转基因作物种子检测技术研究进展

转基因作物种子检测技术研究进展

1转基因作物的生产情况及其种子贸易情况

从1996年商品化种植转基因作物以来，全世界每年的转基因作物种植面积均以两位数的百分比增长，已由1996年的170万hm2猛增到2006年的1．02亿hm2，种植转基因农作物的国家从最初的6个增加到22个，累计种植面积达到

5．77亿hm2。lO年间，转基因作物种子的累计全球市场价值(转基因种子的销售价格加上应用技术费用)估计为355亿美元。2006年全球转基因作物种子的销售额(含部分技术费)达61．5亿美元，占全球商业种子市场价值的21％。其中转基因大豆、玉米、棉花和油菜的销售额分别占44％、39％、14％和3％。目前在中国市场上销售的转基因作物种子只有转基因抗虫棉种，截止到2006年，中国累计推广国产转基因抗虫棉1 040万hm2，累计销售棉种约1．0亿kg，销售额约30多亿元。转基因作物生产规模及种子贸易量的飞速增长，显示出巨大的应用价值和商业前景。

2开展转基因作物种子检测技术研究的必要性和紧迫性

就在转基因作物快速发展、种子销售量节节攀升的同时，由于其本身具有的潜在食品安全问题以及通过转基因逃逸可能给生态系统带来的影响，国际社会对转基因作物的生物安全问题表示出日益强烈的关注。2001年1月，包括中国在内的113个国家(地区)在加拿大签署了联合国《生物安全议定书》，明确规定消费者有对于转基因食品的知情权。目前已有30多个国家(地区)宣布或者实施对转基因产品(食品)的标识管理制度，并规定了转基因产品中转基因成分的最高阈

值，对高于规定阈值的产品，必须进行明确标识。这些政策的出台，要求各国必须具备相应的转基因产品检测技术，能够定性定量检测转基因成分。

尽管目前我国还没有转基因种子进口，国内生产经营的转基因作物种子也仅限于棉种，但由于全球转基因作物种植面积逐年增加，转基因种子贸易量不断攀升，进口常规种中混有转基因种子的事件时有发生，这些未经审批流入的转基因种子一旦种植传播，很可能对我国的农业生产带来极大危害。同时，随着转基因作物品种的大量推广应用，种子市场上必然会出现以假充真、以次充好等假劣转基因种子的高价销售问题；而且由于转基因品种随繁育世代的增加可能会发生遗传稳定性的变化，如基因分离、漂移等现象，使转基因种子的纯度降低。因此，很有必要开展转基因种子检测技术的研发工作并逐渐予以标准化，这对于保护种子生产者、经营者和使用者的合法权益，保障我国农业生产和农业生态系统安全稳定具有十分重要的意义。

3转基因作物种子检测技术研究进展

目前国内外开展的转基因检测技术研究主要是针对转基因植物及其产品成分的，而这些技术方法也被广泛用于检测转基因作物种子中的转基因成分及含量。检测技术主要有生物化学测定、蛋白质分析、PCR检测、分子杂交和PCR-ELISA检测等五种。

3．1生物化学测定法

生物化学测定是通过检测转基因作物某一特性的缺失或存在，来判断样品是否为转基因产品。根据检测目标可以分为检测外源抗性基因和检测外源标记基因两种。

3．1．1检测外源抗性基因，如抗除草剂基因、抗虫基因等在转基因作物中的表达。将待测种子播种在含有除草剂的培养基上，或种子正常播种后，用适宜浓度的除草剂处理幼苗，通过种子萌发情况和幼苗性状表现判断转基因品种和非转基因品种；或者将植株幼苗叶片喂食幼虫，通过测定死亡率来判断是否为转基因植株。大量实验证明，该方法具有简单、易操作、检测周期短等优点，是对大量转基因种子样品进行初筛检测的最佳方法。

3．1．2 检测外源标记基因在转基因作物中的表达。主要利用GUS组织化学染色法、NPTⅡ培养法、卡那霉素培养法和NPTⅡ叶片涂抹法对各种转基因种子进行鉴定，实验证明该法操作简单、成本低廉、易于判断且准确性较高。

3．2蛋白质分析法

蛋白质分析法又称免疫分析法，是检测通过基因修饰获得的外源蛋白质最常用的方法。该法利用抗体与抗原的特异性结合来检测外源蛋白的存在，主要分为酶联免疫分析法和侧向流动免疫试纸法两种。

3．2．1酶联免疫分析法

酶联免疫反应又称为ELISA反应，该法具备了酶反应的高灵敏度和抗原抗体反应的特异性，可以定性和定量检测特异蛋白质，具有简便、快速、费用低等优点。但由于可能存在表达的组织特异性和技术要求过高的问题，该法比较适宜已开发出商业化试剂盒的特定外源蛋白的检测。

3．2．2侧向流动免疫试纸法

该法是最近15年发展起来的，起初主要用于医学领域。测定时，将试纸条放在待测样品抽提物中，5～10 min就可得出定性检测结果，按照合适的采样步

骤，可以在给定的一批样品中以99％的置信水平检测出少于O．15％的转基因成分。

该法具有快速、简便、适合野外操作等优点，可用于检测种子中的转基因成分。美国检测StarLink玉米中的Cry 9 C蛋白的试纸条已成为美国官方的检测方法。该方法的局限性在于一种试纸条只能检测一种蛋白质，且只能检测有无存在外源蛋白而不能区分具体的转基因品种。

3．3 PCR检测法

PCR检测法是目前检测转 …… 此处隐藏：6270字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……