植物组织培养新技术研究进展(7)

料上的水分吸干，并用消毒刀片切成小块。

（二）在无菌坏境中将材料放入70％洒精中浸泡30－60秒。

（三）再将材料移入漂白粉的饱和液或0.01％升汞水中消毒10分钟。

（四）取出后用无菌水冲洗三、四次。

3.1.3制备外植体

将已消毒的材料，用无菌刀、剪、镊等，在无菌的环境下，剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮和种皮胚乳等，叶片则不需剥皮。然后切成0.2－0.5厘米厚的小片，这就是外植体。在操作中严禁用手触动材料。

3.1.4接种和培养

（一）接种

在无菌坏境下，将切好的外植体立即接在培养基上，每瓶接种4－10个。

（二）封口

接种后，瓶、管用无菌药棉或盖封口，培养皿用无菌胶带封口。

（三）温度

培养基大多应保持在25℃左右，但要因花卉种类及材料部位的不同而区别对待。

（四）增殖

外植体的增殖是组培的关键阶段，在新梢等形成后为了扩大繁殖系数，需要继代培养。把材料分株或切段转入增殖培养基中，增殖培养基一般在分化培养基上加以改良，以利于增殖率的提高。增殖1个月左右后，可视情况进行再增殖。

3.1.5根的诱导

继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根，必须转到生根培养基上进行生根培养。1个月后即可获得键壮根系。

3.1.6炼苗移栽

试管苗从无菌到光、温、湿稳定的环境进入自然环境，必须进行炼苗。一般移植前，先将培养容器打开，于室内自然光照下放3天，然后取出小苗，用自来水把根系上的营养基冲洗干净，再栽入已准备好的基质中，基质使用前最好消毒。移栽前要适当遮荫，加强水分管理，保持较高的空气湿度（相对湿度98％左右），但基质不宜过湿，以防烂苗。

用流程图可表示为下图：