实验一：细胞凝集反应 和细胞膜的渗透性

细胞生物学

实验一 细胞凝集反应 实验二细胞膜的渗透性

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【课前预习】 1.土豆凝集素的本质及其使红细胞凝集的 原理？ 2.在等渗溶液中细胞一定能维持正常形态 吗？ 3.预测红细胞在各种溶液中的溶血速度？

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一、实验目的 1 了解细胞膜的表面结构； 2了解细胞糖被的特点和功能，了解植物凝 集素的作用 3了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞 的速度

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二、实验的原理 1. 细胞凝集反应

细胞膜表面的有分支状糖外被，细胞间的联系、细胞的生 长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支 状糖分子有关。凝集素(lectin)是一类含糖并能与糖分 子专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的 作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连 接，在细胞表面间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补 的糖可以抑制细胞的凝集。

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2. 细胞膜的渗透性 在低渗液中，红细胞很快吸水胀裂，称为 溶血。在等渗液中，由于有些溶质会进入 红细胞内、引起细胞渗透压升高，细胞也 ， 会吸水胀裂，由于各种物质透入细胞的速 度不同，溶血的时间不同

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三、实验用品 1. 器材: 显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、10ml移液管、试管、 试管架 2. 材料: 土豆块茎 3. 试剂: 2%鸭血红细胞、抗凝血剂、PBS、土豆块茎、0.85 0.85%生理盐水、

2%鸡红细胞、PBS缓冲液、Alsever溶液、0.17M氯化钠、0.17M氯 化铵、0.17M醋酸胺、0.17M硝酸钠、0.17M草酸铵、0.17M硫酸钠、 0.17M葡萄糖、0.17M甘油、0.17M乙醇、0.17M丙酮

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四、实验步骤

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(一) 细胞凝集反应 一 1. 2%鸡血红细胞悬液制备 新鲜鸡血加抗凝剂，生理盐水洗5次，每次2000r/min,离 心5min,按红细胞压积用生理盐水配成2%鸡血红细胞悬 液。 2. 土豆凝集素制备 土豆2克，加10ml PBS,浸泡2h。– 土豆凝集素1滴、2%鸡血红细胞液1滴。 – 载玻片上混匀，静置20min。

3. 细胞凝集反应

4. 对照– PBS1滴、2%鸡血红细胞液1滴。

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(二)细胞膜的渗透性 1. 低渗溶液 试管一支：– 鸡血红细胞液1ml; – 蒸馏水10ml; – 结果溶血，溶液变透明。

2. 等渗溶液 – 0.17M氯化钠、0.17M氯化铵、0.17M醋 酸胺、0.17M硝酸钠、0.17M草酸铵、 0.17M硫酸钠、0.17M葡萄糖、0.17M甘 油、0.17M乙醇、0.17M丙酮

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未溶血

溶血

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【实验结果】

1.土豆凝集素能使鸡红细胞凝集，PBS对 照液中红细胞分散均匀

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未凝血

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凝血

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2.细胞膜渗透性实验结果比较和分 析

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【实验报告】 1.简图表示凝集素使血细胞凝集原理 2.怎样根据细胞膜渗透性实验结果分析确

定物质进入细胞的速度？物质进入细胞的 快慢有什么规律？