Sy-9 DNA的粗提取与鉴定

Sy-9 DNA的粗提取与鉴定

一、教材分析

本实验既是对组成细胞化合物的验证，也是加强学生对细胞中化合物的提取原理、方法、技巧的理解掌握，同时还是历年来各种考核的热点。因此，本实验的成功与否关系重大。

:

(1)DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度变化而改变进行提取。 (2)利用DNA不溶于酒精而细胞中的某些物质能溶于酒精进行提纯。 (3)利用DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色进行鉴定。 教材接着说明了DNA:

要求学生初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法,观察提取出来的DNA物质。 教材第三部分清楚地列出了该实验的 :

特别是所列酒精、蒸馏水、柠檬酸钠溶液、氯化钠溶液、二苯胺试剂，在实验中一定要搞清楚它们的作用。

从取鸡血细胞、DNA 1.知识结构的联系:成；细胞核又包括核膜、核液、核仁、染色质(染色体)；染色质主要是由DNA和蛋白质组成的，所以要想对DNA进行提取，必须把细胞弄破，然后采用相应的原理和方法才能提取出来。

2.相关知识的迁移:掌握该实验的知识点，对巩固《生命的物质基础》(核酸)、《生物的生殖和发育》(减数分裂、受精作用过程中DNA含量的变化)、《遗传和变异》以及“基因工程”打下较好的理论基础。

3.实验操作的关键:该实验成败的关键是提取。

一则选材:鸡血细胞核DNA含量丰富且易得；鸡血细胞很易吸水胀破。

二则氯化钠浓度变化: DNA的粗提取中必须通过几次准确的氯化钠浓度变化方可，否则提取的量不足。所以教师必须精心设计，认真组织，否则，实验难以成功。

二、教学目标 1.知识目标：

(1)获得鸡血细胞的方法(B:识记)；

(2)提取鸡血细胞核物质的方法(C:理解)； (3)提取含杂质较少的DNA的方法(C:理解)； (4)DNA鉴定的方法(C:理解)。 2.能力目标：

(1)理解相关溶液的作用机理，培养学生的分析能力； (2)通过DNA的粗提取，培养学生的动手能力。 三、重点·实施方案 重点：

1.掌握DNA的粗提取与鉴定的技术；

2.理解各步骤中的实验原理。 实施方案：

1.对每小组进行关键步骤的指导；

2.对每关键步骤的原理进行分析讲解。 四、难点·突破策略 难点：

DNA的粗提取 突破策略：

1.板书DNA的粗提取程序和重要环节； 2.诱导学生理解各种溶液的用途或作用。 五、实验原理：

1.血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液；

2.DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14 mol／L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出；

3.DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质则可以溶于酒精，利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA；

4.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 六、材料用具 1.材料：

鸡血细胞液；预冷的95%的酒精溶液；蒸馏水；质量浓度为0.1 g／mL的柠檬酸钠溶液；物质的量浓度分别为2 mol/L和0.015 mol/L的氯化钠溶液；二苯胺试剂。

2.用具：

铁架台、铁环、镊子、三角架、酒精灯、石棉网、载玻片、玻璃棒、滤纸、滴管、量筒、烧杯(不同大小)、试管、漏斗、试管夹、纱布。

七、操作指导

从理论上掌握鸡血细胞

DNA。 (2)让DNA处在0.14 mol/L的氯化钠溶液中尽可能地析出。

(3)用预冷的95%的酒精尽可能除去其他细胞物质，得到更纯化的DNA。 八、课时安排：l课时 十、教学过程 导言 的化学组成和主要功能是什么? 2.DNA主要存在于细胞的什么结构中? 3.为什么说染色体是遗传物质的主要载体?

上一节课我们学习了染色体是遗传物质的主要载体，且通过两个经典实验证明了DNA是

遗传物质。那么细胞中是否有DNA呢?这节课通过实验证明。

实验十一 DNA的粗提取和鉴定

制鸡血细胞液(加抗凝剂)→获得鸡血细胞(离心或静置)→获得鸡血细胞核物质()→鉴定DNA(用二苯胺

)

I.提取血细胞(柠檬酸钠、离心) Ⅱ.提取核物质(蒸馏水、过滤)

Ⅲ.用NaCl提取DNA(NaCl、过滤) Ⅳ.用酒精提取DNA(酒精、过滤)

V.用二苯胺鉴定DNA(二苯胺试剂) 整个实验共“三次过滤，两次析出，五次搅拌” (不少于5 min)，否则血细胞核不会充分破碎，溶解出的DNA就会减少。过滤时采用单层纱布。

(2)当NaCl溶液加入至血细胞滤液中之后，必须充分晃动烧杯，使二者混合均匀。这样才能使DNA充分溶解于浓NaCl溶液中。

(3)所用酒精必须是充分预冷(在冰箱中5℃以下冷却24h以上)才能使用。冷酒精与含DNA的NaCl溶液的体积比是2：1。提取DNA丝状物的方法是缓缓旋转玻棒。

(4)做步骤Ⅲ时加入蒸馏水的量应充足。 由于被稀释的原液体积仅为60mL左右，学生担心蒸馏水加过量，往往加到大半烧杯时就终止了。

(V×0.14=2×0.04 V=0.571L=571L)；②使

(5)盛放鸡血细胞液的容器和实验中的烧杯及试管最好也是塑料制的，因为玻璃制品表面

带电荷，DNA中的磷酸基带相反的电荷，会被吸附于玻璃表面，减少DNA含量。

依黑板程序和教材的具体步骤进行操作，强调要把握浓度。 集体提示结合分组指导。

。 …… 此处隐藏：1898字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……