L-色氨酸生产菌的选育及其发酵条件的研究

时间：2025-03-09

氨基酸

维普资讯氨基酸和生物资源A n￣ is& Boi R suel2 0, 5 3: l 3 mi e o. d it eore 0 3 2 ( ) 4一4 c 41

L一色氨酸生产菌的选育及其发酵条件的研究王健，陈宁，谭青乔，张克旭

(津科技大学食品科学与生物工程学院，天天津 30 2 ) 0 22摘要：以代谢控制发酵理论为指导， L对一色氨酸产生菌的定向选育、摇瓶发酵条件、0L发酵罐发酵条件进行了研究。 3 以谷氨酸棒杆菌一3 ( h‘+’为出发菌株，硫酸二乙醋 ( E )次诱变处理，向选育出一株 L一色氨酸产生菌 2Pe )经 D S多定 3进行了 3酵罐分 0L发 ' ' 3Pe r￣ (h‘+Tr Q y‘+5￣"一ll+5一F r r+S l I'。以摇瓶分批发酵最优条件为基础，菌株 G+CI )￣ I对批发酵试验，菌株发酵 6h产 L该 4,一色氨酸 7. gL。 2 ~ 8

关t坷：一色氨酸； L谷氨酸棒杆菌；变育种；诱发酵中圈分类号 tQ 2 T 92文献标识码： A文章编号：06—87 (o3 0—0 4—0 10 36 20 )3 0 1 3

近年来，着色氨酸在医药、品和饲料等方面随食应用的开拓，场需求量不断增加…。全世界年总市需求量达 l'以上，实际产量仅有 l0 t右。 ot而 O0左远远不能满足市场需求n。酶法和和微生物转化法产 l

L一。 1SO, 0 01 t. e 0. g L~。 e O4‘ H2 0. g’ F. S 7 0 O1 L一， VBI 0 tg。 3 0￣ VH 0 t p 2 0￣ g, H7.— 7. 0 2o

1 2 3发酵培养基各成分质量浓度： ..葡萄糖 17g 2 L ( )S 4 2g L,h 0 1g L, 0.5g~,N 2 O ~ P e .5‘~ 4 1

酸水平低已困扰研究工作者多年b,后有 O a u】先 smK rhsi 、 a u a yih ua ah等H l K t m t R o i等根据代谢控 s a c制发酵原理对 L一色氨酸发酵进行了研究。本文以

L豆饼水解液 1 L玉米浆 2 L H P . . ~, 9m, 2m,K 2 O 10g’

L M S| 7 2 .’一， lo‘ 0

0 O 一。 g o‘ H 0 0 4 g L MI 4 . 1g S

L‘ F O。 H 0 0 O’‘, B O t, H 5,‘, 4 7 2 . 1g L‘ V IlOt V 0 g . g

谷氨酸棒杆菌 T 5—3 ( i’+T r为出发菌株， x 2 Pl e y一)

C C 3 0g L (消 ) p 7 0—7 2 a 0 分 2,H . .。13方法 .

经硫酸二乙酯 ( E )次诱变处理，向选育出一 DS多定株 L一色氨酸产生菌 ' 2 2 ( h一+T r r 23 P e Q y‘+5一IT￣' I+5一 f f+ S"+ CN )在优化条件下，株 . I G I。菌l 2z ' 2 3发酵产 L Q一色氨酸 7 2 一。 .8g L 1材料与方法1 1材料 .

1 3 1 D S诱变 . . E曲线。 13 2发酵 ..

采用 D S最终体积分数为 1 E(%)

进行诱变，测定不同诱变时间的杀菌率，制致死率绘

13 2 1摇瓶发酵 . ..

种龄 1h装液量 ( 0m. O m 6, 3 1SO￣)接种量 8, J,%初始 p 7 2 3【,6r i,2。 H .,2 c 9 r n 7 h=/ a

谷氨酸棒杆菌 ( oyeat/m gu mcm) C r be r l a i n el￣ t u一

3,津科技大学代谢控制发酵研究室保藏菌种。 2天

13 2 2 3 布朗自控发酵罐发酵 . . . 0 LB.

12培养基 .

按料液 1L配制，酵罐先于 11【空消 5发 2= c3rn然后 11实消 2rn 0 i。 a 2℃ 0 i。转速控制 4 0/ i。 a 0 r n a r通风体积比 1 1 vv。加氨水自动控制 p .。:(/)流 H 7 0 13 3分析方法 .. 13 3 1色氨酸测定：用比色法测定 n。 .. .采】13 3 2 p . . . H的测定：用 p 5 5—9.采 H . 0精密试纸测定。

12 1液体完全培养基各成分质量浓度：萄糖 .. 葡 5‘一，白胨 1 ~,肉膏 1 ~。 gL蛋 0g L牛 0g L酵母膏 5g ‘ Na 5 g L, L’, CI2. ‘ pH 0— 7 7.2 no 0 mi.

20 05bp。 .7 la灭菌

122种子培养基各成分质量浓度：萄糖 4 ..葡 0 gL ( i )S . . ~,米浆 3 r

酵母浸膏一， N l 2O 4 0 g L玉， O L, a

粉 6g L r￣P 410g L Mgo H 0 0 4g ‘一， d O .‘一， s 47 2 .‘收穰 E期：03— 3—1 l 20 0 1

13 3 3葡萄糖的测定：用 S A一4 A谷氨酸一 . ..采 B 0 葡萄糖分析仪测定。

基金项目：天津市科委攻关项目( 3l l 9 l 71 8 3 )

2结果与讨论

作者简介：王健( 7一，博士研究生， 1 6 )女， 9研究方向为代谢控制发

2 1诱变条件的选择 .

酵。

硫酸二乙酯能与 D A中碱基的磷酸部分发生 N