柱前衍生HPLC法测定丙戊酸钠的血药浓度及其临床应用

时间：2025-04-02

安徽医药　AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal　2010Mar;14(3) 289

陈　艳,袁　君,王晓娟,岳一涛

(淮南市第一人民医院药剂科,安徽淮南　232007)

摘要:目的　建立柱前衍生HPLC法测人血清中丙戊酸钠血

药浓度的试验方法及临床应用。方法　将血清酸化后用正戊烷提取,2溴苯乙酮和三乙胺衍生,然后用HPLC法进行测定,其中色谱柱为大连依利特ODSC18,流动相为甲醇ζ水(65ζ35),柱温30℃,检测波长262nm,流速为1.2ml -1

min。结果　丙戊酸钠浓度在20～200mg L-1范围内与峰面积比线性关系良好(r=0.9996),最低监测浓度为7mg L-1,平均方法回收率为99.6%,萃取回收率为96.6%,日内日间RSD均<4%。结论　该方法简便快捷,灵敏准确,可应用于丙戊酸钠血药浓度的快速检测,本院采用该方法监测了23例病人,效果良好。

关键词:HPLC;丙戊酸钠;柱前衍生;血药浓度;临床应用μmvalproate,简称VPA)丙戊酸钠(sodi

环又不含氮原子的广谱抗癫痫药,、—,痫发作的首选药物。[A测定的方法有GC法和HPLC荧光法,其中HPLC紫外法关键

基金项目:淮南市科技计划项目(No200702030)

在于药物的萃取和衍生,本文参照文献的基础上[2,3],根据本

院自身条件,简化操作规程,提高灵敏度,降低试验成本,建立柱前衍生高效液相色谱法测定血清中的丙戊酸钠浓度,适合临床常规检测。1　材料1.1　仪器　高效液相色谱仪为岛津LG210ATvp,SPID210Avp紫外检测器;N2000色谱工作站;湘仪L600离心沉淀机;光学读数分析天平(湘仪天平仪器厂);旋涡混合器(上海医科大学仪器厂);D1810C自动双重纯水蒸馏器(上海申胜生物技术有限公司)。1.2试药、Merck公司生产);1

-1

4、;自制重蒸馏水;对照品;。　2.1　色谱条件　色谱柱:大连依利特ODSC18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相为甲醇∶水(65∶35);柱温:30℃;检测波长:262nm;流速:1.2ml min-1;内标物:环己烷羧酸;定量环进样20μl。2.2　试验溶液的配制

　　加样回收试验:取已知含量的同一批(批号为20070119)

供试品,精密称取6份,按低、中、高剂量分别加入甲氧苄啶对照品溶液(40.13mg L-1)适量,按供试品溶液的制备方法处理,依法测定,结果见表1。

表1　甲氧苄啶加样回收试验结果(n=6)

样品含量/mg L-1加入量/mg L-1测得量/mg L-1回收率/%

20.1220.20.20.20.20.

1212121212

16.0516.20.20.24.24.

0506060808

36.0135.39.40.43.43.

9796039978

99.0098.98.99.99.98.

7590251326

3　讨论

参考文献[4,6],对甲氧苄啶对照品溶液在251～300nm波长范围内进行扫描,结果271nm波长处有最大吸收,故选择271nm为检测波长;参考文献比较几种不同比例流动相后,认为乙腈-水-三乙胺(200∶799∶1)(用冰醋酸调节溶液pH值至5.9)最佳,配制过程相对简单,峰形较好,可免除干扰。本法所用的色谱条件能较好地分离甲氧苄啶与杂质,且测定结果与药典方法基本一致,表明用本法测定甲氧苄啶片含量是可行的。参考文献:

[1]　国家药典委员会.中国药典(二部)[S].北京:化学工业出版

社,2005:118.

稳定性试验:取同一供试品溶液,分别于0,1,2,4,6,12h

测定。结果甲氧苄啶峰面积分别为:1826,1821,1815,1801,1814,1817,峰面积的RSD为0.31%(n=6),表明样品在12h内稳定。2.4　样品含量测定[5]　按拟定的含量测定方法对3批样品进行测定,并与UV法测定结果比较,结果见表2。

表2　样品含量测定结果

批号

20070119

20070413[2]　齐成男,杨仕杰,万海江.HPLC法测定克痤隐酮乳膏中甲氧苄

啶的含量[J].黑龙江医药,2006,19(3):165-6.

[3]　皮　立.用反相高效液相色谱法测定复方头孢氨苄胶囊中头孢

氨苄和甲氧苄啶的含量[J].沈阳药科大学学报,2000,17(2):

119-20.