水中总大肠菌群的测定

1、取10ml水样接种到10ml双料乳糖蛋白胨培养液中，取1ml水样接种到10ml.单料乳糖蛋白胨培养液中，另取1ml水样注入9ml灭菌生理盐水中，混匀后吸取1ml注入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，每一稀释度接种5管。

2、将接种管置37℃培养箱内，培养24小时如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸，则可报告为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者则按以下步骤

3、将产酸产气的发酵管分别接种在伊红美兰琼脂平板上，于37℃培养24，观察菌落形态。取可疑菌落进行涂片染色，镜检。

4、将可疑菌落接种于普通浓度乳糖蛋白胨，培养液中，置37℃24h，有产酸产气者证实有大肠菌群存在。

水中菌落总数的测定

——平皿计数法

一、生活饮用水

1、以无菌操作方法用灭菌的方法吸取1ml充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15ml以融化并冷至45ml左右的营养琼脂培养基，并立即混匀，使之水样与培养基充分混匀。每次做平行样和空白样。

2、待凝固后翻转平板置37℃恒温箱培养48h。进行菌落记数。即为水样1ml中的菌落总数。 二、水源水

1、以无菌操作的方法吸取1ml水样注入9ml灭菌盐水的试管中作成1:10稀释液，再按同样方法作几个倍比稀释度。

2、用灭菌吸管吸取2—3个适宜稀释度的稀释液1ml注入平皿。

3、倾注冷却到45℃左右的培养基约15ml，立即旋转平