实验 毛细血管采血 白细胞计数

临床检验基础实验实验一 毛细血管采血 白细胞计数

王梅江苏大学基础医学与医学技术学院

临床检验与输血教研室

第一部分

毛细血管采血

毛细血管采血即皮肤采血法，主要用于需血量微小的检查项 目。所获得的末稍血不单纯是毛细血管血，实际是是微动脉、微 静脉和毛细血管的混合血，并依采血时挤压的力度不同含有少量 细胞间质和细胞内液。

毛细血管采血器具

采血笔

采血笔结构示意图

采血笔的使用

拧下采血笔前端笔帽

安装采血针

采血

采 血 针

毛细血管采血操作步骤1、准备材料2、选择采血部位 3、按摩皮肤 4、消毒皮肤 用75%乙醇脱脂棉球擦拭采血部位的皮肤，待干。 5、针刺皮肤 用左手拇指和示指固定绷紧皮肤，右手持采血针自指尖腹内侧迅速刺入 6、拭去第一滴血

7、吸血血液自然流出时，用微量吸管吸血至刻度 8、止血

毛细血管采血注意事项1、采血前准备 患者、器材 2、选择采血部位

皮肤完整处采血3、消毒皮肤 无菌操作、一人一针一管、皮肤消毒应待乙醇或碘酊挥发后采血

4、针刺皮肤迅速，伤口深度 5、拭去第1滴血 6、吸血与检测 微量吸管校准、血液充入管内的速度、应及时测定

第二部分 白细胞计数

原理：血液经稀乙酸定量稀释并破坏成熟红细胞，在血 细胞计数池内计数规定区域内的白细胞总数，换 算成每升血液中白细胞数。

试剂：白细胞稀释液：冰乙酸 2.0ml

10g/L亚甲蓝3滴加蒸馏水 至100ml

器材：

微量吸管、带孔吸头、改良牛鲍血细胞计数板及专用盖片

1ml刻度移液管、小试管、洁净软纱布、干棉球、光学显微镜

微量吸管的使用1、将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上，连接紧密不漏气； 2、拇指和中指夹住吸头中下端，示指盖住吸头小孔，拇、中指 轻微挤压排出适量空气； 3、将微量吸管插入抗凝血，拇、中指缓慢松劲(松动快血液会

吸入吸头),吸取抗凝血至所需刻度略上方(不能有气泡),吸管呈水平略下垂，松开示指； 4、用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血(保证血量准确),轻触

吸管下口吸去多余血量，使管内抗凝血正处所需刻度；5、将微量吸管插入小试管底部，三指轻微用力慢慢排出血液， 用上清液冲洗管内余血2-3次，轻摇试管混匀； 6、拔出微量吸管弃入污物桶。

改良牛鲍血细胞计数板结构

计数板上下各一个计数池

血细胞计数池的方格计数区域分为9个大方格 四角的大方格各划分为16个中方格

中央大方格划分为25个中方格四角的大方格为白细胞计数区 中央大方格四角和正中5个中方格为红细 胞计数区

每个大方格的面积= 1mm×1mm=1mm2 每个大方格的

容积= 面积×高度=1mm2 ×0.1mm=0.1mm3 (μl)

白细胞数/L= N/4 ×10 ×106 ×稀释倍数 (N:4个大方格细胞总数)

细胞计数原则

大方格四边压线细 胞数左不数右，数 上不数下， 弓形移动

白细胞计数操作步骤(1)加稀释液 用移液管向小试管内加入0.38ml白细胞稀释液。 (2)采血、稀释 用微量吸管采血20ul,拭去管外余血，释放于小试 管

底部，用上部稀释液洗净吸管内余血，轻摇试管混匀，静置等其溶血。(3)清洁计数板及盖片(动作轻柔),夹持盖片缘纵向前推轻放于两侧 支持堤上。 (4)充计数池 将小试管轻微振荡2min,立即以一次性微量吸管吸取混 匀后的白细胞悬液，充入计数池内。静置2-3min,使细胞沉于计数池 底面。 (5)调试显微镜 (6)计数 将计数板放置载物台上，转至低倍镜(10×),调节 聚光器使光线较暗，调节旋钮找到方格线，调节光亮。 低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数，压线细胞数上不 数下，数左不数右。