94.7%,and minimum detectable concentration was 5 ng/ml.The mean half-life of elimina-
tion was 2.8 h,a peak plasma level was reached at 2.5 h,and the meancmax97 ng/ml in ten healthy volunteers after
oral administration of 18 mg HCTZ.CONCLUSION:The method is suitable for the determination of HCTZ concen-
tration in human plasma and for the study of pharmacokinetics.
KEY WORDS hydrochorothiazide,NP-HPLC,pharmacokinetics
氢氯噻嗪(hydrochlorothiazide,HCTZ)是
一种强利尿药,临床上广泛应用于治疗心血管
系统的疾病。因其血药浓度很低,测定较困难,
国外已有报道用薄层层析法,光谱法,气相色谱
法[1],但反相高效液相色谱法是最常用的方
法[2,3]。本文采用正相高效液相色谱法测定血浆
中的HCTZ浓度,方法简便快速。通过对10名
健康志愿者poHCTZ后的药动学研究显示,所
求得的药动学参数和血药浓度均与文献[2]基本
相符。适用于临床药动学和药效学研究。
1 材料与
方法
1.1 仪器与试剂
450型高压泵和UV-200型紫外分光检测
器(南京分析仪器厂);Type 3066型记录仪(日
本岛津)。氢氯噻嗪对照品(广东汕头金石制药
总厂),复方卡托普利片(江苏常州制药厂,批
号:N940621),乙吗噻嗪(内标,中国药科大
学),其余试

工程量快速计算方法

剂均为分析纯级。
1.2 色谱条件
YWG-SiO24.0 mm×300 mm,5μm不锈
钢色谱柱(淮阴精细化工研究所);流动相为氯
仿-甲醇-冰乙酸(500∶50∶6);流速1. 2
ml/min;紫外λ/nm 272;检测灵敏度0. 01
AUFS×0.25 mV/cm。
·482·Chin Pharm J,1996 August,Vol.31 No.8 中国药学杂志1996年8月第31卷第8期1.3 血浆样品的处理与测定
1.3.1 血浆样品的预处理:取1.0 ml血浆于
具塞试管中,加入1 mol/L磷酸0.5 ml;摇匀,
加入5.0 ml乙酸乙酯(内含200 ng内标),振
荡提取1 min,离心10 min(2 500 r/min),取上
层有机层4 ml,70℃下空气流吹干,残渣用100
μl流动相溶解,进样20μl。
1.3.2 标准曲线及色谱条件:准确配制浓度为
10,20,40,80,160,320 ng/ml的血浆对照样
品,经样品预处理项所述处理及色谱分离,计算
样品峰与内标峰高的比值,此值与样品浓度呈
线性关系,回归方程为c=140.2H/Hi-
16.5,H:HCTZ峰高,Hi:内标峰高r=0.998。
最低检测浓度为5 ng/ml。
空白血浆及给药后血浆HCTZ色谱图见
图1。
图1 血浆样品色谱图
a-空白血浆;b-给药后血浆;1-乙吗噻嗪;TR=5.3 min;2
-血浆中杂峰;3-HCTZ,TR=7.8 min
1.3.3 提取回收率:于空白血浆中加入40
ng/ml和160 ng/ml的HCTZ,按样品处理方
法处理进样,测得的峰高与同浓度未经处理的
对照品峰高的比即为其回收率。结果HCTZ的
平均回收率为94.7%。
1.3.4 精密度试验:配制含HCTZ 40,160
ng/ml 2个浓度的血浆样品7份,同日处理进
行测定计算日内误差,连续5 d测定算出日间
误差。结果日内RSD不大于8.6%(n=7),日
间RSD不大于10.7%(n=5)。
1.4 药动学研究
1.4.1 实验对象:健康男性志愿者10名,年龄
22.9±0.7岁,体重59.7±8.7 kg,均经体检证
实肝、心、肾功能正常,试验前1周未服任何药
物。受试时禁烟、禁酒并统一伙食。
1.4.2 给药剂量、方式及血样采集:受试者晨
起空腹一次po复方卡托普利片剂3片(每片含
卡托普利10 mg,HCTZ 6 mg),于服药后0.5,
1,1.5,2,2.5,3,4,6,8,10 h取血,肝素抗凝,
离心后分离血浆,于-20℃冰箱保存。
1.4.3 样品测定及数据处理:按样品处理项下
处理并测定血浆中HCTZ含量,所得数据用
PKBP-N1药动学程序处理。
2 结 果
10名健康受试者po复方卡托普利片(含
HCTZ 18 mg)后,不同时间血药浓度均值见表
1。用PKBP-N1药动学程序对10名受试者药-
时数据分别进行处理,其药 …… 此处隐藏：3440字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……