动物细胞培养和核移植技术

2.1.2《植物细胞工程的实际应用》课件(新人教版选修3)

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动物 细胞 工程 常用 技术

动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体

其中动物细胞培养技术是其他 动物细胞工程技术的基础

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动物细胞培养概念：动物细胞培养 就是从动物机 体中取出相关 的组织,将它分 散成单个细胞, 然后,放在适宜 的培养基中,让 这些细胞生长 和增殖。

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1、动物细胞培养过程动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞 网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织 和器官。遗传物质 未改变

动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官 单个细胞(水解弹性纤维)

胰蛋白酶

加培养液

细胞悬浮液 原代培养 10代细胞

细胞株

50代细胞遗传物质 已改变

传代培养

细胞系 无限传代

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1.动物细胞的培养过程取动物器官 和组织 幼龄动物 剪碎组织

胰蛋白酶处理 单个细胞 细胞培养

动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础

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思考讨论：在动物细胞培养过程中， 为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织 进行处理？

胰蛋白酶处理动物组织， 可以使动物组织细胞间的胶原 纤维和细胞外的其他成分酶解， 获得单个细胞。

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有关概念:原代培养：指将要培养的动物细胞取 出后,先用胰蛋白酶等使组织分散成 单个细胞,然后配制成一定浓度的细 胞悬浮液，再将该悬浮液放入培养瓶 中培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取 出，配制成细胞悬浮液，分装到两个 或两个以上的培养瓶中继续培养，称 为传代培养。

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细胞株：原代细胞一般传至10代左右 细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡， 少数细胞存活到40~50代，这种传代细 胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现 细胞生长停滞状态，只有部分细胞由 于遗传物质的改变，使其在培养条件 下可以无限制传代，这种传代细胞为 细胞系。细胞株和细胞系的区别： 细胞系的 遗传物质改变，具有癌细胞的特点， 失去接触抑制，容易传代培养。

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如何界定原代培养和传代培养； 细胞株和细胞系？随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖细胞株 细胞系 遗传物质改变

细胞 悬浮 液

10代 细胞

50代 细胞传代培养

无限传 代

贴壁生长细胞分裂生长到 多数组织细胞必须在固定 相互接触时就停止分裂增 的表面上生长和分裂。 殖的现象叫接触抑制

原代培养

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2.动物细胞培养条件：1、无菌、无毒的环境 (添加一定量的抗生素，定期更换培养液) 2、营养 (葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。) 3、温度和PH 保证细胞顺利的 36.5+(-)0.5度, 7.2-7.4 生长增殖 4、气体环境： O2和CO2(95%空气和5% CO2 )

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3.动物细胞培养技术的应用1.蛋白质生物制品的生产如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 2.健康细胞培养

培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植3.细胞的生理、药理、病理研究

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思考：1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植 物组培培养基有何独特之处？ 主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素 和动物血清等。独特之处有： ①液体培养基 ②成分中有动物血清等 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或 组织做动物细胞培养材料？因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能 力强

3、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那 样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不 能发育成新的动物个体

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动物细胞培养液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。

动物体细胞大都生 活在液体的环境

与植物培养基相 比其特点是：

(1)液体培养基

(2)含有动物血清

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植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目 植物组织培养 动物细胞培养

原理培养基性 质 培养基特 有成分 培养结果

细胞的全能性 固体培养基

细胞增殖

液体培养基

蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 植物体 细胞株、细胞系 获得细胞或细 胞分泌蛋白

培养目的

快速繁殖、培 育无病毒植株

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