酸性氧化电位水杀菌效果和毒性试验观察(2)

酸性氧化电位水杀菌效果和毒性试验观察

心提供。3只雄性，体重2.2~2.5kg）一侧眼结膜囊内。另一侧眼以生理盐水作为正常对照。滴EOW后，将兔眼闭合，然后用生理盐水冲洗。于滴眼后1h、24h、48h、72h、7d、14d和21d肉眼观察家兔眼结膜、虹膜和角膜的损伤与恢复情况。在72h内未出现刺激反应，或第7d或第14d，眼睛刺激反应完全恢复，即终止试验。对家兔眼角膜、虹膜和结膜的急性刺激反应进行评分。分别以动物眼角膜、虹膜和结膜充血、水肿的平均评分和恢复时间进行，按眼刺激反应分级标准判定受试物对眼睛的刺激强度。

1.3.4阴道粘膜刺激试验 将新西兰大白兔（由第四军医大学实验动物中心提供，6只雌性，体重2.0~2.5kg）仰面固定，暴露出会阴和阴道口。将导管用受试液湿润后轻柔地插入阴道（4~5cm），并用注射器缓慢注入2mlEOW，抽出导管，完成染毒。对照组大白兔用生理盐水作同样处理。染毒后24h，处死动物，肉眼观察阴道是否有充血、水肿等表现，供病理取材时参考。选取阴道的两端和中央3个部位的组织制片，HE染色后进行组织病理学检查。对阴道粘膜的刺激反应进行评分。将试验组平均积分减去对照组平均积分得出刺激指数后，进行刺激强度分级。

2.结果

2.1中和剂鉴定试验结果 试验中所用消毒剂浓度为EOW原液，分别对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌作用20s。试验中所选中和剂（含0.5%硫代硫酸钠的磷酸盐缓冲溶液）对EOW原液能够完全中和，该中和剂和中和产物对受试细菌和培养基无影响，适用于定量杀菌试验，结果见表1。

表1. 中和剂鉴定试验结果

组别 各菌平均回收菌落数/cfu.ml-1

金黄色葡萄球菌 白色念珠菌

消毒剂+菌悬液 0 0

（消毒剂+菌悬液）+中和剂 117 133

中和剂+菌悬液 2110000 2010000

（消毒剂+中和剂）+菌悬液 2020000 1920000

稀释液+菌悬液 2280000 2120000

稀释液+中和剂+培养基 0 0

2.2微生物定量杀灭试验结果 EOW原液作用20s，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的杀灭对数值均可达到5.0以上，对白色念珠菌的杀灭对数值可达到4.0以上，见表2。

表2 EOW原液对不同微生物的杀菌效果

试验用微生物 不同作用时间杀灭对数值 阳性对照组平均菌落数的对数值

20s 40s 60s

ATCC6538 ＞5.00 ＞5.00 ＞5.00 7.28

8099 ＞5.00 ＞5.00 ＞5.00 7.25

ATCC10231 ＞4.00 ＞4.00 ＞4.00 7.24

注：阴性对照无菌生长

2.3毒性试验结果 EOW原液敷帖于家兔皮肤4h，去除后1h、24h、48h，3只实验动物染毒一侧和对照一侧皮肤均无红斑和水肿形成，皮肤刺激反应积分值均为0，EOW对1次完整皮肤刺激强度属无刺激性。将EOW按照0.2ml/10g（体重）的灌胃容量1次性给予试验的20只小白鼠，受试小白鼠未见中毒症状且无1死亡，表明EOW对雌、雄小白鼠经口LD50均大于5000 mg/kg（体重），急性经口毒性属实际无毒级。在EOW原液对家兔眼睛染毒后第1h、24h、48h、72h和第7d，染毒组和对照组家兔均未见眼结膜、角膜、虹膜损害，急