ELISA法检测HIV抗体弱阳性外部对照室内质控血清的

发布时间：2021-06-06

ELISA法检测HIV抗体弱阳性外部对照室内质控血清的制备和保存

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现代检验医学杂志第２４卷第５期２００９年９月ＪＭｏｄＬａｂＭｅｄ，Ｖ０１．２４，Ｎｏ．５。Ｓｅｐｔｅ．２００９

表明，ＨＣＶｃｏｒｅ区ＤＮＡ疫苗的免疫反应与机体的保护性免疫密切相关。所以我们认为，ＨＣＶ核心蛋白基因可以作为ＨＣＶ预防和治疗性疫苗研制的首选靶基因进行研究。参考文献：

［１］

Ｕｌｍｅｒ

ｇｏｕｓ

ｖｉｒｕｓ

ｃｏｒｅ

ｐｒｏｔｅｉｎ［Ｊ］．Ｊ

ｖｉｒｏｌ，１９９５，６９：５８５９－５８６３．

［５３

Ｓｈｉｒａｉ

ｃｏｒｅ

Ｍ，ＯｋａｄａＨ，ＮｉｓｈｉｏｋａＭ．ＡｎｅｐｉｔｏｐｅｉｎＨＣＶ

ｒｅｇｉｏｎ

ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄｂｙＣＴＬｃｅｌｌｉｎｍｉｃｅＶｉｒｏｌ，１９９４，６８（５）：３３３４－３３４２．

ａｎｄｈｕ

ｍａｎｓ［Ｊ］．Ｊ

［６３韦三华，尹文，雷迎峰，等．丙型肝炎病毒多表位基

因核酸疫苗的构建及其免疫原性Ｄ］．中国生物制品

学杂志，２００７，２０（９）：６３３－６３５．

ＪＢ，ＤｏｎｎｅｌｌｙＪＪ，ＰａｒｋｅｒＳＥ，ｅｔａ１．Ｈｅｔｅｒｏｌｏ．

ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆＤＮＡ

ｐｒｅｔｅｃｔｉｏｎａｇａｉｓｔｉｎｆｌｕｅｎｚｅｂｙ

ａ

ｅｎｃｏｄｉｎｇ

ｖｉｒａｌ

ｐｒｏｔｅｉｎ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９３，２５９（１９）：

［７３李君武，江静，王志鹏，等．ＨＣＶｃｏｒｅ真核表达质粒

ｐｃＤＮＡ３．１（一）／ｃｏｒｅ的构建［Ｊ］．广东药学院学报，

２００５，２３（１）：５７—５９．

１７４５—１７４９．

［２］［３］

姜泊，张亚历．分子生物学常用实验方法［Ｍ］．北

京：人民军医出版社，１９９６．

Ｃｈｏｏ

［８３

Ｄｏｕ

ｔｏｒｓ

Ｊｕｎ，ＬｉｕＫｅｚｈｏｕ，ＣｈｅｎＺｈｉ，ｅｔａ１．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆａｃ—

ａｆｆｅｃｔｉｎｇａｎｔｉｂｏｄｙ

ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ

ｉｎｍｉｃｅｉｍｍｕｎｉｚｅｄ

ＱＬ，ＫＵＯＧ，ＲａｌｓｔｏｎＲ，ｅｔａ１．Ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎｏｆ

ｂｙ

ａｇａｉｎｓｔｉｎｆｅｃｔｉｏｎｂｙｔｈｅＨＣＶ

ｃｈｉｍｐａｚｅｅｓ

ｖｉｒｕｓ［Ｊ］．

ｇｅｎｅ

ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｏｆＨＣＶ

ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ

ｒｅｇｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ

ＰＭ

［４］

ＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．】９９４，９１（４）：１２９４—１２９８．

ｒｅ—

Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ，１９９９，１５（３）：１５１—１５４．

收稿日期：２００９－０７—２２修回日期：２００９—０８一１９

ＬａｇｇｉｎｇＬＭ，ＭｅｙｅｒＫ，ＨｏｆｔＤ，ｅｔａ１．Ｉｍｍｕｎｅ

ｓｐｏｎｓｅ

ｔＯ

ｐｌａｓｍｉｄＤＮＡｅｎｃｏｄｉｎｇ

ｔｈｅｈｅｐａｔｉｔｉｓ

Ｃ

ＥＬＩＳＡ法检测ＨＩＶ抗体弱阳性外部对照室内质控血清的制备和保存

周炳烨（郑州市第三人民医院检验科，郑州４５００００）

摘

要：目的

制备ＥＬＩＳＡ法检测ＨＩＶ抗体室内质控血清并探讨其保存方式。方法

对ＨＩＶ抗体阳性混合血清进行倍比

两种保存方式的

稀释，选Ｓ／ＣＯ值２～３之间的稀释度制备室内质控，分装后分别保存于４℃和一２０℃冰葙中备用。结果

质控血清连续测定３ｍｏ并绘制质控图，一２０℃冻存质控品结果稳定，４℃保存质控品，第一月稳定，第二、三月出现明显失控。结论

自制ＨＩＶ抗体弱阳性血清作为室内质控是可行的。

关键词：Ｅｌ。ＩＳＡ；ＨＩＶ；室内质控；外部对照；倍比稀释

中图分类号：Ｒ４４６

文献标志码：Ａ

文章编号：１６７１—７４１４（２００９）０５—００８—０２

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉＳＳＩＩ．１６７１—７４１４．２００９．０５．００３

１．２．２用ＨＩＶ抗体阴性健康人血清对少量ＨＩＶ抗体阳

性混合血清进行倍比稀释并对不同稀释度血清进行双份平

应用第三代ＥＬＩＳＡ试剂盒对ＨＩＶ抗体进行检测是初筛及确证实验室的常用方法，该法以基因重组和多肽抗原包被和标记，有良好的特异度和敏感度。实际工作中，为保证检测质量，实现试剂的高特异度和高敏感度，提高检测结果的重复性，消除和减少随机误差，必须在检测过程中加入适当的外部对照室内质控品。我院ＨＩＶ初筛实验室根据经验和实际需要进行自制，取得了满意的效果。１材料与方法１．１材料

行检测，选取Ｓ／Ｃ０值为２～３的稀释度为最适稀释度。

１．２．３

根据最适稀释度和年需求量进行配制，分装和保

存。其中一２０６Ｃ保存分装量为３～５ｄ用量，４℃保存分装量

为一个月使用量。

１．２．４严格按照操作规程对制备好的质控血清进行２０次重复测定，求其均值（＿），标准差（ｓ）和变异系数（ＣｑＺ％），作

为绘制质控图的初始数据。

１．２．５将分装好的室内质控品分别保存于一２０℃和４℃环境中，每天随日常工作对两种质控品分别做双份测定，求均值绘制质控图并根据实际情况对数据进行修正。２结果①对不同稀释度血清进行检测后发现其Ｓ值有

良好的浓度梯度，在１：４０００

１：８

１．１．１试剂盒：上海科华人类免疫缺陷病毒抗体（１＋２）诊断试剂盒（双抗原夹心酶联免疫法），上海科华生物工程股

份有限公司，批号：２００８０６２３，有效期：２００９．０６．２２。