蛋白质的沉淀及变性
发布时间:2024-11-21
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实验一蛋质的沉白淀及性变
一实、验目的 、二验原实 三理实、验仪器试剂 四、和实步验 骤五实、现验象录及原因记
实验目的
1 加、深对蛋白胶质溶体稳定液因 素认的。 2识了解、淀沉白质蛋的几种方法及其 用实义。意 3了、解蛋质变性与沉淀的白系关
。实
验原理 在水溶液中的白蛋分质子由于表生 面成水化和双层层而成电为定稳亲的水胶体颗 粒在,一定的化理因素影下,响蛋 质白颗可因粒失电去和脱荷水而 沉淀
。
实原验a可理逆的淀沉应反此:蛋白时分质的子结构尚发生未显 著化,除变引起沉淀去的素后因沉,的淀蛋质白仍然 解溶于原的溶来剂中并保持。其天然性而不质性变。 大多数如白质的蛋盐析用或在低温作下乙用(醇丙醇)或 时短作间用白质等。一般蛋在化蛋白质纯,常利用 此类反时应。b 不逆可沉的反淀:此应时蛋质白子内分部结发生构大重改 ,蛋白变质因变而沉性,淀除去起沉引淀因的素后, 蛋质不再白溶于原来溶中剂。加如热引的起白质蛋沉 与淀固、凝白质蛋重与属金子离或些某机有的反酸 应都等于此属。类蛋白质但性后变,时有由维于持液 溶定的条稳件然仍存(如在荷)电并,不析出。因此 性蛋变质并白一不定都表现沉淀,而为淀的沉白蛋质 也未必已都性变。
实原理验 蛋在白质液溶中入适量的无机加盐硫酸(、铵柳酸钠、氯化纳 )等浓溶液会使就蛋白质出析称 这,种用作为蛋质的白盐析用作。盐当浓度同, 析不的蛋出质也白同。不球如白蛋在可饱和硫半酸 铵溶中析出液,清而蛋白则在饱和酸铵溶液硫中 才析出能。由盐作析获用的得白蛋沉质淀,降 低其盐当类浓度,又时能再溶解故,白蛋的质盐 作析是用可逆程。过
实仪验和试剂(1器)器仪试管:、试架、管管吸量、。 筒(2试剂) :、A蛋质白—化纳溶液:取20mL氯清,加蒸馏蛋200水L和m和氯化饱 钠溶液01mL,充分搅0后匀用布滤去纱溶物(不氯化加钠目的的溶是解 球白蛋。 B、)蛋质溶液白取5m:L清,蛋蒸用馏水稀至100释L,m拌搅均匀, 用纱后布过。 C滤饱和、硫铵溶酸液:称酸硫铵80g加于1500m0蒸馏水L,中在 0~708温下搅度拌溶,室温促放置中夜过瓶,析底白出结晶,色清 液即上饱为和硫铵溶酸液。D、饱 苦和酸味溶液取:2苦味g放入三酸烧角瓶加,馏水100蒸L, 放m80度入浴约1水0im使之n完全溶,解室于下冷温后瓶底却析黄色出 结,晶清液上即饱和为苦酸,味此液可放存数年 E。、1%乙溶液酸、%1乙酸溶铅、液%硫酸1铜1、三氯乙酸%溶。液 、0F5.磺基水%酸杨液溶 G、5%鞣酸溶。液。L、硫酸铵粉 。
末实
验骤步
1(盐析作);用 (2)乙沉醇蛋白淀质;(3 有)机酸淀蛋沉白;质 (4重)金沉属蛋白质淀 (;5)生碱试剂物淀蛋白质。
沉
实验象记现及录因原