05茁霉多糖发酵工艺条件研究(2)

时间：2025-07-09

!以出芽短梗霉为生产菌株!蔗糖为碳源进行发酵生产茁霉多糖0通过摇瓶实验!确定了该菌株的发酵条件!并对发酵条件进行了优化!在此条件下!获得了较高的多糖产量0实验表明!摇瓶转速和发酵初始NA 值是多糖发酵的重要影响因素!它们与多糖的合成密切相关0

&*)三峡大学学报!自然科学版"""#年’月!!!!!!!!!!!!!!!

种子培养基!#蔗糖%$酵母膏"0h"%$-,_!A’

!"0#$‘+_A!_"0"!$Y:9H"0"&$YA’"+_G’%*!’

A70"$"0"7$"0"7‘,:灭菌%"3;B0N

摇瓶培养基!#蔗糖#$酵母膏"0h"%$-,_!A’

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所用分析试剂均为分析纯0

A0C!仪器及设备

高压蒸汽消毒器$净化*!%"Q可见分光光度计$工作台$恒温振荡器$&"[全自动发酵罐等0A0E!方法&0’0&!菌种活化

取出保存在冰箱中的茁霉菌种&用活化培养基进行活化0培养基灭菌后各倒#个培养皿&将斜面菌种划线接种到培养皿进行活化&在!)^恒温箱中培养即得所需的种子0’)D&&0’0!!扩大培养

在#挑""3[三角瓶中装&!#3[的种子培养基&取一环生长良好的菌种接于#个三角瓶中&在!""’培养’即得种子培养液0M3;B的摇床上以!)^&)D&

()

&0’0%!摇瓶发酵’

接种量#菌龄#摇瓶装量##h&’)D&#""3[三角瓶装摇瓶培养基&培养温度#转速#!#3[&!)^&&)"’培养时间#M3;B&(7D0&0’0’!测定方法

!"采用酸度计法0A值#&N

!"多糖含量#采用改良苯酚硫酸法(!$0标准曲线的制备#准确吸取&’""3[葡萄糖标G4准溶液"&相当于"0!#&"0#"&&0""&&0#"&!0""3[!&分别置于&"&!#&#"&&""&&#"&!""4"3[G葡萄糖"具塞刻度试管&加入苯酚液&0混匀且快速加入"3[&在沸水浴中放置&采用流水冷#0"3[浓硫酸B&却后于’("B3处比色测吸光度0

测定#取%3用蒸馏水稀释至&[发酵液&"3[&再从稀释液中取"0稀释至&加少许硅藻’3[&"3[&土搅拌&然后常压过滤&取"0!3[滤液进行测定0&0’0#!发酵工艺流程

斜面菌种&活化培养&扩大培养&摇瓶发酵&发酵液&测糖

粉作为碳源进行选择&摇瓶条件为!’)^$&#"M3;B$结果见表&0(7D&

表A!碳源选择实验!培养基中碳源含量C^"检测项目

碳源种类

!!!!*0!*

&&0)%

多糖含量’!%370%!3[/&"&G

出芽短梗霉在以蔗糖为碳源时!!从表&可以看出&

生长良好&产糖最好&淀粉次之&葡萄糖最差&所以&选蔗糖为碳源0

B0B!通气量对发酵的影响

在两组#分别装入等量的""3[的三角瓶中&其中一组三角瓶具有一块玻璃&!#3[发酵培养基&档板&通过(结果见表!07D的摇瓶培养&