miRNA_21对其靶基因PTEN在前列腺癌中表达调控机制
发布时间:2021-06-05
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现代预防医学2013年第40卷第6期ModernPreventiveMedicine,2013,Vol.40,NO.6
·实验技术及其应用·
miRNA-21对其靶基因PTEN在前列腺癌中表达调控机制的研究
肖黎1,金艳阳2,佟明2
(1.辽宁医学院,辽宁锦州121001;2.辽宁医学院附属第一医院泌尿外科)
摘要:目的观察前列腺癌组织和细胞中miRNA-21和PTEN的表达情况,探讨miRNA-21对PTEN的调控。方法应
用实时荧光定量PCR和Westernblot检测正常前列腺组织、前列腺癌组织、非依赖性前列腺癌PC-3细胞中miRNA-21和PTEN的mRNA表和蛋白质表达水平。在前列腺癌PC-3细胞中通过转染miRNA-21inhibitor成功抑制MiRNA-21表达后,实时荧光定量PCR和Westernblot检测PC-3细胞中PTEN表达水平。结果对表达量为(0.421±0.166),明显高于正常前列腺组织(0.033±0.018)
miRNA-21在前列腺癌组织中的相
(t=6.6,P﹤0.05)。miRNA-21inhibitor转染
PC3细胞后miRNA-21在空白组、转染组和阴性对照组的相对表达量分别为(0.516±0.213)、(0.117±0.044)、(0.392±0.171),转染组与空白组及阴性对照组比较差异有统学意义(F=13.1,q=7.05、4.89,P﹤0.05)。PTENmR-NA在正常前列腺组织、前列腺癌组织的相对表达量分别为(1.534±0.385)、(0.376±0.232),正常前列腺组织高于前列腺癌组织差异有统计学意义(t=5.8,P﹤0.05);PTEN蛋白在正常前列腺组织、前列腺癌组织中的相对表达量分别为(2.010±0.386)和(0.571±0.143),差异有统计学意义(t=12.3,P﹤0.05)。miRNA-21inhibitor转染PC-3细胞后,PTENmRNA在空白组、转染组和阴性对照组组织中的表达差异不显著,但其蛋白的相对表达量分别为(0.399±0.185)、(0.826±0.197)、(0.442±0.149),转染组与空白组及阴性对照组比较差异有统学意义(F=13.9,q=4.79、4.2,P﹤0.05)。结论前列腺癌组织中miRNA-21的表达上调,在转录后水平抑制PTEN表达,miRNA-21有可能成为
前列腺癌治疗的新靶点。
关键词:前列腺癌;miRNA-21;PTEN
中图分类号:R737.25
文献标志码:A
文章编号:1003-8507(2013)06-1112-04
ThestudyofexpressionandregulatoryroleofmicroRNA-21(miR-21)on
PTENinprostatecancer
XIAOLi*,JINYan-yang,TONGMing.
*LiaoningMedicalUniversity,Jinzhou,Liaoning121001,China
Abstract:OBJECTIVEToinvestigatetheexpressionandregulatoryroleofmicroRNA-21(miR-21)onPTENanditsroleinprostatecancer.METHODSmiR-21andPTENmRNAexpressioninnormaltissue,prostatecancertissueandprostatecancercells(PC3)weretestedbyquantitativereal-timePCR.PTENproteinexpressionwastestedbywesternblot(WB).Successful-lytransfectedwithmiRNAinhibitionMiR-21expressioninPC-3cellsofprostatecancer,real-timePCRandWesternblot,thelevelofexpressionofPTENinPC-3cells,andthentheexpressionchangesofPTENmRNAandproteinweretestedbyPCRandWB.RESULTSmiR-21wasup-regulatedby11.7multiplesinprostatecancercomparedtonormalprostatetissues.Where-astheexpressionofPTENmRNAandproteindecreasedinprostatecancertissuescomparedwithnormalprostatetissues.ItpromptedthatthemiR-21andPTENwasnegativeiycorrelative.NOobviousdifferencewasfoundamongPTENmRNAaftermiR-21inhibiortransfectionintheorganizationoftheblankgroup,transfectiongroupandnegativecontrolgroup,whereitsrelativeproteinexpressionlevelshadobviousdifference.CONCLUSIONThePTENabnormallow-expressionmaypalyakeyroleinprostatecancerduetothethemiR-21up-regulation.Keywords:Prostatecancer;MicroRNA-21;PTEN
前列腺癌的发生发展涉及一系列的基因组的改变,抑癌基因PTEN(phosphataseandtensinhomologue)丢失在前列腺癌
作者简介:肖黎(1985-),男,硕士,住院医师,研究方向:前列腺
癌相关研究
通讯作者:佟明,博士,教授,主任医师,研究方向:泌尿系肿瘤治
疗及发病机制相关研究,E-mail:Dongmingmir@
的发生及进展中起关键的调控作用[1,2]。miRNA(microrRNA)广泛存在于动植物中,它对生物体生长发育和分化调控起着重要作用,其失衡表达亦可促进多种肿瘤的发生发展[3];大样本筛查证实miRNA-21在多种实体肿瘤中均出现高表达现象[4]。
miRNA-21的高表达可以提高前列腺癌细胞的凋亡抵抗、活力及侵袭力[5],而以前的研究也证实下调miRNA-21在前列腺癌表达后,细胞增殖能力减弱。本研究旨在探讨miRNA-21对抑
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