基因工程及其在食品科学中的应用1

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第二章 基因工程及其在食品科学中的应用

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第一节 基因工程基础一、基因工程的定义、意义及研究内容 基因工程的定义、 (一)基因工程的定义 gene engineering genetic engineering recombinant DNA technique Molecular cloning (二)基因工程的意义 基因工程是现代生物工程的主体核心技术。 基因工程是现代生物工程的主体核心技术。基因工程的最大特 是现代生物工程的主体核心技术 点是可打破生物种属界限 进行生物种( 点是可打破生物种属界限，进行生物种(属、科、目、纲、门、界)内 种属界限， 外基因的重组、遗传信息的转移， 外基因的重组、遗传信息的转移，是人工定向改变生物遗传性的根 本技术。 本技术。 遗传病、心脑血管病、糖尿病、癌症、过度肥胖综合症、 遗传病、心脑血管病、糖尿病、癌症、过度肥胖综合症、老年痴 呆症、 呆症、骨质疏松症

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(三)基因工程的研究内容

制备目的基因

构建重组DNA 构建重组

获得转化体

筛目的基因在受体生物 细胞中高效表达

筛选出重组转化体阳性克隆

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二、基因工程的工具酶基因工程的关键技术之一就是先将目的基因 基因工程的关键技术之一就是先将目的基因DNA从供体生物 目的基因DNA从供体生物 体中分离出来，再与合适载体 体中分离出来，再与合适载体DNA连接重组等，这些分子操作涉 分离出来 载体DNA连接重组等 连接重组 及多种不同的酶 主要包括： 及多种不同的酶。主要包括：

限制性内切核酸酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 连接酶 激酶

DNA甲基化酶 DNA甲基化酶、 甲基化酶、 依赖于DNA的RNA聚合酶 依赖于DNA的RNA聚合酶 磷酸酶 核酸酶

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限制性内切核酸酶与DNA甲基化酶 (一)限制性内切核酸酶与DNA甲基化酶 1、定义 restriction endonuclease:指一类能够识别和切割双链 endonuclease:指一类能够识别 切割双链 识别和 双链DNA分子内核苷酸序列的内切核酸酶 分子内核苷酸序列的内切核酸酶 核苷酸序列

DNA methylase :是指一类能够识别 是指一类能够识别DNA特定序列，并在其 特定序列， 特定序列特定碱基的特定位置上引入甲基而发生修饰作用的酶 特定碱基的特定位置上引入甲基而发生修饰作用的酶 甲基

2、限制性酶的命名和分类 (1) 限制酶的命名其命名主要是参照H. . 其命名主要是参照 .O.Smith和D. Nathans提出的待命名 和 提出的待命名 酶的供体微生物的属名与种名相结合的原则进行的，具体如下： 酶的供体微生物的属名与种名相结合的原则进行的，具体如下： 相结合的原则进行的

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属名的第一个字母(大写 种名的最前两个字母(小写 大写)和 小写)组成的 ① 以属名的第一个字母 大写 和种名的最前

两个字母 小写 组成的 三字母符号为其基本形式 三字母符号为其基本形式 为其 的酶用Eco表示；来源于 表示； 如：来源于大肠杆菌 Escherichia coli)的酶用 来源于大肠杆菌( 大肠杆菌 的酶用 表示 流感嗜血菌( 的用Hin表示 流感嗜血菌 Haemophilus influenzae)的用 的用 表示

② 当同属不同种的两种微生物的种名前两个字母完全相同时，则来 当同属不同种的两种微生物 种名前两个字母完全相同时 不同种的两种微生物的 自后一种微生物的酶的符号改用其种名词头前缀后第一个字母 后一种微生物的酶的符号改用其种名词头前缀后第一个字母 改用其 (小写 代替上述三字母符号中的最后一个字母 小写)代替上述三字母符号中的 小写 代替上述三字母符号中的最后一个字母 副流感嗜血杆菌)的用 副流感嗜血杆菌 如：来自Haemophilus parainfluenzae (副流感嗜血杆菌 的用 Hpa表示，.而来自同一属的Haemophilus parahaemolyticus (副 表示，.而来自同一属的 表示，. 副 溶血嗜血杆菌)的则用 表示。 溶血嗜血杆菌 的则用Hph表示。 的则用 表示

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③ 当微生物具有特殊名称时，则将代表该特殊名称的符号置于上 当微生物具有特殊名称 特殊名称时 则将代表该特殊名称的符号 符号置于上 述三字母符号之后 如：来自Haemophilus influenzae的Rd株的用Hind表示；来自 Rd株的用 株的用Hind表示 表示；

Haemophilus influenzae的Rf型的用Hinf表示。 Rf型的用 型的用Hinf表示 表示。④ 当不止一种限制酶分离纯化自同一微生物株系时，则依其被分 当不止一种限制酶分离纯化自同一微生物株系 一种限制酶分离纯化自同一微生物株系时 离的先后顺序以罗马数字 大写) 离的先后顺序以罗马数字(大写)置于上述命名符号之后 以罗马数字( 如：来自Haemophilus aegytius的三种酶分别用Hae I、HaeⅡ 的三种酶分别用Hae I、HaeⅡ 和HaeⅢ表示；来自Haemophilus influenzae的Rd株的三种酶 HaeⅢ表示； Rd株的三种酶 分别用Hind I、HindⅡ HindⅢ表示。 分别用Hind I、HindⅡ和HindⅢ表示。

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⑤ 为了区别起见，在上述命名名称之前 …… 此处隐藏：3397字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……