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抗生素效价培训内容

一、需要干热灭菌的器皿：

C

二、以检磷酸泰乐菌素为例配置培养基和缓冲液的准备如下：

㈠①磷酸泰乐菌素原料含量测定标准：精密称取本品适量，加灭菌水定量制成每1ml中约

含1000单位的溶液，照抗生素微生物检定法测定。1000泰乐菌素单位相当于1mg的泰

乐菌素。

成品含量测定标准：精密称取本品适量，置100ml量瓶中，加灭菌磷酸盐缓冲液（pH6.0）

40ml，加甲醇40ml，超声15分钟，摇匀，放冷，加灭菌磷酸盐缓冲液（pH6.0）稀释至

刻度，使成每1ml中约含1000单位的溶液，取上清液，照磷酸泰乐菌素项下的方法测定，

即得。

②查《中国兽药典》2005年版附录103页抗生素微生物检定法，可知：

泰乐菌素 试验菌——藤黄微球菌（28001）；培养基——Ⅱ，pH值为6.5~6.6或7.8~8.0；

灭菌缓冲液pH值——6.0；抗生素浓度范围2.5~10.0；温度——35~37；

时间——16~18

培养基Ⅱ制备方法：

胨 6g；酵母浸出粉 6g；琼脂 15~20g；牛肉浸出粉 1.5g；葡萄糖 1g；水 1000ml

磷酸盐缓冲液（6.0）——取磷酸氢二钾2g与磷酸二氢钾8g，加水使成1000ml。

③缓冲液及培养基配置完成后进行高压121℃湿热灭菌，时间为15~20min。

㈡①标准品、原料、成品取样量的计算方法：

4 标准品效价：1034u/mg 原料效价：800u/mg 成品效价：880×10/100g

原料 800u/mg×x=1000u×10ml x=0.0125g

4成品 100g: 880×10=x:100ml×1000u x=1.13636g

标准品 1034u/mg×x=1000u×10ml x=0.00967g

注意事项：a.称量量必须大于应取的量，多余的量要另加溶液使溶液浓度达到标准；如

标准品取0.00992g,多加溶液量为x, 1034u/mg×9.92mg=1000u×x，x=10.26ml，则

另加溶液0.26ml。另外也要考虑容量瓶的体积，以免称量量过多使之盛不下。b.标准品

应从冰箱拿出后放置室温再进行称量。

②稀释步骤：

取5ml 50u/ml

缓冲液6.0定容至100ml

取5ml

50u/ml 5u/ml

缓冲液6.0定容至50ml

取5ml