安捷伦高效液相1100培训教材(12)
发布时间:2021-06-08
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100%的水冲洗系统20分钟
反相色谱柱[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]
及其它窗口
如ACN
用shut down关
然后关泵
用适于
(五)
1
存放时
色谱柱用相应的有机相 对于手动进样器毫升
流动相使用前必须过滤
溶剂不能干涸
其它主意事项见说明书
两端封死
要用水冲洗进样口
易长菌
要配制90%水+10%异丙醇
正相每次数
*4
维护知识
1
它会对色谱柱
消除由于
污染对分析结果的影响
由于填料颗粒很细溶剂和样品中的细小颗粒
会使色谱柱和毛细管容易堵塞
溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损
样品过滤头的类型
适用于大进样量的过滤
处理样品体积少于50µl
适用于范围广的过滤3mm内径滤膜类型
适用于所有溶剂并无任何可溶物 不适用于有机溶剂推荐
用 于 蛋白质和其相关样品
适用于绝大多数有机溶剂和水溶液
由0.2µm和0.45µm两种规格
70%乙醇
具有蛋白吸收低
不适用于二甲基甲酰胺
2
HPLC用缓冲盐时,由于泵头内的缓冲盐溶液存在高压析盐现象,析出的细小盐粒非常坚硬,它附着在蓝宝石活塞杆上,随着蓝宝石活塞杆的往复运动,容易产生划痕,并磨损密封垫,造成漏液等故障现象
缓冲盐的浓度在0.1mol或
大于0.1mol时,必须使用该在线冲洗选项.清洗液配制:
90%水+10%异丙醇.该混合液可抑制菌类生长和减小水的表面张力
不能干涸
为什么 Agilent 1100LC的流动相管路非常细?在使用HPLC时,应特别注意”柱外效应”对分析结果的影响
液体流动相的流速也
比气相慢1-2个数量级样品进入色谱柱后进样器
连接管中都会引起色谱
峰的展宽
为使柱外效应减之最小Agilent 1100LC使用加工工艺难度高的毛细管线作为流动相管路
0.17mm内径 ------绿色 ;0.12mm内径-------红色内径 -----0.13mm;0.18mm;0.25mm;0.5mm
4
流动相使用前必须进行脱气处理
如O2以防止在洗脱过程中当流动相由色
谱柱流至检测器时气泡会增加基线的噪音
甚至无法分析
柱中固定相发生降解而改变柱的分离性能可能会
造成荧光猝灭