芽孢杆菌活菌数及芽孢数检测方法(2)

发布时间:2021-06-07

高压蒸汽灭菌器, 干热灭菌箱, 培养箱,36±1℃, 电炉, 天平, 冰箱, pH计,灭菌试管,平皿(直经9cm)、刻度吸管等。

5 活菌计数方法

5.1 取固体样品5.0g,溶于95mL蒸馏水(此时稀释20倍),加入适量已灭菌玻璃珠,于200rpm摇床中振荡20min。

5.2 用移液枪从锥形瓶取1ml样品液至装有9ml无菌水的试管中,逐步稀释至适当梯度。

5.3 吸取0.2mL适当稀释梯度的菌液放入对应平板中,用已灭菌的涂布棒来回涂匀。

5.4 涂匀的平板置于30℃培养箱中培养20~30h,待长出清晰可见的菌落,进行计数。

6菌落计数及报告方法

作平皿菌落计数时,可用眼睛直接观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后,应求出同稀释度的平均菌落数,供下一步计算时应用。在求同稀释度的平均数时,若其中一个平皿有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿一半,而其余一半中菌落数发布又很均匀,则可将此平皿计数后乘2 以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。

7 不同稀释度的选择及计数方法

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